| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-27页 |
| 1.1 引言 | 第14-15页 |
| 1.2 植物花色与花青苷 | 第15-17页 |
| 1.3 花青苷合成的转录调控 | 第17-25页 |
| 1.3.1 MYB转录因子概述 | 第17-18页 |
| 1.3.2 bHLH转录因子概述 | 第18-19页 |
| 1.3.3 WD40或WDR蛋白概述 | 第19-20页 |
| 1.3.4 MYB-bHLH-WD40复合物对花色调控研究进展 | 第20-25页 |
| 1.4 葡萄风信子花色研究进展 | 第25页 |
| 1.5 本研究的目的意义 | 第25-27页 |
| 第二章 葡萄风信子花色相关R2R3-MYB转录因子基因MaMybA和MaAN2克隆及基本特性分析 | 第27-44页 |
| 2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第27-28页 |
| 2.1.2 载体 | 第28页 |
| 2.1.3 主要试剂和菌株 | 第28页 |
| 2.2 方法 | 第28-31页 |
| 2.2.1 引物设计和基因测序 | 第28页 |
| 2.2.2 植物总RNA提取和cDNA合成 | 第28-29页 |
| 2.2.3 基因克隆 | 第29页 |
| 2.2.4 序列比对和聚类分析 | 第29页 |
| 2.2.5 载体构建 | 第29页 |
| 2.2.6 亚细胞定位 | 第29-30页 |
| 2.2.7 转录激活活性试验 | 第30-31页 |
| 2.2.8 qRT-PCR试验 | 第31页 |
| 2.2.9 葡萄风信子不同组织器官总花青苷相对含量测定 | 第31页 |
| 2.3 结果与分析 | 第31-42页 |
| 2.3.1 葡萄风信子花色相关R2R3-MYB转录因子基因MaMybA的克隆 | 第31-34页 |
| 2.3.2 葡萄风信子花色相关R2R3-MYB转录因子基因MaAN2的克隆 | 第34页 |
| 2.3.3 MaMybA和MaAN2序列分析和聚类分析 | 第34-37页 |
| 2.3.4 MaMybA和MaAN2亚细胞定位分析 | 第37-39页 |
| 2.3.5 MaMybA和MaAN2转录激活活性分析 | 第39页 |
| 2.3.6 葡萄风信子总花青苷相对含量测定和MaMybA、MaAN2转录表达分析 | 第39-41页 |
| 2.3.7 花青苷途径结构基因在葡萄风信子5个花发育时期的转录表达分析 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 葡萄风信子花色相关R2R3-MYB转录因子与bHLH蛋白的互作研究 | 第44-58页 |
| 3.1 材料 | 第44页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 3.1.2 载体 | 第44页 |
| 3.1.3 主要试剂和菌株 | 第44页 |
| 3.2 方法 | 第44-47页 |
| 3.2.1 引物设计和基因测序 | 第44页 |
| 3.2.2 植物总RNA提取和cDNA合成 | 第44页 |
| 3.2.3 基因克隆 | 第44-45页 |
| 3.2.4 序列比对和聚类分析 | 第45页 |
| 3.2.5 亚细胞定位 | 第45页 |
| 3.2.6 转录激活活性试验 | 第45页 |
| 3.2.7 qRT-PCR试验 | 第45页 |
| 3.2.8 双分子荧光互补试验 | 第45-47页 |
| 3.3 结果与分析 | 第47-56页 |
| 3.3.1 葡萄风信子花色相关bHLH转录因子基因MabHLH1的克隆 | 第47页 |
| 3.3.2 MabHLH1序列分析和聚类分析 | 第47-50页 |
| 3.3.3 MabHLH1亚细胞定位和转录激活活性分析 | 第50-52页 |
| 3.3.4 MabHLH1转录表达分析 | 第52页 |
| 3.3.5 MabHLH1与MaMybA的互作验证 | 第52-53页 |
| 3.3.6 MabHLH1与MaAN2的互作验证 | 第53-54页 |
| 3.3.7 AtTT8与MaMybA的互作验证 | 第54-55页 |
| 3.3.8 AtTT8与MaAN2的互作验证 | 第55-56页 |
| 3.4 讨论 | 第56-58页 |
| 第四章 葡萄风信子花色相关转录因子MYB-bHLH复合物对花青苷途径结构基因的调控研究 | 第58-66页 |
| 4.1 材料 | 第58页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第58页 |
| 4.1.2 载体 | 第58页 |
| 4.1.3 主要试剂和菌株 | 第58页 |
| 4.2 方法 | 第58-61页 |
| 4.2.1 启动子序列分析 | 第58页 |
| 4.2.2 AtPAP1基因克隆 | 第58-59页 |
| 4.2.3 植物基因组DNA的提取和纯化 | 第59页 |
| 4.2.4 AtDFR启动子克隆 | 第59页 |
| 4.2.5 双荧光素酶植物表达载体构建 | 第59-60页 |
| 4.2.6 瞬时转化烟草和荧光素酶活性测定 | 第60-61页 |
| 4.3 结果与分析 | 第61-64页 |
| 4.3.1 葡萄风信子花青苷途径结构基因启动子顺式作用元件分析 | 第61页 |
| 4.3.2 AtTT8与R2R3-MYBs对花青苷途径结构基因的调控分析 | 第61-62页 |
| 4.3.3 MabHLH1与R2R3-MYBs对花青苷途径结构基因的调控分析 | 第62-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-66页 |
| 第五章 葡萄风信子MaMybA和MaAN2功能分析 | 第66-84页 |
| 5.1 材料 | 第66页 |
| 5.1.1 植物材料 | 第66页 |
| 5.1.2 载体 | 第66页 |
| 5.1.3 主要试剂和菌株 | 第66页 |
| 5.2 方法 | 第66-70页 |
| 5.2.1 转化烟草的植物表达载体构建 | 第66-67页 |
| 5.2.2 烟草遗传转化 | 第67-68页 |
| 5.2.3 转基因植株的鉴定和培养 | 第68页 |
| 5.2.4 烟草叶片解剖结构观察 | 第68页 |
| 5.2.5 烟草叶片和花冠表皮细胞形态观察 | 第68-69页 |
| 5.2.6 烟草花青苷定性分析 | 第69页 |
| 5.2.7 烟草花青苷含量测定 | 第69-70页 |
| 5.2.8 烟草花青苷结构鉴定 | 第70页 |
| 5.2.9 qRT-PCR试验 | 第70页 |
| 5.3 结果与分析 | 第70-80页 |
| 5.3.1 过量表达MaMybA和MaAN2烟草表型分析 | 第70-73页 |
| 5.3.2 过量表达MaMybA和MaAN2烟草叶片组织解剖结构分析 | 第73-74页 |
| 5.3.3 过量表达MaMybA和MaAN2烟草叶片和花冠表皮细胞形态观察 | 第74页 |
| 5.3.4 过量表达MaMybA和MaAN2烟草叶片和花冠花青苷成分鉴定 | 第74-76页 |
| 5.3.5 过量表达MaMybA和MaAN2烟草叶片和花冠花青苷含量测定 | 第76-77页 |
| 5.3.6 过量表达MaMybA烟草花青苷途径相关基因表达分析 | 第77-79页 |
| 5.3.7 过量表达MaAN2烟草花青苷途径相关基因表达分析 | 第79-80页 |
| 5.4 讨论 | 第80-84页 |
| 第六章 结论、创新点和研究展望 | 第84-86页 |
| 6.1 结论 | 第84-85页 |
| 6.2 创新点 | 第85页 |
| 6.3 研究展望 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-96页 |
| 附录 | 第96-103页 |
| 缩略词 | 第103-105页 |
| 致谢 | 第105-107页 |
| 个人简介 | 第107页 |
