摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第13-24页 |
1.1 前言 | 第13页 |
1.2 植物高温胁迫耐受机制研究进展 | 第13-18页 |
1.2.1 逆境概述 | 第13-15页 |
1.2.2 植物抗热性生理研究 | 第15-18页 |
1.3 逆境胁迫相关基因的克隆 | 第18-20页 |
1.3.1 逆境基因克隆的策略 | 第18页 |
1.3.2 图位克隆 | 第18-20页 |
1.4 WD40蛋白家族研究进展 | 第20-22页 |
1.4.1 WD40-repeat蛋白结构 | 第20页 |
1.4.2 植物中WD40-repeat蛋白的生理功能 | 第20-21页 |
1.4.3 WD40蛋白在逆境胁迫中的作用 | 第21-22页 |
1.5 立题依据 | 第22-24页 |
2 实验材料和方法 | 第24-41页 |
2.1 实验仪器 | 第24页 |
2.2 实验材料 | 第24-25页 |
2.2.1 植物材料 | 第24-25页 |
2.2.2 菌株和质粒载体 | 第25页 |
2.3 生物学软件和网站 | 第25页 |
2.3.1 生物学软件 | 第25页 |
2.3.2 网站资源 | 第25页 |
2.4 实验试剂和培养基的配制 | 第25-27页 |
2.4.1 溶液 | 第26页 |
2.4.2 培养基 | 第26-27页 |
2.4.3 抗生素和植物激素 | 第27页 |
2.5 实验方法 | 第27-41页 |
2.5.1 拟南芥的种植 | 第27-28页 |
2.5.2 拟南芥的杂交 | 第28页 |
2.5.3 拟南芥DNA的提取 | 第28页 |
2.5.4 图位克隆 | 第28-33页 |
2.5.5 拟南芥RNA的提取(Trizol) | 第33-34页 |
2.5.6 碱裂解法提取质粒 | 第34页 |
2.5.7 大肠杆菌(DH5α)感受态的制备与转化 | 第34-35页 |
2.5.8 农杆菌感受态制备与重组质粒的转化 | 第35页 |
2.5.9 拟南芥花序侵染 | 第35-36页 |
2.5.10 载体的构建 | 第36-37页 |
2.5.11 Gateway克隆技术 | 第37-38页 |
2.5.12 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第38-39页 |
2.5.13 GUS组织染色 | 第39-40页 |
2.5.14 烟草的农杆菌渗透实验 | 第40-41页 |
3 实验结果与分析 | 第41-71页 |
3.1 突变体背景介绍 | 第41-42页 |
3.2 突变体HL111的结果与分析 | 第42-61页 |
3.2.1 突变体HL111表型相关结果 | 第42-47页 |
3.2.2 突变体HL111的图位克隆 | 第47-52页 |
3.2.3 遗传互补鉴定目的基因 | 第52-57页 |
3.2.4 HL111基因的表达模式 | 第57-61页 |
3.3 突变体LL807的结果与分析 | 第61-70页 |
3.3.1 LL807的表型分析 | 第61-67页 |
3.3.2 突变体LL807的图位克隆 | 第67-70页 |
3.4 小结 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-77页 |
4.1 突变体HL111 | 第71-74页 |
4.1.1 突变体HL111的表型分析 | 第71-72页 |
4.1.2 突变基因HL111的克隆与功能分析 | 第72-73页 |
4.1.3 突变基因HL111与表型之间关系的阐述 | 第73页 |
4.1.4 突变体HL111后续工作 | 第73-74页 |
4.2 突变体LL807 | 第74-75页 |
4.2.1 突变体LL807表型分析 | 第74页 |
4.2.2 LL807的图位克隆 | 第74-75页 |
4.3 HL111和LL807的关系 | 第75-76页 |
4.4 二代测序在图位克隆技术上的应用 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-83页 |
致谢 | 第83页 |