| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第12-27页 |
| 1.1 禾谷镰刀菌 | 第12-14页 |
| 1.1.1 禾谷镰刀菌的生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.1.2 禾谷镰刀菌的生活史和侵染循环 | 第13页 |
| 1.1.3 禾谷镰刀菌中激酶的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2 稻瘟菌 | 第14-18页 |
| 1.2.1 稻瘟菌的生物学特征 | 第14-15页 |
| 1.2.2 稻瘟菌的生活史和侵染循环 | 第15页 |
| 1.2.3 稻瘟菌中致病相关的信号通路 | 第15-17页 |
| 1.2.4 稻瘟菌细胞周期介导的侵染植物过程调控 | 第17-18页 |
| 1.3 Cdc14磷酸酶研究进展 | 第18-25页 |
| 1.3.1 蛋白磷酸酶的分类 | 第18-19页 |
| 1.3.2 Cdc14磷酸酶家族 | 第19页 |
| 1.3.3 Cdc14在芽殖酵母中的研究 | 第19-21页 |
| 1.3.4 Cdc14在裂殖酵母中的研究 | 第21页 |
| 1.3.5 Cdc14在哺乳动物中的研究 | 第21-22页 |
| 1.3.6 Cdc14在丝状真菌中的研究进展 | 第22页 |
| 1.3.7 Cdc14调控胞质分裂的研究 | 第22-24页 |
| 1.3.8 Cdc14磷酸酶的定位 | 第24-25页 |
| 1.4 本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 CDC14基因的结构分析与功能预测 | 第27-32页 |
| 2.1 材料与方法 | 第27-28页 |
| 2.1.1 材料 | 第27页 |
| 2.1.1.1 主要软件工具 | 第27页 |
| 2.1.1.2 主要数据库 | 第27页 |
| 2.1.2 方法 | 第27-28页 |
| 2.1.2.1 CDC14基因的预测与进化分析 | 第27-28页 |
| 2.1.2.2 Cdc14的结构和磷酸酶活性位点分析 | 第28页 |
| 2.1.2.3 Cdc14的三维结构预测 | 第28页 |
| 2.2 结果与分析 | 第28-31页 |
| 2.2.1 Cdc14磷酸酶的进化分析 | 第28-29页 |
| 2.2.2 FgCdc14和MoCdc14磷酸酶的结构分析和功能预测 | 第29-30页 |
| 2.2.3 FgCdc14和MoCdc14的DSPc结构域的三维结构预测 | 第30-31页 |
| 2.3 讨论 | 第31-32页 |
| 第三章 禾谷镰刀菌中FgCDC14基因的功能分析 | 第32-60页 |
| 3.1 材料 | 第32-33页 |
| 3.1.1 载体，菌株及培养条件 | 第32-33页 |
| 3.1.2 主要试剂及试剂盒 | 第33页 |
| 3.2 方法 | 第33-40页 |
| 3.2.1 FgCDC14基因的敲除 | 第33页 |
| 3.2.2 禾谷镰刀菌原生质体转化 | 第33-34页 |
| 3.2.3 FgCDC14基因敲除转化子的southern杂交检验 | 第34-35页 |
| 3.2.4 禾谷镰刀菌基因组DNA、RNA和蛋白质的提取 | 第35-36页 |
| 3.2.4.1 基因组DNA的提取 | 第35页 |
| 3.2.4.2 RNA的提取及反转录 | 第35-36页 |
| 3.2.4.3 蛋白的提取 | 第36页 |
| 3.2.5 菌落形态观察及生长速率测定 | 第36页 |
| 3.2.6 分生孢子产孢率测定和形态观察 | 第36页 |
| 3.2.7 有性态表型观察 | 第36-37页 |
| 3.2.8 禾谷镰刀菌致病性观察 | 第37页 |
| 3.2.8.1 小麦穗接种实验 | 第37页 |
| 3.2.8.2 玉米须接种实验 | 第37页 |
| 3.2.8.3 禾谷镰刀菌侵染小麦穗的显微观察 | 第37页 |
| 3.2.9 DAPI和Calcofluor染色 | 第37页 |
| 3.2.10 FgCDC14蛋白的纯化 | 第37-38页 |
| 3.2.11 磷酸肽制备和酶活性测定 | 第38-39页 |
| 3.2.12 FgCdc14磷酸酶底物预测 | 第39页 |
| 3.2.13 酵母双杂交验证 | 第39页 |
| 3.2.14 Cdc2A和Cdc2B磷酸化分析 | 第39-40页 |
| 3.3 结果与分析 | 第40-57页 |
| 3.3.1 FgCDC14的敲除 | 第40页 |
| 3.3.2 FgCDC14对禾谷镰刀菌的生长和产孢具有重要作用 | 第40-42页 |
| 3.3.3 FgCDC14的敲除影响隔膜的形成和细胞核的分布 | 第42-44页 |
| 3.3.4 FgCDC14的敲除影响了Actin环的收缩 | 第44页 |
| 3.3.5 Fgcdc14突变体子囊孢子的形成中存在缺陷 | 第44-46页 |
| 3.3.6 FgCDC14基因在侵染植物的过程中发挥重要作用 | 第46-47页 |
| 3.3.7 FgCdc14定位在细胞核和微管组织中心（MTOC） | 第47-49页 |
| 3.3.8 FgCdc14磷酸酶具有类似于芽殖酵母Cdc14的底物特异性 | 第49-54页 |
| 3.3.9 磷酸酶活性对FgCdc14的功能至关重要但不影响其亚细胞定位 | 第54-55页 |
| 3.3.10 预测FgCdc14的底物 | 第55-56页 |
| 3.3.11 Fgcdc14突变体中Cdc2A/2B在Tyr15位点磷酸化水平下降 | 第56-57页 |
| 3.4 讨论 | 第57-60页 |
| 第四章 稻瘟菌中MoCDC14基因的功能分析 | 第60-77页 |
| 4.1 材料与方法 | 第60-62页 |
| 4.1.1 菌株及培养条件 | 第60页 |
| 4.1.2 MoCDC14基因的敲除 | 第60-61页 |
| 4.1.3 构建MoCDC14-GFP融合载体 | 第61页 |
| 4.1.4 附着胞的形成，穿透和植物侵染实验 | 第61-62页 |
| 4.1.5 附着胞类似结构的形成，穿透和植物侵染实验 | 第62页 |
| 4.1.6 细胞壁染色和糖原染色实验 | 第62页 |
| 4.1.7 qRT-PCR分析 | 第62页 |
| 4.2 结果与分析 | 第62-74页 |
| 4.2.1 MoCDC14对营养生长和细胞核在菌丝中的分布很重要 | 第62-65页 |
| 4.2.2 Mocdc14敲除突变体产孢有缺陷 | 第65-66页 |
| 4.2.3 敲除MoCDC14影响附着胞处隔膜的形成 | 第66-67页 |
| 4.2.4 MoCDC14基因对菌丝顶端附着胞类似结构的划定也有重要作用 | 第67-68页 |
| 4.2.5 MoCDC14在侵染植物过程具有重要作用 | 第68-69页 |
| 4.2.6 MoCDC14对附着胞的穿透和侵染型菌丝的生长具有重要作用 | 第69页 |
| 4.2.7 MoCDC14对菌丝头产的附着胞类似结构的穿透和侵染有重要作用 | 第69-70页 |
| 4.2.8 互补和MoCdc14的亚细胞定位 | 第70-71页 |
| 4.2.9 MoCDC14基因的敲除影响了糖原的运输 | 第71-72页 |
| 4.2.10 MoCDC14的敲除降低了CON1和CON7的表达水平 | 第72-74页 |
| 4.3 讨论 | 第74-77页 |
| 第五章 全文总结与展望 | 第77-80页 |
| 参考文献 | 第80-91页 |
| 附录 | 第91-99页 |
| 缩略词 | 第99-100页 |
| 致谢 | 第100-102页 |
| 作者简介 | 第102页 |
