雪卡毒素单克隆抗体的制备及鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 英文缩略词表 | 第7-9页 |
| 目录 | 第9-14页 |
| CONTENTS | 第14-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-32页 |
| ·雪卡毒素概述 | 第19-25页 |
| ·雪卡毒素的起源 | 第19-20页 |
| ·雪卡毒素结构和性质 | 第20-21页 |
| ·雪卡毒素中毒现状 | 第21页 |
| ·临床特点 | 第21-22页 |
| ·雪卡毒素的提取及合成 | 第22-23页 |
| ·雪卡毒素检测分析方法 | 第23-24页 |
| ·中毒治疗及防治措施 | 第24-25页 |
| ·抗体技术研究进展 | 第25-28页 |
| ·多克隆抗体的概念 | 第25-26页 |
| ·杂交瘤细胞技术 | 第26-27页 |
| ·单克隆抗体的概念 | 第27-28页 |
| ·酶联免疫分析法 | 第28-30页 |
| ·ELISA法的基本原理 | 第28页 |
| ·ELISA类型及操作步骤 | 第28-29页 |
| ·ELISA法的实际应用 | 第29-30页 |
| ·本课题研究意义 | 第30-31页 |
| ·课题研究思路及内容 | 第31页 |
| ·项目资助 | 第31-32页 |
| 第二章 雪卡毒素人工抗原的合成及鉴定 | 第32-43页 |
| ·前言 | 第32-33页 |
| ·试剂与仪器 | 第33-35页 |
| ·材料与试剂 | 第33-34页 |
| ·常用缓冲液的配制 | 第34页 |
| ·实验仪器 | 第34-35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·雪卡毒素免疫抗原的合成 | 第35页 |
| ·雪卡毒素包被抗原的合成 | 第35-36页 |
| ·雪卡毒素完全抗原的鉴定 | 第36-38页 |
| ·结果与分析 | 第38-41页 |
| ·TLC鉴定结果 | 第38页 |
| ·SDS-PAGE鉴定结果 | 第38-39页 |
| ·偶联比的测定结果 | 第39-41页 |
| ·讨论 | 第41-43页 |
| ·关于雪卡毒素代替物 | 第41页 |
| ·关于桥抗体 | 第41-43页 |
| 第三章 雪卡毒素单克隆抗体的制备 | 第43-58页 |
| ·前言 | 第43页 |
| ·材料与试剂 | 第43-45页 |
| ·动物与细胞 | 第43页 |
| ·主要试剂 | 第43-44页 |
| ·常用缓冲液配制 | 第44-45页 |
| ·实验仪器 | 第45页 |
| ·试验方法 | 第45-51页 |
| ·动物免疫 | 第45-46页 |
| ·免疫血清效价检测 | 第46页 |
| ·杂交瘤制备 | 第46-47页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选及克隆化 | 第47-49页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存及复苏 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第50页 |
| ·腹水纯化 | 第50-51页 |
| ·抗体含量的测定 | 第51页 |
| ·腹水纯化后效价测定 | 第51页 |
| ·腹水单抗亚型的鉴定 | 第51页 |
| ·实验结果 | 第51-56页 |
| ·免疫血清效价测定 | 第51-53页 |
| ·杂交瘤细胞的观察和筛选 | 第53页 |
| ·阳性细胞孔的亚克隆 | 第53-54页 |
| ·SDS-PAGE鉴定抗体纯度 | 第54页 |
| ·纯化后腹水抗体含量测定 | 第54页 |
| ·腹水抗体纯化前后效价比较 | 第54-55页 |
| ·单抗亚型 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| ·关于融合剂 | 第56页 |
| ·关于有限稀释亚克隆 | 第56页 |
| ·关于腹水纯化 | 第56-58页 |
| 第四章 雪卡毒素间接竞争ELISA检测方法的建立 | 第58-71页 |
| ·材料与试剂 | 第58-59页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·主要仪器 | 第58页 |
| ·主要溶液配制 | 第58-59页 |
| ·实验方法 | 第59-63页 |
| ·间接非竞争ELISA基本操作步骤 | 第59页 |
| ·间接竞争ELISA基本操作步骤 | 第59-60页 |
| ·包被抗原和抗体稀释倍数的确定 | 第60-61页 |
| ·抗原包被条件的确定 | 第61页 |
| ·封闭液的确定 | 第61页 |
| ·封闭条件的确定 | 第61页 |
| ·甲醇浓度的确定 | 第61-62页 |
| ·竞争反应模式的确定 | 第62-63页 |
| ·间接竞争ELISA标准竞争抑制曲线的制作 | 第63页 |
| ·腹水单抗特异性鉴定 | 第63页 |
| ·实验结果 | 第63-69页 |
| ·包被抗原工作浓度和抗体稀释倍数的确定 | 第63-64页 |
| ·雪卡毒素人工抗原包被时间的确定 | 第64-65页 |
| ·封闭液的选择 | 第65-66页 |
| ·封闭条件的选择 | 第66页 |
| ·甲醇浓度对间接ELISA效果的影响 | 第66-67页 |
| ·竞争反应模式的选择 | 第67页 |
| ·本研究确立的雪卡毒素间接竞争ELISA的条件 | 第67-68页 |
| ·标准曲线的制作 | 第68-69页 |
| ·腹水单抗特异性结果 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·关于标准曲线的建立 | 第69页 |
| ·关于交叉反应 | 第69-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
