| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略语表Abbreviation | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-39页 |
| 1.1 植物寄生线虫 | 第13-23页 |
| 1.1.1 世界十大植物寄生线虫 | 第13-15页 |
| 1.1.2 根结线虫简介 | 第15-20页 |
| 1.1.3 植物对寄生线虫的抗性机制 | 第20-22页 |
| 1.1.4 植物寄生线虫防治的重要性 | 第22-23页 |
| 1.2 苏云金芽胞杆菌及其天然杀线虫活性组分 | 第23-25页 |
| 1.2.1 苏云金芽胞杆菌简介 | 第23-24页 |
| 1.2.2 苏云金芽胞杆菌杀线虫活性蛋白 | 第24-25页 |
| 1.2.3 苏云金芽胞杆菌杀线虫活性小分子 | 第25页 |
| 1.3 反式乌头酸研究概况 | 第25-37页 |
| 1.3.1 乌头酸异构体的结构与特性 | 第25-27页 |
| 1.3.2 ―反式乌头酸安全性”错案的平反 | 第27-29页 |
| 1.3.3 反式乌头酸的生物学活性 | 第29-31页 |
| 1.3.5 反式乌头酸的工业生产与用途 | 第31页 |
| 1.3.6 反式乌头酸的生物合成 | 第31-37页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第37-39页 |
| 2 材料与方法 | 第39-66页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-53页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第39-45页 |
| 2.1.2 引物 | 第45-49页 |
| 2.1.3 植物材料 | 第49页 |
| 2.1.4 培养基及抗生素 | 第49-50页 |
| 2.1.5 常用生物公司试剂 | 第50页 |
| 2.1.6 实验室试剂配方 | 第50-51页 |
| 2.1.7 实验仪器 | 第51-53页 |
| 2.2 实验方法 | 第53-66页 |
| 2.2.1 DNA常规操作 | 第53-56页 |
| 2.2.2 RNA常规操作 | 第56-58页 |
| 2.2.3 TAA (CT-A)物质的检测、制备与定量 | 第58-61页 |
| 2.2.4 蛋白质相关操作 | 第61-63页 |
| 2.2.5 荧光显微镜观察 | 第63页 |
| 2.2.6 南方根结线虫常规操作 | 第63-65页 |
| 2.2.7 植物对南方根结线虫抗性的评价标准 | 第65-66页 |
| 3 结果与分析 | 第66-111页 |
| 3.1 苏云金芽胞杆菌CT-A物质对南方根结线虫具有高毒力 | 第66-68页 |
| 3.2 杀线虫活性为反式构象乌头酸所特有 | 第68-70页 |
| 3.2.1 TAA标准品对南方根结线虫毒力的测定 | 第68页 |
| 3.2.2 乌头酸异构体对南方根结线虫毒杀活性的差异 | 第68-70页 |
| 3.3 基于基因敲除策略克隆CT-A (TAA)生物合成基因 | 第70-75页 |
| 3.3.1 质粒pCT281上次级代谢产物生物合成基因簇生物信息学分析 | 第70页 |
| 3.3.2 确定大质粒pCT281上待敲除的CT-A (TAA)合成候选基因 | 第70-73页 |
| 3.3.3 获得了7个独立的基因敲除CT-43 突变株 | 第73-74页 |
| 3.3.4 候选基因缺失对CT-43 突变株产生CT-A表型的影响 | 第74-75页 |
| 3.4 质粒pCT281上TAA (CT-A)生物合成基因簇的克隆 | 第75-82页 |
| 3.4.1 对质粒pCT281序列的生物信息学再分析 | 第75-78页 |
| 3.4.2 tbrA基因与tbrB基因位于同一操纵子内 | 第78页 |
| 3.4.3 tbr操纵子是CT-43 菌株中TAA生物合成基因簇 | 第78-80页 |
| 3.4.4 TAA生物合成基因的缺失 | 第80-82页 |
| 3.4.5 TAA生物合成基因缺失突变株的回补 | 第82页 |
| 3.5 TAA生物合成基因的功能验证 | 第82-92页 |
| 3.5.1 TbrA蛋白的功能验证 | 第82-86页 |
| 3.5.2 TbrB蛋白的功能验证 | 第86-91页 |
| 3.5.3 由tbr操纵子介导的芽胞杆菌TAA生物合成途径 | 第91-92页 |
| 3.6 tbr操纵子在蜡状芽胞杆菌群中的分布 | 第92-94页 |
| 3.7 植物TAA生物合成基因的搜寻 | 第94-103页 |
| 3.7.1 玉米关联群体叶片样本的TAA含量测定 | 第94-101页 |
| 3.7.2 GWAS分析玉米中潜在TAA生物合成基因 | 第101-103页 |
| 3.8 植物内源TAA含量与其南方根结线虫抗性正向相关 | 第103-106页 |
| 3.8.1 不同植物内源TAA含量差异显著 | 第103-104页 |
| 3.8.2 植物内源TAA含量与其南方根结线虫抗性关系 | 第104-106页 |
| 3.9 基于TAA活性分子防治植物根结线虫 | 第106-111页 |
| 3.9.1 环境因子对乌头酸分子稳定性的影响 | 第106-107页 |
| 3.9.2 玉米组织拌土对南方根结线虫的防治效果 | 第107-108页 |
| 3.9.3 高产TAA Bt菌株发酵液灌根对南方根结线虫的防治效果 | 第108-109页 |
| 3.9.4 TAA活性分子能显著抑制南方根结线虫虫卵孵化 | 第109-111页 |
| 4 讨论与展望 | 第111-120页 |
| 4.1 革兰氏阳性与阴性细菌中乌头酸异构酶的比较 | 第111-112页 |
| 4.2 微生物乌头酸代谢的生物学意义 | 第112-114页 |
| 4.3 植物乌头酸代谢的生物学意义 | 第114-115页 |
| 4.3.1 TAA是新型植物免疫相关活性分子 | 第114页 |
| 4.3.2 TAA是玉米的碳源储备 | 第114-115页 |
| 4.4 TAA多重生物学活性的机制 | 第115-116页 |
| 4.5 基于TAA防治植物寄生线虫的策略与优势 | 第116-118页 |
| 4.6 TAA与高等动物代谢免疫 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-132页 |
| 附录 | 第132-133页 |
| 致谢 | 第133-135页 |
