| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 细胞凋亡概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 细胞凋亡的概念 | 第12页 |
| 1.1.2 细胞凋亡的特征 | 第12-13页 |
| 1.1.3 细胞凋亡的相关因素 | 第13页 |
| 1.2 细胞凋亡信号通路 | 第13-15页 |
| 1.2.1 Caspase依赖性细胞凋亡 | 第13-15页 |
| 1.2.2 Caspase非依赖性细胞凋亡 | 第15页 |
| 1.3 Caspase家族与细胞凋亡 | 第15-17页 |
| 1.3.1 Caspase结构与特性 | 第15页 |
| 1.3.2 Caspase酶原活化方式 | 第15-16页 |
| 1.3.3 Caspase与细胞凋亡 | 第16页 |
| 1.3.4 ICE与细胞凋亡 | 第16页 |
| 1.3.5 Caspase-8与细胞凋亡 | 第16-17页 |
| 1.4 昆虫细胞凋亡研究简介 | 第17-19页 |
| 1.5 研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 实验材料与方法 | 第20-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-23页 |
| 2.1.1 虫体与蛋白 | 第20页 |
| 2.1.2 菌种与载体 | 第20页 |
| 2.1.3 主要药品与试剂 | 第20-21页 |
| 2.1.4 培养基 | 第21页 |
| 2.1.5 其它主要溶液 | 第21-23页 |
| 2.1.6 主要的仪器设备 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-36页 |
| 2.2.1 斜纹夜蛾虫体RNA的提取以及逆转录 | 第23-24页 |
| 2.2.2 目的基因PCR扩增以及重组载体构建 | 第24-30页 |
| 2.2.3 连接产物的转化及鉴定 | 第30页 |
| 2.2.4 质粒提取以及PCR验证 | 第30-32页 |
| 2.2.5 融合蛋白的原核表达以及纯化 | 第32-33页 |
| 2.2.6 融合蛋白的SDS-PAGE电泳及Western blotting分析 | 第33-34页 |
| 2.2.7 序列结构分析 | 第34页 |
| 2.2.8 蛋白底物分析 | 第34页 |
| 2.2.9 蛋白酶活性分析 | 第34-36页 |
| 3 实验结果 | 第36-51页 |
| 3.1 斜纹夜蛾Sl-caspase-3基因扩增、原核表达纯化及活性分析 | 第36-43页 |
| 3.1.1 斜纹夜蛾总RNA提取及电泳检测 | 第36页 |
| 3.1.2 Caspase-3 PCR扩增以及重组载体的构建及酶切验证 | 第36-37页 |
| 3.1.3 Caspase-3相关生物信息学分析 | 第37-40页 |
| 3.1.4 Caspase-3重组蛋白的原核表达、纯化及Western blotting鉴定 | 第40页 |
| 3.1.5 Caspase-3蛋白特性和底物分析 | 第40-42页 |
| 3.1.6 Caspase-3进化树分析 | 第42-43页 |
| 3.2 斜纹夜蛾Sl-caspase-6基因扩增、原核表达纯化及活性分析 | 第43-51页 |
| 3.2.1 Caspase-6表达载体构建 | 第43页 |
| 3.2.2 Caspase-6原核表达、纯化及Western blotting鉴定 | 第43-44页 |
| 3.2.3 Caspase-6相关生物信息学分析 | 第44-48页 |
| 3.2.4 Caspase-6-N224克隆、原核表达、纯化及Western blotting鉴定 | 第48-49页 |
| 3.2.5 Caspase-6-N224融合蛋白酶活性分析 | 第49-50页 |
| 3.2.6 Caspase-6进化树分析 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
