摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
第一章 引言和文献综 | 第12-22页 |
1.1 志贺氏菌 | 第12-14页 |
1.1.1 志贺氏菌的概述以及分类 | 第12-13页 |
1.1.2 志贺氏菌病的流行和危害 | 第13页 |
1.1.3 志贺氏菌的致病机理 | 第13-14页 |
1.2 志贺氏菌的检测方法 | 第14-17页 |
1.2.1 传统的检测方法 | 第14-15页 |
1.2.2 以免疫学为基础的检测技术 | 第15页 |
1.2.3 以分子生物学为基础的检测技术 | 第15-16页 |
1.2.4 以生物传感器为基础的检测技术 | 第16-17页 |
1.3 核酸适配体(Aptamer) | 第17-19页 |
1.3.1 适配体的体外筛选 | 第17-18页 |
1.3.2 适配体与靶标分子的结合原理 | 第18页 |
1.3.3 适配体的优势 | 第18-19页 |
1.3.4 适配体的应用现状及展望 | 第19页 |
1.4 碳纳米材料氧化石墨烯 | 第19-20页 |
1.4.1 氧化石墨烯 | 第19-20页 |
1.4.2 氧化石墨烯在生物传感器中的应用 | 第20页 |
1.5 本论文构思 | 第20-22页 |
第二章 Cell-SELEX技术筛选志贺氏菌适配体 | 第22-38页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验仪器和材料 | 第22-25页 |
2.2.1 初始文库和引物 | 第22-23页 |
2.2.2 细菌培养与样品制备 | 第23页 |
2.2.3 溶液配制 | 第23-24页 |
2.2.4 其他试剂 | 第24页 |
2.2.5 实验仪器 | 第24-25页 |
2.3 试验方法 | 第25-31页 |
2.3.1 适配体筛选过程 | 第25-27页 |
2.3.2 结合率测定 | 第27页 |
2.3.3 末轮PCR产物的克隆 | 第27-29页 |
2.3.4 测序结果及分析 | 第29页 |
2.3.5 适配体亲和力的测定 | 第29-30页 |
2.3.6 适配体的灵敏性分析 | 第30页 |
2.3.7 适配体的特异性鉴定 | 第30-31页 |
2.4 试验结果与讨论 | 第31-36页 |
2.4.1 SELEX筛选条件的优化 | 第31-32页 |
2.4.2 高亲和力适配体的富集 | 第32-33页 |
2.4.3 测序结果及分析 | 第33-34页 |
2.4.4 适配体与志贺氏菌的定量测定 | 第34-35页 |
2.4.5 适配体的特异性鉴定 | 第35-36页 |
2.5 小结 | 第36-38页 |
第三章 基于适配体的信号放大技术快速检测志贺氏菌的研究 | 第38-52页 |
3.1 引言 | 第38页 |
3.2 实验部分 | 第38-40页 |
3.2.1 信号探针序列 | 第38-39页 |
3.2.2 溶液配制 | 第39页 |
3.2.3 其他试剂 | 第39-40页 |
3.2.4 实验仪器 | 第40页 |
3.3 试验方法 | 第40-43页 |
3.3.1 氧化石墨烯的制备 | 第40页 |
3.3.2 氧化石墨烯/信号探针复合物(GO/Probe)的制备及最适比例的探究 | 第40-41页 |
3.3.3 适配体传感器的可行性分析 | 第41页 |
3.3.4 适配体传感器的灵敏性检测分析 | 第41-42页 |
3.3.5 适配体传感器的特异性检测分析 | 第42页 |
3.3.6 适配体传感器应用于实际样品的检测分析 | 第42-43页 |
3.4 试验结果与讨论 | 第43-51页 |
3.4.1 适配体传感器的设计及作用原理 | 第43-44页 |
3.4.2 GO/Probe最适比例的探究结果与分析 | 第44-45页 |
3.4.3 适配体传感器的可行性分析 | 第45-46页 |
3.4.4 探针的设计 | 第46-47页 |
3.4.5 试验条件的优化 | 第47-48页 |
3.4.6 适配体传感器的灵敏性检测分析 | 第48-49页 |
3.4.7 适配体传感器的特异性检测分析 | 第49-50页 |
3.4.8 实际样品的检测分析 | 第50-51页 |
3.5 小结 | 第51-52页 |
第四章 结论与展望 | 第52-54页 |
4.1 结论 | 第52-53页 |
4.2 展望 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
攻读硕士学位期间撰写、发表的学术论文 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
附录 | 第62-63页 |