| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第8-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 植物氮素营养概述 | 第12-13页 |
| 1.2 植物对硝态氮的吸收及调控机制 | 第13-19页 |
| 1.2.1 植物对NO_3~-的吸收过程 | 第13-14页 |
| 1.2.2 低亲和NO_3~-转运蛋白基因 | 第14-15页 |
| 1.2.3 高亲和NO_3~-转运蛋白基因 | 第15-17页 |
| 1.2.4 植物硝转运蛋白基因表达调控 | 第17-19页 |
| 1.3 植物吸收铵态氮的生理和分子机理 | 第19-20页 |
| 1.3.1 植物对NH_4~+的吸收过程 | 第19-20页 |
| 1.4 植物对铵硝混合营养的吸收利用 | 第20-21页 |
| 1.4.1 铵硝混合营养对植物生长发育和产量的影响 | 第20页 |
| 1.4.2 增铵条件下的氮素吸收 | 第20-21页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-33页 |
| 2.1 菜心硝转运蛋白基因NRTs的克隆与生物信息学分析 | 第23-27页 |
| 2.1.1 材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菜心RNA提取与cDNA第一链的合成 | 第23-24页 |
| 2.1.3 目的基因片段的PCR扩增 | 第24-26页 |
| 2.1.4 目的片段的回收纯化 | 第26页 |
| 2.1.5 宿主菌E.coli DH5α 感受态细胞的制备 | 第26页 |
| 2.1.6 目的片段与载体的连接 | 第26-27页 |
| 2.1.7 测序 | 第27页 |
| 2.1.8 生物信息学分析 | 第27页 |
| 2.2 菜心不同生长时期根系硝态氮吸收能力与NRTs基因表达特性 | 第27-29页 |
| 2.2.1 材料 | 第27-28页 |
| 2.2.2 实时荧光定量 | 第28页 |
| 2.2.3 硝态氮吸收量测定 | 第28-29页 |
| 2.3 不同氮源处理对菜心氮素吸收及NRTs基因表达的影响 | 第29-30页 |
| 2.3.1 材料 | 第29页 |
| 2.3.2 不同形态和浓度氮素处理 | 第29页 |
| 2.3.3 实时荧光定量 | 第29页 |
| 2.3.4 菜心氮素吸收能力测定 | 第29-30页 |
| 2.3.5 菜心植株全氮含量的测定 | 第30页 |
| 2.4 不同铵硝配比对菜心氮素吸收与NRTs基因表达的影响 | 第30-31页 |
| 2.4.1 材料 | 第30页 |
| 2.4.2 不同铵硝配比处理 | 第30-31页 |
| 2.4.3 营养液含量氮素测定 | 第31页 |
| 2.4.4 实时荧光定量 | 第31页 |
| 2.5 等铵减硝及等硝增铵对菜心氮素吸收与NRTs基因表达的影响 | 第31-33页 |
| 2.5.1 材料 | 第31页 |
| 2.5.2 等铵减硝及等硝增铵试验处理 | 第31-32页 |
| 2.5.3 营养液含量氮素测定 | 第32页 |
| 2.5.4 荧光定量 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-59页 |
| 3.1 菜心硝转运蛋白基因NRTs的克隆与生物信息学分析 | 第33-39页 |
| 3.1.1 BcNRT1;1，BcNRT1;2 和BcNRT2;1 的克隆 | 第33-34页 |
| 3.1.2 BcNRT1;1，BcNRT1;2 和BcNRT2;1 阳性克隆的鉴定 | 第34页 |
| 3.1.3 BcNRT1;1，BcNRT1;2 和BcNRT2;1 核苷酸序列分析 | 第34页 |
| 3.1.4 BcNRT1;1，BcNRT1;2 和BcNRT2;1 基因及推导氨基酸序列分析 | 第34-36页 |
| 3.1.5 BcNRT1;1，BcNRT1;2 和BcNRT2;1 的蛋白结构分析 | 第36-39页 |
| 3.2 菜心不同生长时期硝态氮吸收能力与NRTs基因表达特性 | 第39-42页 |
| 3.2.1 菜心不同生长时期根系重量与硝态氮吸收能力 | 第39-40页 |
| 3.2.2 菜心不同生长时期根系与叶片中NRTs基因表达情况 | 第40-42页 |
| 3.3 不同氮源处理对菜心氮素吸收及NRTs基因表达的影响 | 第42-49页 |
| 3.3.1 菜心对不同浓度硝态氮的吸收 | 第42-43页 |
| 3.3.2 不同浓度硝态氮条件下NRTs基因的表达 | 第43-45页 |
| 3.3.3 不同浓度硝态氮条件下菜心总氮含量 | 第45页 |
| 3.3.4 菜心对不同浓度铵态氮的吸收 | 第45-47页 |
| 3.3.5 不同浓度铵态氮条件下NRTs基因的表达 | 第47-49页 |
| 3.3.6 不同浓度铵态氮条件下菜心总氮含量 | 第49页 |
| 3.4 不同铵硝配比对菜心氮素吸收与NRTs基因表达的影响 | 第49-52页 |
| 3.4.1 不同铵硝配比对菜心氮素吸收 | 第49-50页 |
| 3.4.2 不同铵硝配比对菜心NRTs基因表达的影响 | 第50-52页 |
| 3.5 等铵减硝及等硝增铵对菜心氮素吸收与NRTs基因表达的影响 | 第52-59页 |
| 3.5.1 等铵减硝条件下菜心氮素吸收 | 第52-53页 |
| 3.5.2 等铵减硝条件下菜心NRTs基因表达 | 第53-55页 |
| 3.5.3 等硝增铵条件下菜心氮素吸收 | 第55-56页 |
| 3.5.4 等硝增铵条件下菜心NRTs基因表达 | 第56-59页 |
| 4 讨论 | 第59-67页 |
| 4.1 菜心硝转运蛋白基因NRT1s的克隆 | 第59页 |
| 4.2 菜心不同生长时期硝态氮吸收能力及NRTs基因表达特性 | 第59-62页 |
| 4.2.1 不同生长时期根系氮素吸收 | 第59-60页 |
| 4.2.2 不同生长时期NRTs基因主要在根系起作用 | 第60-61页 |
| 4.2.3 不同生长时期菜心硝态氮吸收与NRTs基因表达的关系 | 第61-62页 |
| 4.3 不同氮源处理对菜心氮素吸收及NRTs基因表达的影响 | 第62-64页 |
| 4.3.1 菜心对不同形态与浓度氮素的吸收 | 第62-63页 |
| 4.3.2 不同氮素形态与浓度对菜心NRTs基因表达的影响 | 第63-64页 |
| 4.4 铵硝混合条件下菜心的氮素吸收 | 第64-66页 |
| 4.5 等铵减硝及等硝增铵对菜心氮素吸收的影响 | 第66-67页 |
| 5 结论 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
