| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第11-18页 |
| 1.1 中度嗜盐菌 | 第11-12页 |
| 1.1.1 中度嗜盐菌的概况 | 第11页 |
| 1.1.2 中度嗜盐菌的广泛应用 | 第11-12页 |
| 1.1.3 嗜盐四联球菌 | 第12页 |
| 1.2 嗜盐四联球菌的耐盐机制 | 第12-14页 |
| 1.2.1 嗜盐四联球菌耐盐机制的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2.2 相容性溶质 | 第13-14页 |
| 1.3 实时荧光定量PCR | 第14-15页 |
| 1.4 膜蛋白的提取方法 | 第15-17页 |
| 1.5 本论文的研究意义与主要内容 | 第17-18页 |
| 第二章 嗜盐四联球菌CICC10469 butA生物信息学分析 | 第18-34页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.2 生物信息学软件和在线网络服务网站 | 第18页 |
| 2.2.1 生物信息学软件 | 第18页 |
| 2.2.2 在线网络服务网站 | 第18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-21页 |
| 2.3.1 ButA蛋白的功能与特征性分析 | 第18-21页 |
| 2.3.2 ButA蛋白理化性质的分析 | 第21页 |
| 2.3.3 分析ButA蛋白的二级结构 | 第21页 |
| 2.4 结果和讨论 | 第21-32页 |
| 2.4.1 ButA蛋白序列特征性分析 | 第21-22页 |
| 2.4.2 系统进化发育树 | 第22页 |
| 2.4.3 多重序列比对 | 第22-25页 |
| 2.4.4 ButA蛋白的理化性质 | 第25-26页 |
| 2.4.5 ButA蛋白的疏水性分析 | 第26-27页 |
| 2.4.6 ButA蛋白的卷曲螺旋预测 | 第27-29页 |
| 2.4.7 ButA蛋白的二级结构预测 | 第29页 |
| 2.4.8 ButA蛋白的跨膜区域 | 第29-32页 |
| 2.5 本章小结 | 第32-34页 |
| 第三章 盐胁迫下嗜盐四联球菌butA基因转录水平变化 | 第34-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 实验菌株 | 第34页 |
| 3.1.2 试剂和仪器 | 第34-35页 |
| 3.2 试验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 菌体的培养与扩大 | 第35页 |
| 3.2.2 RNA样品的制备 | 第35-36页 |
| 3.2.3 反转录反应（合成cDNA） | 第36-37页 |
| 3.2.4 纯化后的RNA和cDNA质量的检验 | 第37-38页 |
| 3.2.5 相对荧光定量检测butA基因的转录水平 | 第38-39页 |
| 3.2.6 不同盐浓度下ButA蛋白量变化 | 第39-40页 |
| 3.2.7 ButA蛋白转运甘氨酸甜菜碱含量测定 | 第40页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第40-47页 |
| 3.3.1 RT-qPCR样品的制备与检测 | 第40-42页 |
| 3.3.2 RT-qPCR检测盐胁迫下butA基因的相对表达量 | 第42-44页 |
| 3.3.3 不同盐浓度下ButA蛋白量变化 | 第44-45页 |
| 3.3.4 嗜盐四联球菌胞内甘氨酸甜菜碱含量 | 第45-47页 |
| 3.4 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 嗜盐四联球菌ButA蛋白异源表达的研究 | 第48-76页 |
| 4.1 实验材料 | 第48页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第48页 |
| 4.2 试剂和仪器 | 第48-54页 |
| 4.2.1 酶和引物设计 | 第48页 |
| 4.2.2 培养基 | 第48-49页 |
| 4.2.3 主要试剂和仪器 | 第49-52页 |
| 4.2.4 主要溶液 | 第52-54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-68页 |
| 4.3.1 嗜盐四联球菌butA基因的克隆 | 第54-63页 |
| 4.3.2 嗜盐四联球菌butA基因的异源表达和纯化 | 第63-68页 |
| 4.3.3 盐胁迫下重组菌甜菜碱的吸收量 | 第68页 |
| 4.4 结果 | 第68-74页 |
| 4.4.1 butA基因CDS的获得 | 第68-69页 |
| 4.4.2 pET32a(+)–butA的构建示意图 | 第69-70页 |
| 4.4.3 pET32a(+)–butA转化大肠杆菌阳性克隆验证 | 第70页 |
| 4.4.4 pET32a(+)–butA载体的酶切鉴定 | 第70-72页 |
| 4.4.5 纯化重组蛋白 | 第72页 |
| 4.4.6 蛋白纯化后的含量 | 第72-73页 |
| 4.4.7 butA异源表达活性 | 第73-74页 |
| 4.5 本章小结 | 第74-76页 |
| 结论与展望 | 第76-78页 |
| 结论 | 第76-77页 |
| 创新点 | 第77页 |
| 展望 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-83页 |
| 附录 | 第83-87页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 附表 | 第89页 |
