| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7页 |
| 第1章 绪论 | 第11-31页 |
| 1.1 维生素K简介 | 第11-14页 |
| 1.1.1 维生素K与电子传递链 | 第12-13页 |
| 1.1.2 维生素K发现与认知历史 | 第13-14页 |
| 1.2 维生素K生理功能及相关研究 | 第14-19页 |
| 1.2.1 维生素K的促进凝血功能 | 第14-15页 |
| 1.2.2 维持骨骼代谢,防治骨质疏松 | 第15-16页 |
| 1.2.3 增强线粒体功能,治疗帕金森症 | 第16-17页 |
| 1.2.4 防治肝癌 | 第17-18页 |
| 1.2.5 维生素K_2具有的广谱抗肿瘤作用 | 第18-19页 |
| 1.3 维生素K_2的生产 | 第19-26页 |
| 1.3.1 化学合成法 | 第19-23页 |
| 1.3.2 微生物发酵法 | 第23-26页 |
| 1.4 重组毕赤酵母 | 第26-30页 |
| 1.4.1 芳香族异戊烯基转移酶 | 第26-29页 |
| 1.4.2 酵母表达系统 | 第29-30页 |
| 1.5 目的和意义 | 第30页 |
| 1.6 本章小结 | 第30-31页 |
| 第2章 NovQ异戊烯基转移酶的表达优化 | 第31-39页 |
| 2.1 前言 | 第31页 |
| 2.2 实验材料与方法 | 第31-34页 |
| 2.2.1 菌株 | 第31页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第31页 |
| 2.2.3 主要仪器设备与耗材 | 第31-32页 |
| 2.2.4 培养基、溶液配制方法 | 第32-33页 |
| 2.2.5 重组毕赤酵母菌株的摇瓶培养和表达优化 | 第33页 |
| 2.2.6 重组毕赤酵母罐上培养过程NovQ的诱导表达 | 第33页 |
| 2.2.7 异戊烯基转移酶NovQ定量检测方法 | 第33-34页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第34-38页 |
| 2.3.1 重组毕赤酵母摇瓶培养过程中NovQ表达优化结果 | 第34-37页 |
| 2.3.2 30L发酵罐中重组毕赤酵母NovQ表达结果 | 第37-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-39页 |
| 第3章 活细胞催化合成MK-3条件优化 | 第39-51页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 实验材料与方法 | 第39-40页 |
| 3.2.1 菌株 | 第39页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第39页 |
| 3.2.3 主要仪器设备与耗材 | 第39页 |
| 3.2.4 培养基、溶液配制方法 | 第39-40页 |
| 3.2.5 活细胞催化剂来源 | 第40页 |
| 3.2.6 全细胞催化合成MK-3条件单因素响应面优化 | 第40页 |
| 3.2.7 MK-3检测方法 | 第40页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第40-50页 |
| 3.3.1 Gpn12全细胞催化合成维MK-3单因素优化结果与分析 | 第40-46页 |
| 3.3.2 响应面优化结果与分析 | 第46-50页 |
| 3.4 本章小结 | 第50-51页 |
| 第4章 30L发酵罐中活细胞催化合成MK-3初步研究 | 第51-56页 |
| 4.1 前言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料与方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 菌株 | 第51页 |
| 4.2.2 主要试剂 | 第51页 |
| 4.2.3 主要仪器设备与耗材 | 第51页 |
| 4.2.4 培养基、溶液配制方法 | 第51-52页 |
| 4.2.5 30L发酵罐高密度流加发酵生产细胞催化剂 | 第52页 |
| 4.2.6 30L发酵罐中毕赤酵母催化合成MK-3 | 第52页 |
| 4.2.7 MK-3检测方法 | 第52页 |
| 4.2.8 生物量测定 | 第52-53页 |
| 4.3 实验结果与分析 | 第53-55页 |
| 4.3.1 催化时间对MK-3产量的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.2 细胞浓度对MK-3产量的影响 | 第54-55页 |
| 4.4 本章小结 | 第55-56页 |
| 第5章 二甲基丙烯基焦磷酸及法尼基焦磷酸化学合成 | 第56-60页 |
| 5.1 前言 | 第56-57页 |
| 5.2 实验材料和方法 | 第57-58页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第57页 |
| 5.2.2 主要仪器设备和耗材 | 第57页 |
| 5.2.3 溶液配制 | 第57页 |
| 5.2.4 合成焦磷酸氢-三(四-正丁铵) | 第57页 |
| 5.2.5 洗脱液检测 | 第57-58页 |
| 5.2.6 法尼基氯合成 | 第58页 |
| 5.2.7 DMAPP和法尼基焦磷酸合成 | 第58页 |
| 5.3 实验结果与分析 | 第58-59页 |
| 5.4 本章小结 | 第59-60页 |
| 第6章 总结与展望 | 第60-62页 |
| 6.1 总结 | 第60-61页 |
| 6.2 展望——不足和改进 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第72页 |
