摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-15页 |
1 前言 | 第16-27页 |
1.1 铅污染 | 第16-17页 |
1.1.1 铅污染对人和野生鸟类的影响 | 第16-17页 |
1.1.2 鸡饲料、鸡及其食品铅污染 | 第17页 |
1.2 铅中毒对神经系统的影响 | 第17-18页 |
1.3 重金属对氧化应激、硒蛋白、热休克蛋白、细胞因子和细胞凋亡的影响 | 第18-23页 |
1.3.1 重金属对氧化应激的影响 | 第18-19页 |
1.3.2 重金属对硒蛋白的影响 | 第19-20页 |
1.3.3 重金属对细胞因子的影响 | 第20-21页 |
1.3.4 重金属对热休克蛋白的影响 | 第21-22页 |
1.3.5 重金属对细胞凋亡的影响 | 第22-23页 |
1.4 硒对重金属引起的氧化应激、硒蛋白、热休克蛋白、细胞因子和细胞凋亡因子改变的缓解作用 | 第23-26页 |
1.4.1 硒对重金属引起氧化应激的缓解作用 | 第23-24页 |
1.4.2 硒通过硒蛋白缓解重金属的毒性作用 | 第24页 |
1.4.3 硒对重金属引起细胞因子改变的缓解作用 | 第24-25页 |
1.4.4 硒对重金属引起热休克蛋白改变的缓解作用 | 第25页 |
1.4.5 硒对重金属引起细胞凋亡的缓解作用 | 第25-26页 |
1.5 目的与意义 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-38页 |
2.1 主要仪器与试剂 | 第27-28页 |
2.1.1 主要仪器 | 第27页 |
2.1.2 主要试剂 | 第27-28页 |
2.2 动物模型的建立 | 第28-30页 |
2.2.1 体内动物模型 | 第28-29页 |
2.2.2 体外动物模型 | 第29-30页 |
2.3 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干和鸡胚神经细胞样品的采集与处理 | 第30-31页 |
2.3.1 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织的采集与处理 | 第30-31页 |
2.3.2 鸡胚神经细胞的采集与处理 | 第31页 |
2.4 铅致鸡胚神经细胞半数抑制浓度(IC50)的检测 | 第31页 |
2.5 抗氧化指标的检测 | 第31页 |
2.6 荧光定量PCR的检测 | 第31-35页 |
2.6.1 引物合成 | 第31-33页 |
2.6.2 总RNA提取 | 第33-34页 |
2.6.3 反转录 | 第34页 |
2.6.4 PCR扩增 | 第34-35页 |
2.7 蛋白免疫印迹的检测 | 第35页 |
2.8 形态学的检测 | 第35-36页 |
2.8.1 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织显微结构的检测 | 第35-36页 |
2.8.2 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织超微结构的检测 | 第36页 |
2.8.3 鸡胚神经细胞AO/EB的检测 | 第36页 |
2.9 试验数据的分析和统计 | 第36-38页 |
3 结果与分析 | 第38-104页 |
3.1 铅致鸡胚神经细胞半数抑制浓度(IC50)的测定结果 | 第38页 |
3.2 鸡大脑(白质)、小脑、丘脑和鸡胚神经细胞抗氧化功能的结果与分析 | 第38-48页 |
3.2.1 SOD活性的结果与分析 | 第38-39页 |
3.2.2 GPx活性的结果与分析 | 第39-40页 |
3.2.3 GST活性的结果与分析 | 第40-41页 |
3.2.4 CAT活性的结果与分析 | 第41-42页 |
3.2.5 T-AOC活性的结果与分析 | 第42-43页 |
3.2.6 NOS活性的结果与分析 | 第43-44页 |
3.2.7 MDA含量的结果与分析 | 第44-45页 |
3.2.8 NO含量的结果与分析 | 第45-46页 |
3.2.9 H_2O_2含量的结果与分析 | 第46-47页 |
3.2.10 GSH含量的结果与分析 | 第47-48页 |
3.3 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干和神经细胞硒蛋白中硒蛋白的结果与分析 | 第48-74页 |
3.3.1 GPx1、GPx2、GPx3和GPx4的mRNA表达结果与分析 | 第48-52页 |
3.3.2 Txnrd1、Txnrd2和Txnrd3的mRNA表达结果与分析 | 第52-55页 |
3.3.3 Dio1、Dio2和Dio3的mRNA表达结果与分析 | 第55-58页 |
3.3.4 SelT、SelK、SelS、SelH、SelM、SelU、SelI、SelO、Selpb、Selpn1、Sepp1、Sepx1、Sepw1、Sep15和SPS2的mRNA表达结果与分析 | 第58-74页 |
3.4 脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干和鸡胚神经细胞中细胞因子的结果与分析 | 第74-81页 |
3.4.1 IL-2 的mRNA表达结果与分析 | 第74-75页 |
3.4.2 IL-4 的mRNA表达结果与分析 | 第75-76页 |
3.4.3 IL-6 的mRNA表达结果与分析 | 第76-77页 |
3.4.4 IL-12β的mRNA表达结果与分析 | 第77-78页 |
3.4.5 IL-17的mRNA表达结果与分析 | 第78-80页 |
3.4.6 IFN-γ的mRNA表达结果与分析 | 第80-81页 |
3.5 脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干和鸡胚神经细胞中热休克蛋白的结果与分析 | 第81-88页 |
3.5.1 HSP27的mRNA表达结果与分析 | 第81-83页 |
3.5.2 HSP40的mRNA表达结果与分析 | 第83-84页 |
3.5.3 HSP60的mRNA表达结果与分析 | 第84-85页 |
3.5.4 HSP70的mRNA表达结果与分析 | 第85-86页 |
3.5.5 HSP90的mRNA表达结果与分析 | 第86-88页 |
3.6 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑、脑干和鸡胚神经细胞中细胞凋亡相关基因结果与分析 | 第88-98页 |
3.6.1Bcl-2的mRNA表达结果与分析 | 第88-89页 |
3.6.2 脑白质和胚神经细胞中Bcl-2的蛋白表达结果与分析 | 第89-90页 |
3.6.3 p53的mRNA表达结果与分析 | 第90-91页 |
3.6.4 脑白质和胚神经细胞中p53的蛋白表达结果与分析 | 第91-92页 |
3.6.5 Bax的mRNA表达结果与分析 | 第92-93页 |
3.6.6 脑白质和胚神经细胞中Bax的蛋白表达结果与分析 | 第93-94页 |
3.6.7 Cyt c的mRNA表达结果与分析 | 第94-95页 |
3.6.8 脑白质和胚神经细胞中Cyt c的蛋白表达结果与分析 | 第95-96页 |
3.6.9 Caspase-3的mRNA表达结果与分析 | 第96-97页 |
3.6.10 脑白质和胚神经细胞中Caspase-3的蛋白表达结果与分析 | 第97-98页 |
3.7 形态学观察结果与分析 | 第98-104页 |
3.7.1 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织的显微结构观察结果与分析 | 第98-100页 |
3.7.2 鸡脑白质、脑灰质、小脑、丘脑和脑干组织的超微结构观察结果与分析 | 第100-102页 |
3.7.3 鸡胚神经细胞AO/EB的检测结果与分析 | 第102-104页 |
4 讨论 | 第104-111页 |
4.1 硒对铅中毒引起鸡神经组织氧化应激的缓解作用 | 第104-105页 |
4.2 硒对铅中毒引起鸡神经组织硒蛋白改变的缓解作用 | 第105-106页 |
4.3 硒对铅中毒引起鸡神经组织细胞因子改变的缓解作用 | 第106-107页 |
4.4 硒对铅中毒引起鸡神经组织热休克蛋白改变的缓解作用 | 第107-108页 |
4.5 硒对铅中毒引起鸡神经组织细胞凋亡的缓解作用 | 第108-109页 |
4.6 硒对铅中毒引起鸡神经组织形态学变化的缓解作用 | 第109-111页 |
5 结论 | 第111-112页 |
致谢 | 第112-113页 |
参考文献 | 第113-128页 |
附录 | 第128-129页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第129页 |