| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 文献综述 | 第15-37页 |
| 第一章 产气荚膜梭菌引起的鸡坏死性肠炎研究进展 | 第15-37页 |
| ·人类和动物的梭菌感染 | 第16-23页 |
| ·与毒力有关的产气荚膜梭菌的毒素和酶 | 第17-21页 |
| ·产气荚膜梭菌的全基因组序列 | 第21-22页 |
| ·产气荚膜梭菌的VirR/VirS 调节系统 | 第22-23页 |
| ·鸡坏死性肠炎 | 第23-26页 |
| ·NE 株的分子分型 | 第24页 |
| ·NE 的诱因 | 第24-25页 |
| ·NE 的发病机制 | 第25页 |
| ·NE 的防制 | 第25-26页 |
| ·产气荚膜梭菌感染的免疫保护 | 第26-30页 |
| ·α-毒素在产气荚膜梭菌感染的免疫保护力的作用 | 第27-30页 |
| ·活的口服减毒沙门氏菌重组载体疫苗 | 第30-35页 |
| ·沙门氏菌载体 | 第31-32页 |
| ·质粒载体 | 第32-33页 |
| ·异源性抗原表达及其免疫原性 | 第33-34页 |
| ·细胞抗原表达的位置 | 第34-35页 |
| ·论文设计思路及研究方法 | 第35-37页 |
| 试验研究 | 第37-93页 |
| 第二章 A 型产气荚膜梭菌几种分泌蛋白的分离鉴定 | 第37-48页 |
| ·材料 | 第37-39页 |
| ·菌株及血清抗体 | 第37页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38页 |
| ·SDS-PAGE 及Western blot 缓冲液的配制 | 第38-39页 |
| ·仪器设备 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-43页 |
| ·分泌蛋白的沉淀及浓缩 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第40-41页 |
| ·Western blot | 第41-42页 |
| ·蛋白质质谱分析 | 第42-43页 |
| ·结果 | 第43-45页 |
| ·A 型产气荚膜梭菌外毒素粗提 | 第43页 |
| ·CP4 外毒素的SDS-PAGE 和Western blot 的分析结果 | 第43页 |
| ·三种分泌蛋白的质谱分析结果 | 第43-45页 |
| ·讨论 | 第45-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 第三章 重组蛋白的表达纯化及对肉鸡NE 的免疫保护效果 | 第48-70页 |
| ·材料 | 第48-52页 |
| ·菌种、质粒和载体 | 第48-49页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第49-50页 |
| ·仪器设备 | 第50-51页 |
| ·培养基 | 第51页 |
| ·缓冲液 | 第51-52页 |
| ·实验动物 | 第52页 |
| ·方法 | 第52-61页 |
| ·基因克隆 | 第52-57页 |
| ·重组蛋白的过量表达 | 第57-58页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第58-59页 |
| ·SDS-PAGE 及Western blot 分析 | 第59页 |
| ·重组蛋白的免疫试验 | 第59-60页 |
| ·血清生长抑制试验 | 第60页 |
| ·鸡血清抗体滴度的测定 | 第60-61页 |
| ·结果 | 第61-67页 |
| ·目的基因的克隆 | 第61-62页 |
| ·表达质粒载体的构建 | 第62-63页 |
| ·重组蛋白的表达条件优化 | 第63页 |
| ·6×His-tagged 重组蛋白的纯化 | 第63-65页 |
| ·重组蛋白的浓缩 | 第65页 |
| ·免疫鸡对攻毒诱导的坏死性肠炎的免疫保护性 | 第65-67页 |
| ·重组抗原诱导免疫鸡的抗原特异性的抗体免疫反应 | 第67页 |
| ·血清细菌生长抑制试验结果 | 第67页 |
| ·讨论 | 第67-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 第四章 减毒鼠伤寒沙门氏菌载体疫苗对NE 的免疫保护效果 | 第70-80页 |
| ·材料 | 第70-72页 |
| ·实验动物 | 第70页 |
| ·菌株及质粒 | 第70-71页 |
| ·试剂及培养基 | 第71-72页 |
| ·各种溶液的配制 | 第72页 |
| ·方法 | 第72-74页 |
| ·疫苗株的准备 | 第72页 |
| ·动物饲养管理 | 第72-73页 |
| ·疫苗免疫试验 | 第73页 |
| ·病理剖检 | 第73页 |
| ·抗体滴度的ELISA 测定 | 第73-74页 |
| ·结果 | 第74-77页 |
| ·免疫鸡对试验诱导的NE 的免疫保护性 | 第74页 |
| ·疫苗免疫诱导的抗原特异性抗体免疫反应 | 第74-77页 |
| ·讨论 | 第77-79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 第五章 减毒鼠伤寒沙门氏菌载体疫苗对沙门氏菌的免疫保护效果 | 第80-93页 |
| ·材料 | 第81-83页 |
| ·实验动物 | 第81页 |
| ·菌株 | 第81页 |
| ·药品试剂 | 第81-82页 |
| ·培养基及溶液的配制 | 第82-83页 |
| ·方法 | 第83-86页 |
| ·药敏试验 | 第83页 |
| ·抗萘啶酸沙门氏菌菌株的选育 | 第83页 |
| ·实验动物的饲养管理 | 第83-84页 |
| ·攻毒菌株的准备 | 第84页 |
| ·疫苗株的准备 | 第84页 |
| ·免疫程序和细菌定殖减少的评价 | 第84-85页 |
| ·样品采集 | 第85页 |
| ·粪便样品中疫苗株细菌的计数 | 第85页 |
| ·内脏组织中攻毒菌株细菌的计数 | 第85页 |
| ·粪便样品中攻毒株细菌的计数 | 第85-86页 |
| ·结果 | 第86-90页 |
| ·药敏试验结果 | 第86页 |
| ·免疫鸡粪便样品中的疫苗株计数结果 | 第86-87页 |
| ·疫苗株χ9241-tHP 诱导的攻毒菌株定殖减少结果 | 第87-88页 |
| ·疫苗株χ9352–tHP 诱导的攻毒菌株定殖减少结果 | 第88-90页 |
| ·讨论 | 第90-92页 |
| ·小结 | 第92-93页 |
| 结论 | 第93-94页 |
| 本论文的创新点 | 第94-95页 |
| 参考文献 | 第95-108页 |
| 附录 | 第108-116页 |
| 缩略词 | 第116-118页 |
| 致谢 | 第118-119页 |
| 作者简介 | 第119-120页 |
