缩略语索引 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第一章 前言 | 第10-17页 |
1.1 蛋白质糖基化修饰的结构与功能 | 第10-13页 |
1.2 糖肽的富集与结构解析方法 | 第13-15页 |
1.3 核心岩藻糖修饰肽段的生物学意义 | 第15页 |
1.4 本文研究内容 | 第15-17页 |
第二章 序列式内切酶辅助的完整糖肽解析方法研究 | 第17-33页 |
2.1 材料与方法 | 第18-21页 |
2.1.1 材料与试剂 | 第18页 |
2.1.2 仪器与设备 | 第18-19页 |
2.1.3 HepG2细胞蛋白的提取 | 第19页 |
2.1.4 蛋白质酶切 | 第19页 |
2.1.5 亲水相互作用色谱糖肽富集 | 第19-20页 |
2.1.6 内切糖苷酶Endo H酶切 | 第20页 |
2.1.7 H218O辅助的内切糖苷酶PNGase F酶切 | 第20页 |
2.1.8 液质联用分析 | 第20页 |
2.1.9 数据库检索 | 第20-21页 |
2.2 结果与讨论 | 第21-32页 |
2.2.1 标准糖蛋白RNase B和IgG的方法测试 | 第22-24页 |
2.2.2 HepG2细胞全蛋白中糖肽鉴定 | 第24-25页 |
2.2.3 糖链特征碎片离子提取法筛选谱图提高鉴定结果的准确性 | 第25-27页 |
2.2.4 糖苷酶酶切获得的糖型结果 | 第27-29页 |
2.2.5 HepG2细胞系高可信度完整糖肽的鉴定 | 第29-31页 |
2.2.6 糖型位点占有率的分析 | 第31-32页 |
2.3 小结 | 第32-33页 |
第三章 疾病相关核心岩藻糖修饰糖肽的规模化鉴定 | 第33-42页 |
3.1 材料与方法 | 第33-36页 |
3.1.1 材料与试剂 | 第33页 |
3.1.2 仪器与设备 | 第33页 |
3.1.3 肝脏组织全蛋白的提取 | 第33-34页 |
3.1.4 血清高丰度蛋白的去除 | 第34页 |
3.1.5 蛋白质酶解消化 | 第34页 |
3.1.6 亲水相互作用色谱糖肽富集 | 第34-35页 |
3.1.7 LCH凝集素富集 | 第35页 |
3.1.8 内切糖苷酶Endo F3酶切 | 第35页 |
3.1.9 液质联用分析 | 第35-36页 |
3.1.10 数据库检索 | 第36页 |
3.2 结果与讨论 | 第36-41页 |
3.2.1 核心岩藻糖修饰肽段的鉴定流程 | 第36-37页 |
3.2.2 C57小鼠血清与肝脏样本中CF修饰蛋白的鉴定 | 第37-39页 |
3.2.3 肝癌、肝硬化、健康人血清样本中CF修饰蛋白鉴定结果 | 第39-41页 |
3.2.4 部分差异表达CF蛋白质 | 第41页 |
3.3 小结 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-45页 |
综述 | 第45-55页 |
参考文献 | 第52-55页 |
个人简历 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |
附录 | 第57-84页 |