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鸡肝脏microRNA-122表达调控机制和功能研究

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一部分 文献综述第12-25页
    1.1 MicroRNA-122的研究进展第12-17页
        1.1.1 MicroRNA的发现、生物合成和作用机制第12-14页
        1.1.2 miR-122的发现及与肝脏的联系第14-16页
        1.1.3 miR-122与肝脏疾病的联系第16-17页
    1.2 肝脏富集转录因子与miR-122的表达第17-20页
        1.2.1 几种肝脏富集转录因子第17-19页
        1.2.2 LETF调控miR-122的转录第19-20页
    1.3 VNN1的功能研究第20-22页
        1.3.1 泛酰巯基乙胺酶Vanin第20-21页
        1.3.2 VNN1在脂类代谢中的功能第21-22页
        1.3.3 VNN1在免疫学方面的功能第22页
    1.4 BZW2的功能研究第22-23页
    1.5 本研究的目的及意义第23-25页
第二部分 材料与方法第25-48页
    2.1 实验材料第25-31页
        2.1.1 实验动物第25页
        2.1.2 菌株、细胞系与质粒第25页
        2.1.3 主要仪器和设备第25-26页
        2.1.4 实验试剂第26-29页
        2.1.5 实验引物和探针第29-31页
    2.2 实验方法第31-46页
        2.2.1 组织RNA的提取第31页
        2.2.2 5'c DNA末端快速扩增(5’RACE)第31-35页
        2.2.3 启动子报告载体的构建第35-39页
        2.2.4 细胞培养和转染第39页
        2.2.5 双荧光素酶报告基因实验第39-40页
        2.2.6 凝胶电泳率迁移实验 (EMSA)第40-44页
        2.2.7 miR-122靶基因的验证第44页
        2.2.8 miRNA及基因表达分析第44-46页
    2.3 生物信息学网站和生物学软件第46-48页
第三部分 结果与分析第48-68页
    3.1 鸡miR-122基因启动子区的确定和分析第48-55页
        3.1.1 miR-122基因启动子区的生物信息学预测第48-49页
        3.1.2 鸡miR-122基因的转录起始位点和启动子区分析第49-51页
        3.1.3 鸡miR-122启动子区的验证第51-55页
    3.2 转录因子HNF3β 调控鸡miR-122的表达第55-58页
        3.2.1 HNF3β 对miR-122启动子活性的影响第55-56页
        3.2.2 HNF3β 与miR-122启动子区结合的体外验证第56-58页
    3.3 miR-122靶基因的鉴定第58-61页
        3.3.1 靶基因报告载体的构建第58-60页
        3.3.2 靶基因VNN1和BZW2的验证第60-61页
    3.4 miR-122和靶基因的表达分析第61-68页
        3.4.1 过表达miR-122的LMH细胞中靶基因的表达特征第61-63页
        3.4.2 抑制miR-122的原代鸡肝细胞中靶基因的表达分析第63-65页
        3.4.3 靶基因的组织表达特征第65-66页
        3.4.4 靶基因在不同发育时期鸡肝脏的表达特征第66-68页
第四部分 讨论第68-75页
    4.1 鸡miR-122启动子区的预测和验证第68-69页
    4.2 肝脏富集转录因子调控miR-122的表达第69-70页
    4.3 miR-122靶基因的预测和验证第70-72页
    4.4 miR-122和靶基因的表达特征分析第72-73页
    4.5 展望第73-75页
第五部分 结论第75-76页
参考文献第76-85页
攻读学位期间本人出版或公开发表的论文第85-86页
附录第86-91页
致谢第91-92页

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