摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略词表(Abbreviation) | 第7-9页 |
氨基酸简写符号 | 第9-12页 |
1 前言 | 第12-22页 |
1.1 研究背景 | 第12-20页 |
1.1.1 辣椒素的合成途径及相关基因的研究 | 第13-15页 |
1.1.2 启动子简介 | 第15-17页 |
1.1.3 转录因子概述 | 第17-20页 |
1.2 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
2 材料与方法 | 第22-38页 |
2.1 实验材料 | 第22页 |
2.2 实验方法 | 第22-38页 |
2.2.1 辣椒DNA的提取 | 第22-23页 |
2.2.2 辣椒胎座与果肉RNA分离与质量检测 | 第23页 |
2.2.3 cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
2.2.4 基因全长的克隆与测序 | 第24-26页 |
2.2.5 PCR产物回收 | 第26页 |
2.2.6 回收片段的连接 | 第26页 |
2.2.7 用CaCl2法制备大肠杆菌感受态 | 第26-27页 |
2.2.8 连接产物转化大肠杆菌感受态 | 第27页 |
2.2.9 质粒DNA提取 | 第27-28页 |
2.2.10 农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第28-29页 |
2.2.11 质粒转入农杆菌的方法 | 第29页 |
2.2.12 qRT-PCR检测 | 第29-31页 |
2.2.13 生物信息学分析 | 第31页 |
2.2.14 启动子活性分析 | 第31-33页 |
2.2.15 辣椒胎座原生质体的制备及PEG诱导的融合 | 第33-34页 |
2.2.16 亚细胞定位 | 第34-35页 |
2.2.17 病毒诱导基因沉默 | 第35-37页 |
2.2.18 辣椒素含量测定方法 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-61页 |
3.1 九个辣椒素合成相关结构基因cDNA克隆与表达量分析 | 第38-53页 |
3.1.1 ACL分析 | 第38-39页 |
3.1.2 BCAT分析 | 第39-40页 |
3.1.3 FatA分析 | 第40-41页 |
3.1.4 C4H分析 | 第41-42页 |
3.1.5 COMT分析 | 第42-43页 |
3.1.6 PAL分析 | 第43-44页 |
3.1.7 AMT分析 | 第44-45页 |
3.1.8 KAS分析 | 第45-46页 |
3.1.9 AT3分析 | 第46-51页 |
3.1.10 AT3和AMT基因沉默 | 第51-53页 |
3.2 AT3启动子活性分析 | 第53-55页 |
3.3 MYB转录因子克隆和功能验证 | 第55-61页 |
3.3.1 MYB转录因子的生物信息学分析 | 第55-57页 |
3.3.2 MYB转录因子在辣椒胎座和果肉中的表达量分析 | 第57页 |
3.3.3 MYB转录因子亚细胞定位结果 | 第57-58页 |
3.3.4 MYB转录因子的沉默 | 第58-61页 |
4 讨论 | 第61-65页 |
4.1 涮涮辣 | 第61页 |
4.2 结构基因对辣椒素合成的影响 | 第61-62页 |
4.3 启动子活性分析 | 第62-63页 |
4.4 MYB转录因子与辣椒素合成结构基因间的关系 | 第63-65页 |
5 结论 | 第65-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-73页 |
附录A 结构基因序列比对结果 | 第73-86页 |