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硒对铅引起鸡神经毒性的缓解作用

摘要第11-13页
Abstract第13-15页
1 前言第16-27页
    1.1 铅污染第16-17页
        1.1.1 铅污染对人和野生鸟类的影响第16-17页
        1.1.2 鸡饲料、鸡及其食品铅污染第17页
    1.2 铅中毒对神经系统的影响第17-18页
    1.3 重金属对氧化应激、硒蛋白、热休克蛋白、细胞因子和细胞凋亡的影响第18-23页
        1.3.1 重金属对氧化应激的影响第18-19页
        1.3.2 重金属对硒蛋白的影响第19-20页
        1.3.3 重金属对细胞因子的影响第20-21页
        1.3.4 重金属对热休克蛋白的影响第21-22页
        1.3.5 重金属对细胞凋亡的影响第22-23页
    1.4 硒对重金属引起的氧化应激、硒蛋白、热休克蛋白、细胞因子和细胞凋亡因子改变的缓解作用第23-26页
        1.4.1 硒对重金属引起氧化应激的缓解作用第23-24页
        1.4.2 硒通过硒蛋白缓解重金属的毒性作用第24页
        1.4.3 硒对重金属引起细胞因子改变的缓解作用第24-25页
        1.4.4 硒对重金属引起热休克蛋白改变的缓解作用第25页
        1.4.5 硒对重金属引起细胞凋亡的缓解作用第25-26页
    1.5 目的与意义第26-27页
2 材料与方法第27-38页
    2.1 主要仪器与试剂第27-28页
        2.1.1 主要仪器第27页
        2.1.2 主要试剂第27-28页
    2.2 动物模型的建立第28-30页
        2.2.1 体内动物模型第28-29页
        2.2.2 体外动物模型第29-30页
    2.3 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干和鸡胚神经细胞样品的采集与处理第30-31页
        2.3.1 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织的采集与处理第30-31页
        2.3.2 鸡胚神经细胞的采集与处理第31页
    2.4 铅致鸡胚神经细胞半数抑制浓度(IC50)的检测第31页
    2.5 抗氧化指标的检测第31页
    2.6 荧光定量PCR的检测第31-35页
        2.6.1 引物合成第31-33页
        2.6.2 总RNA提取第33-34页
        2.6.3 反转录第34页
        2.6.4 PCR扩增第34-35页
    2.7 蛋白免疫印迹的检测第35页
    2.8 形态学的检测第35-36页
        2.8.1 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织显微结构的检测第35-36页
        2.8.2 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织超微结构的检测第36页
        2.8.3 鸡胚神经细胞AO/EB的检测第36页
    2.9 试验数据的分析和统计第36-38页
3 结果与分析第38-104页
    3.1 铅致鸡胚神经细胞半数抑制浓度(IC50)的测定结果第38页
    3.2 鸡大脑(白质)、小脑、丘脑和鸡胚神经细胞抗氧化功能的结果与分析第38-48页
        3.2.1 SOD活性的结果与分析第38-39页
        3.2.2 GPx活性的结果与分析第39-40页
        3.2.3 GST活性的结果与分析第40-41页
        3.2.4 CAT活性的结果与分析第41-42页
        3.2.5 T-AOC活性的结果与分析第42-43页
        3.2.6 NOS活性的结果与分析第43-44页
        3.2.7 MDA含量的结果与分析第44-45页
        3.2.8 NO含量的结果与分析第45-46页
        3.2.9 H_2O_2含量的结果与分析第46-47页
        3.2.10 GSH含量的结果与分析第47-48页
    3.3 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干和神经细胞硒蛋白中硒蛋白的结果与分析第48-74页
        3.3.1 GPx1、GPx2、GPx3和GPx4的mRNA表达结果与分析第48-52页
        3.3.2 Txnrd1、Txnrd2和Txnrd3的mRNA表达结果与分析第52-55页
        3.3.3 Dio1、Dio2和Dio3的mRNA表达结果与分析第55-58页
        3.3.4 SelT、SelK、SelS、SelH、SelM、SelU、SelI、SelO、Selpb、Selpn1、Sepp1、Sepx1、Sepw1、Sep15和SPS2的mRNA表达结果与分析第58-74页
    3.4 脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干和鸡胚神经细胞中细胞因子的结果与分析第74-81页
        3.4.1 IL-2 的mRNA表达结果与分析第74-75页
        3.4.2 IL-4 的mRNA表达结果与分析第75-76页
        3.4.3 IL-6 的mRNA表达结果与分析第76-77页
        3.4.4 IL-12β的mRNA表达结果与分析第77-78页
        3.4.5 IL-17的mRNA表达结果与分析第78-80页
        3.4.6 IFN-γ的mRNA表达结果与分析第80-81页
    3.5 脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干和鸡胚神经细胞中热休克蛋白的结果与分析第81-88页
        3.5.1 HSP27的mRNA表达结果与分析第81-83页
        3.5.2 HSP40的mRNA表达结果与分析第83-84页
        3.5.3 HSP60的mRNA表达结果与分析第84-85页
        3.5.4 HSP70的mRNA表达结果与分析第85-86页
        3.5.5 HSP90的mRNA表达结果与分析第86-88页
    3.6 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干和鸡胚神经细胞中细胞凋亡相关基因结果与分析第88-98页
        3.6.1Bcl-2的mRNA表达结果与分析第88-89页
        3.6.2 脑白质和胚神经细胞中Bcl-2的蛋白表达结果与分析第89-90页
        3.6.3 p53的mRNA表达结果与分析第90-91页
        3.6.4 脑白质和胚神经细胞中p53的蛋白表达结果与分析第91-92页
        3.6.5 Bax的mRNA表达结果与分析第92-93页
        3.6.6 脑白质和胚神经细胞中Bax的蛋白表达结果与分析第93-94页
        3.6.7 Cyt c的mRNA表达结果与分析第94-95页
        3.6.8 脑白质和胚神经细胞中Cyt c的蛋白表达结果与分析第95-96页
        3.6.9 Caspase-3的mRNA表达结果与分析第96-97页
        3.6.10 脑白质和胚神经细胞中Caspase-3的蛋白表达结果与分析第97-98页
    3.7 形态学观察结果与分析第98-104页
        3.7.1 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织的显微结构观察结果与分析第98-100页
        3.7.2 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织的超微结构观察结果与分析第100-102页
        3.7.3 鸡胚神经细胞AO/EB的检测结果与分析第102-104页
4 讨论第104-111页
    4.1 硒对铅中毒引起鸡神经组织氧化应激的缓解作用第104-105页
    4.2 硒对铅中毒引起鸡神经组织硒蛋白改变的缓解作用第105-106页
    4.3 硒对铅中毒引起鸡神经组织细胞因子改变的缓解作用第106-107页
    4.4 硒对铅中毒引起鸡神经组织热休克蛋白改变的缓解作用第107-108页
    4.5 硒对铅中毒引起鸡神经组织细胞凋亡的缓解作用第108-109页
    4.6 硒对铅中毒引起鸡神经组织形态学变化的缓解作用第109-111页
5 结论第111-112页
致谢第112-113页
参考文献第113-128页
附录第128-129页
攻读博士学位期间发表的学术论文第129页

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