缩写词 | 第9-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
引言 | 第17-39页 |
1 植物体胚发生抗性相关基因克隆研究进展 | 第17-18页 |
2 植物抗病防御机制研究进展 | 第18-37页 |
2.1 R基因的研究进展 | 第20-29页 |
2.2 植物激素信号途径抗性相关基因研究进展 | 第29-32页 |
2.3 广谱抗性基因铁氧还蛋白基因在植物抗性育种中的研究进展 | 第32-37页 |
3 龙眼抗性基因工程研究进展 | 第37页 |
4 本研究的意义和主要内容 | 第37-39页 |
第一章 龙眼抗性基因的同源克隆 | 第39-52页 |
1 材料与方法 | 第39-40页 |
1.1 材料 | 第39页 |
1.2 方法 | 第39-40页 |
2 结果与分析 | 第40-50页 |
2.1 龙眼RGA序列扩增 | 第40-45页 |
2.2 龙眼RGA氨基酸序列多重序列比对 | 第45-46页 |
2.3 龙眼RGA序列进化树分析 | 第46-48页 |
2.4 龙眼RGA氨基酸序列基序分析 | 第48-49页 |
2.5 龙眼miRNA靶向的RGA序列预测 | 第49-50页 |
3 讨论 | 第50-52页 |
3.1 利用龙眼EC cDNA是进行NBS类R基因克隆的良好材料 | 第50页 |
3.2 non-TNL类型为简并引物克隆RGA序列的主要类型 | 第50-51页 |
3.3 龙眼RGA中存在可变剪接的序列 | 第51-52页 |
第二章 龙眼胚性愈伤转录组抗性基因的挖掘与鉴定 | 第52-63页 |
1 材料与方法 | 第52-53页 |
1.1 基因挖掘 | 第52页 |
1.2 序列分析 | 第52-53页 |
2 结果 | 第53-60页 |
2.1 龙眼转录组R基因的挖掘 | 第53-54页 |
2.2 龙眼转录组R基因的进化树分析 | 第54-59页 |
2.3 miRNA靶向龙眼NBS序列预测 | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
3.1 龙眼EC存在表达类型丰富的R基因 | 第60-61页 |
3.2 non-TNL类型R基因为龙眼R基因的主要类型 | 第61-62页 |
3.3 龙眼non-TNL1及non-TNL2亚类群R基因较不保守 | 第62-63页 |
第三章 龙眼R基因全长的克隆及定量表达分析 | 第63-80页 |
1 材料与方法 | 第63-65页 |
1.1 材料 | 第63页 |
1.2 方法 | 第63-65页 |
2 结果 | 第65-77页 |
2.1 龙眼R基因全长克隆 | 第65页 |
2.2 龙眼R基因生物信息学分析 | 第65-74页 |
2.3 龙眼R基因的荧光定量表达分析 | 第74-77页 |
3 讨论 | 第77-80页 |
3.1 龙眼R基因与其他物种R基因呈现较大的差异 | 第77-78页 |
3.2 龙眼CNL类型R基因CC结构的生理功能 | 第78页 |
3.3 龙眼R基因可能通过整体响应病原物的侵染使植株产生SAR | 第78-79页 |
3.4 靶向龙眼R基因的miRNA可能在植物与病原物的互作中产生重要作用 | 第79-80页 |
第四章 龙眼抗性相关激素信号途径标记基因的克隆与表达分析 | 第80-95页 |
1 材料与方法 | 第80-82页 |
1.1 材料 | 第80页 |
1.2 方法 | 第80-82页 |
2 结果 | 第82-91页 |
2.1 龙眼不同激素信号途径标记基因挖掘 | 第82-83页 |
2.2 龙眼不同激素信号途径标记基因序列分析 | 第83-89页 |
2.3 龙眼不同激素信号途径标记基因荧光定量表达分析 | 第89-91页 |
3 讨论 | 第91-95页 |
3.1 龙眼胚性培养物中不同激素信号途径标记基因 | 第91-93页 |
3.2 龙眼激素信号途径标记基因家族不同成员在病原物及激素处理下呈现不同的表达规律 | 第93-95页 |
第五章 龙眼铁氧还蛋白家族基因的克隆及表达分析 | 第95-108页 |
1 材料与方法 | 第96-98页 |
1.1 材料 | 第96页 |
1.2 方法 | 第96-98页 |
2 结果与分析 | 第98-105页 |
2.1 龙眼转录中Fd及Fld家族基因的挖掘 | 第98-99页 |
2.2 龙眼Fd及tyw1基因全长克隆 | 第99-100页 |
2.3 龙眼Fd及tyw1基因序列分析 | 第100-103页 |
2.4 龙眼Fd基因亚细胞定位 | 第103-104页 |
2.5 龙眼不同类型Fd基因在EC不同阶段表达分析 | 第104-105页 |
3 讨论 | 第105-108页 |
3.1 龙眼EC中表达的Fd基因类型 | 第105-106页 |
3.2 龙眼Fd基因在龙眼体细胞胚胎发生的作用 | 第106页 |
3.3 龙眼tyw1基因与[Fe-S]簇结合在龙眼胚胎发生过程中参与RNA转录后修饰 | 第106-108页 |
第六章 龙眼铁氧还蛋白基因在文心兰异位表达 | 第108-117页 |
1 材料与方法 | 第109页 |
1.1 材料 | 第109页 |
1.2 方法 | 第109页 |
2 结果 | 第109-115页 |
2.1 文心兰PLB抗性培养 | 第109-110页 |
2.2 不同农杆菌菌株对文心兰PLB的转化效率影响 | 第110-111页 |
2.3 转化文心兰植物的阳性检测 | 第111页 |
2.4 转化文心兰植物的抗软腐病检测 | 第111-115页 |
3 讨论 | 第115-117页 |
3.1 文心兰基因转化的筛选标记基因 | 第115页 |
3.2 不同品种农杆菌对文心兰转化效率影响 | 第115页 |
3.3 龙眼Fd3较FdC1抗软腐病效应明显 | 第115-117页 |
第七章 异位表达龙眼铁氧还蛋白在文心兰与印度梨形孢共生中的MIRNA表达变化 | 第117-125页 |
1 材料与方法 | 第118-120页 |
1.1 材料 | 第118页 |
1.2 方法 | 第118-120页 |
2 结果 | 第120-123页 |
2.1 印度梨形孢促文心兰生长与生根效应 | 第120-121页 |
2.2 文心兰miRNA及其靶基因的注释 | 第121-122页 |
2.3 转化龙眼Fd基因文心兰miRNA及其靶基因的荧光定量分析 | 第122-123页 |
3 讨论 | 第123-125页 |
3.1 miR156与miR397在转化龙眼Fd基因的植株中呈现不同的表达规律 | 第123-124页 |
3.2 龙眼Fd3可能促进梨形孢在文心兰的共生进程的建立 | 第124-125页 |
主要结论及创新点 | 第125-127页 |
参考文献 | 第127-145页 |
附录一 46条同源克隆RGA核酸序列 | 第145-156页 |
附录二 龙眼R基因全长序列 | 第156-174页 |
附录三 13条NBS-LRR类R基因全长蛋白序列多重比对分析 | 第174-178页 |
附录四 龙眼抗性相关激素信号途径标记基因核酸序列 | 第178-182页 |
附录五 龙眼铁氧还蛋白家族基因核酸序列 | 第182-186页 |
在读博士期间发表论文情况及参加学术会议情况 | 第186-187页 |