| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 综述 | 第10-20页 |
| 1.1 仿刺参 | 第10-11页 |
| 1.1.1 仿刺参概况 | 第10页 |
| 1.1.2 仿刺参的营养价值与功效 | 第10-11页 |
| 1.2 仿刺参的人工养殖 | 第11-12页 |
| 1.2.1 养殖现状 | 第11页 |
| 1.2.2 养殖中出现的问题 | 第11-12页 |
| 1.2.3 微生态制剂在水产养殖中的应用 | 第12页 |
| 1.3 肠道菌群 | 第12-14页 |
| 1.3.1 肠道菌群的作用 | 第12-13页 |
| 1.3.2 肠道菌群的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.4 微生物的多样性的研究方法 | 第14-18页 |
| 1.4.1 培养依赖法 | 第14-15页 |
| 1.4.1.1 传统的分离培养方法 | 第14页 |
| 1.4.1.2 传统培养方法的缺陷 | 第14-15页 |
| 1.4.1.3 传统的细菌鉴定方法 | 第15页 |
| 1.4.1.4 基于16S rDNA序列分析的细菌鉴定方法 | 第15页 |
| 1.4.2 不依赖培养的分子技术 | 第15-18页 |
| 1.4.2.1 DNA提取技术 | 第16页 |
| 1.4.2.2 构建16S rDNA克隆文库的分析方法 | 第16-17页 |
| 1.4.2.3 变性梯度凝胶电泳(DGGE)和温度梯度凝胶电泳(TGGE) | 第17-18页 |
| 1.4.2.4 限制性片段长度多态性(RFLP)分析 | 第18页 |
| 1.5 本论文的研究内容与意义 | 第18-20页 |
| 第二章 传统细菌分离培养方法研究仿刺参肠道菌群多样性 | 第20-37页 |
| 2.1 前言 | 第20页 |
| 2.2 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.2.1 实验样品 | 第20页 |
| 2.2.2 主要培养基 | 第20页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 2.2.4 主要试剂 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-25页 |
| 2.3.1 样品的处理 | 第22页 |
| 2.3.2 可培养细菌的培养和分离 | 第22-23页 |
| 2.3.3 细菌的鉴定 | 第23-25页 |
| 2.3.3.1 细菌的菌落及菌体形态观察 | 第23页 |
| 2.3.3.2 生理生化试验 | 第23-24页 |
| 2.3.3.3 16S rDNA序列分析 | 第24-25页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第25-37页 |
| 2.4.1 仿刺参肠道细菌的培养和分离 | 第25-28页 |
| 2.4.2 仿刺参肠道细菌的生理生化试验 | 第28-29页 |
| 2.4.3 16S rDNA序列分析 | 第29-34页 |
| 2.4.3.1 DNA的提取 | 第29-30页 |
| 2.4.3.2 16S rDNA片段的扩增 | 第30-31页 |
| 2.4.3.3 16S rDNA序列的测定及系统发育树的构建 | 第31-34页 |
| 2.4.4 仿刺参肠道细菌菌相分析 | 第34-37页 |
| 2.4.4.1 仿刺参前后肠道菌相组成 | 第34-35页 |
| 2.4.4.2 不同季节仿刺参肠道菌相组成 | 第35-37页 |
| 第三章 16S RDNA克隆文库分析仿刺参肠道菌群多样性 | 第37-52页 |
| 3.1 前言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料 | 第37-39页 |
| 3.2.1 实验样品 | 第37页 |
| 3.2.2 主要培养基 | 第37页 |
| 3.2.3 主要仪器 | 第37-38页 |
| 3.2.4 主要试剂 | 第38-39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-45页 |
| 3.3.1 样品处理 | 第39页 |
| 3.3.2 肠道总细菌DNA提取 | 第39-40页 |
| 3.3.3 16S rDNA片段的扩增 | 第40-41页 |
| 3.3.4 PCR产物的纯化 | 第41页 |
| 3.3.5 构建16S rDNA克隆文库 | 第41-45页 |
| 3.3.5.1 CaCl_2法制备感受态细胞 | 第41-42页 |
| 3.3.5.2 PCR产物与T载体的连接 | 第42页 |
| 3.3.5.3 转化 | 第42-43页 |
| 3.3.5.4 阳性克隆的筛选 | 第43-45页 |
| 3.3.5.5 限制性片段多态性分析和系统发育分析 | 第45页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第45-52页 |
| 3.4.1 肠道总细菌DNA提取 | 第45-46页 |
| 3.4.2 16S rDNA片段的扩增及纯化 | 第46-47页 |
| 3.4.3 构建16S rDNA克隆文库 | 第47-52页 |
| 3.4.3.1 连接和克隆转化 | 第47-48页 |
| 3.4.3.2 阳性克隆的筛选 | 第48-49页 |
| 3.4.3.3 限制性片段多态性分析 | 第49-50页 |
| 3.4.3.4 构建16S rDNA克隆文库过程的探讨 | 第50-52页 |
| 第四章 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
