| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.1 前言 | 第13页 |
| 1.2 植物逆境与抗逆性 | 第13-14页 |
| 1.3 高温胁迫对植物生命活动的影响 | 第14-15页 |
| 1.3.1 高温胁迫对植物光合作用和呼吸作用的影响 | 第14-15页 |
| 1.3.2 高温胁迫对植物生物膜的影响 | 第15页 |
| 1.3.3 高温胁迫对抗氧化系统的影响 | 第15页 |
| 1.3.4 高温胁迫对渗透调节物质的影响 | 第15页 |
| 1.4 热激蛋白 | 第15-17页 |
| 1.4.1 热激蛋白的种类和特点 | 第16页 |
| 1.4.2 热激蛋白的生物学功能 | 第16-17页 |
| 1.5 热激转录因子 | 第17页 |
| 1.6 热激蛋白的表达调控 | 第17-18页 |
| 1.7 植物的可变剪切 | 第18-22页 |
| 1.7.1 pre- mRNA的剪切 | 第18-19页 |
| 1.7.2 植物中可变剪切的分类 | 第19-20页 |
| 1.7.3 植物可变剪切中的剪切因子 | 第20-21页 |
| 1.7.4 逆境胁迫影响可变剪切 | 第21-22页 |
| 1.8 本研究的目的及意义 | 第22-23页 |
| 第二章 HL1401的表型分析及图位克隆 | 第23-45页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料和试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.2.2 试剂耗材 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-31页 |
| 2.3.1 溶液的配制 | 第24-26页 |
| 2.3.1.1 1/2 MS培养基的配制(1L为例) | 第24页 |
| 2.3.1.2 500uM ABA溶液的配制(100mL为例) | 第24页 |
| 2.3.1.3 100μM D-发光素钾盐的配制(100mL为例) | 第24页 |
| 2.3.1.4 0.5M EDTA的配制(pH8.0,100mL为例) | 第24-25页 |
| 2.3.1.5 10%SDS的配制(100mL为例) | 第25页 |
| 2.3.1.6 1M Tris-Cl的配制(pH8.0,100mL为例) | 第25页 |
| 2.3.1.7 5M NaCl的配制(100mL为例) | 第25页 |
| 2.3.1.8 DNA粗提液的配制 | 第25-26页 |
| 2.3.1.9 50×TAE溶液的配制(1L为例) | 第26页 |
| 2.3.1.10 1M NaCl、1M D-mannition的配制(100mL为例) | 第26页 |
| 2.3.2 拟南芥无菌苗的培养 | 第26-27页 |
| 2.3.3 突变体HL1401高温筛选条件的确定 | 第27页 |
| 2.3.4 其它逆境胁迫对突变体LUC光强的影响 | 第27-28页 |
| 2.3.5 突变体生长发育的表型鉴定 | 第28页 |
| 2.3.6 F_2作图群体的获得 | 第28-29页 |
| 2.3.7 拟南芥DNA的提取(SDS碱裂解法) | 第29页 |
| 2.3.8 图位克隆技术的PCR反应 | 第29-31页 |
| 2.3.9 计算重组交换率 | 第31页 |
| 2.4 结果与分析 | 第31-45页 |
| 2.4.1 突变体HL1401的表型分析 | 第31-40页 |
| 2.4.1.1 突变体HL1401LUC光强筛选条件的确定 | 第31-33页 |
| 2.4.1.2 突变体HL1401在高温下的LUC光强表型 | 第33页 |
| 2.4.1.3 突变体HL1401在其它非生物胁迫条件下的LUC光强表型 | 第33-34页 |
| 2.4.1.4 突变体HL1401在高温下的表型 | 第34-35页 |
| 2.4.1.5 突变体HL1401在ABA处理下的表型 | 第35-37页 |
| 2.4.1.6 突变体HL1401叶片的表型 | 第37-38页 |
| 2.4.1.7 突变体HL1401生长的表型 | 第38-39页 |
| 2.4.1.8 突变体HL1401开花时间的表型 | 第39-40页 |
| 2.4.2 HL1401的图位克隆 | 第40-45页 |
| 2.4.2.1 HL1401图位克隆作图群体的获得 | 第40页 |
| 2.4.2.2 突变基因的粗定位 | 第40-42页 |
| 2.4.2.3 突变基因的精细定位 | 第42页 |
| 2.4.2.4 候选基因的测序和突变基因的确定 | 第42-43页 |
| 2.4.2.5 突变基因的生物信息学分析 | 第43-45页 |
| 第三章 HL1401突变基因的互补验证 | 第45-57页 |
| 3.1 实验材料和试剂 | 第45页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第45页 |
| 3.1.2 试剂耗材 | 第45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-50页 |
| 3.2.1 培养基的配制 | 第45-46页 |
| 3.2.2 大肠杆菌DH5α的转化 | 第46页 |
| 3.2.3 农杆菌GV3101的转化 | 第46页 |
| 3.2.4 质粒DNA的提取 | 第46-47页 |
| 3.2.5 拟南芥RNA的提取、消化和逆转(Trizol法) | 第47-48页 |
| 3.2.6 pCD3-724-SAPH-1载体构建 | 第48页 |
| 3.2.7 拟南芥的花序侵染 | 第48-49页 |
| 3.2.8 T-DNA插入突变体纯合鉴定(三引物法) | 第49页 |
| 3.2.9 各抗生素的常用浓度 | 第49-50页 |
| 3.3 结果与分析 | 第50-57页 |
| 3.3.1 分子互补 | 第50-52页 |
| 3.3.1.1 超表达载体的构建 | 第50-52页 |
| 3.3.1.2 农杆菌转化拟南芥和转基因材料的筛选 | 第52页 |
| 3.3.2 等位基因杂交互补 | 第52-57页 |
| 3.3.2.1 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第52-53页 |
| 3.3.2.2 T-DNA插入突变体等位杂交互补验证 | 第53-54页 |
| 3.3.2.3 T-DNA插入突变体的高温处理表型 | 第54-55页 |
| 3.3.2.4 T-DNA插入突变体叶片的表型 | 第55-56页 |
| 3.3.2.5 T-DNA插入突变体开花时间的表型 | 第56-57页 |
| 第四章 突变基因性质的初步分析 | 第57-61页 |
| 4.1 前言 | 第57页 |
| 4.2 实验材料和试剂 | 第57页 |
| 4.3 实验方法 | 第57-58页 |
| 4.3.1 RNA的提取、消化和逆转 | 第57页 |
| 4.3.2 RT-PCR | 第57-58页 |
| 4.3.3 qRT-PCR | 第58页 |
| 4.3.4 农杆菌共转化烟草实验 | 第58页 |
| 4.4 结果与分析 | 第58-61页 |
| 4.4.1 SAPH基因的表达模式 | 第58-59页 |
| 4.4.2 SAPH蛋白的亚细胞定位 | 第59页 |
| 4.4.3 高温胁迫对SAPH基因表达的影响 | 第59-60页 |
| 4.4.4 高温胁迫对SAPH基因剪切模式的影响 | 第60-61页 |
| 第五章 小结与讨论 | 第61-66页 |
| 5.1 小结 | 第61页 |
| 5.2 讨论 | 第61-66页 |
| 5.2.1 HL1401的表型分析 | 第61-62页 |
| 5.2.2 突变基因SAPH的克隆和生物信息学分析 | 第62-63页 |
| 5.2.3 突变基因SAPH的互补验证分析 | 第63-64页 |
| 5.2.4 SAPH基因性质的分析 | 第64页 |
| 5.2.5 突变体HL1401的后续工作 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
