| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 前言 | 第8-17页 |
| 1.1 我国天然橡胶产业现状分析 | 第8-9页 |
| 1.2 植物磷脂酶D的研究进展 | 第9-15页 |
| 1.2.1 植物磷脂酶D的生化结构特征 | 第10-11页 |
| 1.2.2 植物磷脂酶D信号转导 | 第11-12页 |
| 1.2.3 植物磷脂酶D的生物学功能 | 第12-15页 |
| 1.3 巴西橡胶树的磷脂酶D的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 研究的目的和意义 | 第16页 |
| 1.5 研究的技术路线 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-40页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第17页 |
| 2.1.1 材料 | 第17页 |
| 2.1.2 质粒与菌种 | 第17页 |
| 2.1.3 生化试剂 | 第17页 |
| 2.2 方法与步骤 | 第17-40页 |
| 2.2.1 橡胶树胶乳总RNA的提取方法 | 第17-19页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第19-20页 |
| 2.2.3 3'RACE扩增HbPLDα1基因的3’端 | 第20-23页 |
| 2.2.4 HbPLDα1基因全长cDNA的克隆 | 第23-24页 |
| 2.2.5 HbPLDα1基因的启动子扩增 | 第24-30页 |
| 2.2.6 HbPLDα1基因的表达分析 | 第30-35页 |
| 2.2.7 HbPLDα1基因的原核表达 | 第35-38页 |
| 2.2.8 HbPLDα1蛋白抗体制备 | 第38-39页 |
| 2.2.9 HbPLDα1蛋白在橡胶粒子不同组分中的Western blotting检测 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-60页 |
| 3.1 橡胶树胶乳总RNA的提取 | 第40页 |
| 3.2 HbPLDα1基因的克隆 | 第40-50页 |
| 3.2.1 HbPLDα1基因的3’端扩增 | 第40-41页 |
| 3.2.2 HbPLDα1基因的全长cDNA克隆结果 | 第41-44页 |
| 3.2.3 HbPLDα1基因的生物学信息分析 | 第44-50页 |
| 3.3 HbPLDα1基因的启动子扩增 | 第50-54页 |
| 3.3.1 基因组DNA纯度检测 | 第50-51页 |
| 3.3.2 基因组DNA的消化 | 第51页 |
| 3.3.3 HbPLDα1基因的启动子克隆 | 第51-52页 |
| 3.3.4 HbPLDα1基因启动子序列及其结构分析 | 第52-54页 |
| 3.4 ET和JA处理对橡胶树胶乳中HbPLDa1基因的表达影响 | 第54-58页 |
| 3.4.1 橡胶树胶乳总RNA的提取 | 第54页 |
| 3.4.2 18S和HbPLDα1基因标准曲线的制作 | 第54-57页 |
| 3.4.3 ET处理对HbPLDα1基因表达影响 | 第57页 |
| 3.4.4 JA处理对HbPLDα1基因表达影响 | 第57-58页 |
| 3.5 His-HbPLDα1融合蛋白的原核表达 | 第58页 |
| 3.6 橡胶树橡胶粒子不同组分中HbPLDα1蛋白的Western blotting检测 | 第58-60页 |
| 4 讨论 | 第60-62页 |
| 4.1 HbPLDα1是PLD基因家族成员 | 第60页 |
| 4.2 HbPLDα1基因的功能分析 | 第60-61页 |
| 4.3 HbPLDα1基因的研究展望 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
