| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 英文缩略词表 | 第6-9页 |
| 第1章 引言 | 第9-20页 |
| 1.1 依赖 FEEDER 的培养体系 | 第9-13页 |
| 1.1.1 动物源性 Feeder 培养体系 | 第9-11页 |
| 1.1.2 人源性 Feeder 培养体系 | 第11-13页 |
| 1.2 FEEDER-FREE 培养体系，组分从不明确到明确的过程 | 第13-17页 |
| 1.2.1 成分不明确的条件培养基体系 | 第13页 |
| 1.2.2 成分明确的培养体系 | 第13-17页 |
| 1.3 新型生物合成材料构建的培养体系 | 第17页 |
| 1.4 3D 生物反应器悬浮培养体系 | 第17页 |
| 1.5 存在的问题展望 | 第17-20页 |
| 第2章 材料与方法 | 第20-29页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 主要仪器和设备 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-29页 |
| 2.2.1 CF-1 MEFs 的原代获取 | 第21页 |
| 2.2.2 CF-1 MEFs 的传代 | 第21-22页 |
| 2.2.3 CF-1 MEFs 的冻存 | 第22页 |
| 2.2.4 CF-1 MEFs 的复苏 | 第22页 |
| 2.2.5 传统方法 Feeder 细胞的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.6 悬浮-贴壁法 Feeder 细胞的制备( 图 2.1 ) | 第23-24页 |
| 2.2.7 搅拌式细胞培养转瓶机法 Feeder 细胞的制备( 图 2.2 ) | 第24-25页 |
| 2.2.8 细胞计数 | 第25页 |
| 2.2.9 EdU 检测 | 第25页 |
| 2.2.10 传统方法、悬浮-贴壁法和细胞培养转瓶机法直接贴壁率比较 | 第25页 |
| 2.2.11 传统方法、悬浮-贴壁法和细胞培养转瓶机法复苏率比较 | 第25页 |
| 2.2.12 传统方法、悬浮-贴壁法和细胞培养转瓶机法存活时间比较 | 第25-26页 |
| 2.2.13 流式细胞周期 Feeder 细胞凋亡检测 | 第26页 |
| 2.2.14 质谱法 MMC 残余量检测 | 第26页 |
| 2.2.15 Feeder 与 hHF-MSC-iPSCs 共培养 | 第26页 |
| 2.2.16 hESC 多能性标记物鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.17 体外拟胚体形成试验 | 第27-28页 |
| 2.2.18 体内畸胎瘤形成试验 | 第28-29页 |
| 第3章 实验结果 | 第29-47页 |
| 3.1 原代 CF-1 MEFS 获得及传代培养 | 第29页 |
| 3.2 传统方法 FEEDER 细胞的制备 | 第29-31页 |
| 3.3 悬浮-贴壁法 FEEDER 细胞的制备 | 第31-35页 |
| 3.4 搅拌式细胞培养转瓶机法制备 FEEDER 细胞 | 第35-37页 |
| 3.5 传统方法、悬浮-贴壁法与细胞培养转瓶机法对比试验 | 第37-39页 |
| 3.6 流式细胞周期检测 FEEDER 细胞凋亡 | 第39-41页 |
| 3.7 质谱法 MMC 残余量检测 | 第41-43页 |
| 3.8 传统方法、悬浮-贴壁法和细胞培养转瓶机法制备的 FEEDER 细胞均能很好的支持 HHF-MSC-IPSCS的生长 | 第43-44页 |
| 3.9 HHF-MSC-IPSCS 标记物鉴定 | 第44页 |
| 3.10 HHF-MSC-IPSCS 多潜能性鉴定 | 第44-47页 |
| 第4章 讨论 | 第47-50页 |
| 第5章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
