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干扰Kinesin-12基因表达对星形胶质细胞增殖和迁移的影响及机制研究

摘要第6-8页
Abstract第8-10页
第一章 绪论第11-13页
第二章 材料与方法第13-29页
    2.1 研究资料及仪器设备第13-16页
        2.1.1 实验动物第13页
        2.1.2 试剂第13-15页
        2.1.3 试剂配制第15页
        2.1.4 实验仪器第15-16页
    2.2 实验方法第16-29页
        2.2.1 出生后 1 d SD大鼠脊髓星形胶质细胞原代培养第16-17页
        2.2.2 免疫细胞化学染色第17页
        2.2.3 荧光定量PCR第17-19页
        2.2.4 基因克隆及载体构建第19-22页
        2.2.5 Western Blot第22-24页
        2.2.6 GST-pulldown第24-25页
        2.2.7 免疫共沉淀(CO-IP)第25-26页
        2.2.8 星形胶质细胞转染第26-27页
        2.2.9 星形胶质细胞增殖能力检测第27页
        2.2.10 细胞周期和DNA含量分析第27-28页
        2.2.11 星形胶质细胞的迁移能力检测第28页
        2.2.12 FRET(荧光共振能量转移)第28页
        2.2.13 统计学分析第28-29页
第三章 实验结果第29-40页
    3.1 干扰Kinesin-12 抑制细胞增殖第29-33页
        3.1.1 GFAP鉴定出生后 1d大鼠脊髓星形胶质细胞第29-30页
        3.1.2 Kinesin-12(K-12), Kinesin-5(K-5)si RNA干扰效率的确定第30-31页
        3.1.3 干扰Kinesin-12 显著抑制细胞增殖第31页
        3.1.4.流式细胞术检测发现Kinesin-12 和Kinesin-5 可能存在不同的作用机制第31-33页
    3.2 干扰Kinesin-12 显著促进细胞迁移第33-34页
    3.3 Kinesin-12 和Myosin ⅡB(MYH10)蛋白相互作用第34-37页
        3.3.1 CO-IP实验证明了Kinesin-12 与Myosin ⅡB而不是Myosin ⅡA相互作用第34-35页
        3.3.2 Kinesin-12 与Myosin ⅡB直接相互作用第35-37页
    3.4 Kinesin-12 和Myosin ⅡB在细胞的lamellar区存在共定位第37-38页
    3.5 荧光共振能量转移(FRET)证明Kinesin-12 和Myosin ⅡB相互作用第38-39页
    3.6 si RNA/CO-IP检测Kinesin-12 和actin的结合量第39-40页
第四章 讨论第40-43页
第五章 结论第43-44页
参考文献第44-46页
英文缩写词表第46-48页
综述第48-64页
    综述参考文献第58-64页
攻读硕士学位期间公开发表的论文、参与的项目和获得的荣誉第64-65页
致谢第65页

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