| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-23页 |
| 1.1 蛋白质的生物学特性 | 第11-13页 |
| 1.2 化学修饰剂的种类和性质 | 第13-17页 |
| 1.3 蛋白质化学修饰产物的分离纯化 | 第17-20页 |
| 1.4 蛋白质化学修饰产物的鉴定及应用 | 第20-21页 |
| 1.5 本课题的研究意义及研究内容 | 第21-23页 |
| 第2章 邻苯二酚结构官能化聚乙二醇的合成及表征 | 第23-33页 |
| 2.1 前言 | 第23-24页 |
| 2.2 仪器、试剂及耗材 | 第24页 |
| 2.2.1 仪器 | 第24页 |
| 2.2.2 试剂及耗材 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.3.1 邻苯二酚结构官能化聚乙二醇的合成 | 第24-26页 |
| 2.3.2 邻苯二酚结构官能化聚乙二醇的结构表征 | 第26-27页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第27-32页 |
| 2.4.1 邻苯二酚结构聚乙二醇的核磁氢谱 | 第27-30页 |
| 2.4.2 邻苯二酚结构官能化聚乙二醇紫外-可见吸收光谱 | 第30-32页 |
| 2.5 小结 | 第32-33页 |
| 第3章 脂肪酶的定点突变及表达纯化 | 第33-42页 |
| 3.1 前言 | 第33页 |
| 3.2 仪器、试剂及耗材 | 第33页 |
| 3.2.1 仪器 | 第33页 |
| 3.2.2 试剂及耗材 | 第33页 |
| 3.3 菌种与质粒 | 第33-35页 |
| 3.4 培养基、缓冲液及电泳 | 第35-37页 |
| 3.4.1 培养基配方 | 第35页 |
| 3.4.2 缓冲液配方 | 第35页 |
| 3.4.3 琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| 3.4.4 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第35-37页 |
| 3.5 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.5.1 LIPK107的定点突变 | 第37页 |
| 3.5.2 LIPK107及其突变蛋白的表达纯化 | 第37-39页 |
| 3.6 结果与讨论 | 第39-41页 |
| 3.6.1 LIPK107的定点突变 | 第39-40页 |
| 3.6.2 LIPK107及其突变蛋白的表达纯化 | 第40-41页 |
| 3.7 小结 | 第41-42页 |
| 第4章 邻苯二酚结构官能化聚乙二醇对脂肪酶的修饰 | 第42-59页 |
| 4.1 前言 | 第42页 |
| 4.2 仪器及耗材 | 第42-44页 |
| 4.2.1 仪器 | 第42页 |
| 4.2.2 耗材 | 第42-44页 |
| 4.3 实验方法 | 第44-47页 |
| 4.3.1 邻苯二酚结构官能化聚乙二醇的分子量及纯度分析 | 第44页 |
| 4.3.2 修饰反应条件的确定 | 第44-45页 |
| 4.3.3 DP5K、DTP5K/12K/20K对脂肪酶的定点修饰 | 第45-46页 |
| 4.3.4 DTP 12K/20K对脂肪酶修饰后纯化 | 第46-47页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第47-57页 |
| 4.4.1 邻苯二酚结构官能化聚乙二醇的分子量及纯度分析 | 第47页 |
| 4.4.2 修饰反应条件的确定 | 第47-52页 |
| 4.4.3 DP5、DTP5K/12K/20K对脂肪酶的定点修饰 | 第52-53页 |
| 4.4.4 DTP 12K/20K对脂肪酶修饰后纯化 | 第53-57页 |
| 4.5 小结 | 第57-59页 |
| 第5章 修饰反应的特异性分析及酶学性质评价 | 第59-77页 |
| 5.1 前言 | 第59页 |
| 5.2 仪器、试剂及耗材 | 第59-60页 |
| 5.2.1 仪器 | 第59-60页 |
| 5.2.2 试剂及耗材 | 第60页 |
| 5.3 缓冲液配方及用途 | 第60页 |
| 5.4 实验方法 | 第60-64页 |
| 5.4.1 修饰反应的特异性分析 | 第60-62页 |
| 5.4.2 酶构象分析 | 第62-63页 |
| 5.4.3 酶学性质分析 | 第63-64页 |
| 5.5 结果与讨论 | 第64-76页 |
| 5.5.1 修饰反应的特异性分析 | 第64-69页 |
| 5.5.2 酶构象分析 | 第69-70页 |
| 5.5.3 酶学性质分析 | 第70-76页 |
| 5.6 小结 | 第76-77页 |
| 第6章 总结与展望 | 第77-79页 |
| 6.1 结论 | 第77-78页 |
| 6.2 展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
