摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第11-13页 |
第二章 材料与方法 | 第13-29页 |
2.1 研究资料及仪器设备 | 第13-16页 |
2.1.1 实验动物 | 第13页 |
2.1.2 试剂 | 第13-15页 |
2.1.3 试剂配制 | 第15页 |
2.1.4 实验仪器 | 第15-16页 |
2.2 实验方法 | 第16-29页 |
2.2.1 出生后 1 d SD大鼠脊髓星形胶质细胞原代培养 | 第16-17页 |
2.2.2 免疫细胞化学染色 | 第17页 |
2.2.3 荧光定量PCR | 第17-19页 |
2.2.4 基因克隆及载体构建 | 第19-22页 |
2.2.5 Western Blot | 第22-24页 |
2.2.6 GST-pulldown | 第24-25页 |
2.2.7 免疫共沉淀(CO-IP) | 第25-26页 |
2.2.8 星形胶质细胞转染 | 第26-27页 |
2.2.9 星形胶质细胞增殖能力检测 | 第27页 |
2.2.10 细胞周期和DNA含量分析 | 第27-28页 |
2.2.11 星形胶质细胞的迁移能力检测 | 第28页 |
2.2.12 FRET(荧光共振能量转移) | 第28页 |
2.2.13 统计学分析 | 第28-29页 |
第三章 实验结果 | 第29-40页 |
3.1 干扰Kinesin-12 抑制细胞增殖 | 第29-33页 |
3.1.1 GFAP鉴定出生后 1d大鼠脊髓星形胶质细胞 | 第29-30页 |
3.1.2 Kinesin-12(K-12), Kinesin-5(K-5)si RNA干扰效率的确定 | 第30-31页 |
3.1.3 干扰Kinesin-12 显著抑制细胞增殖 | 第31页 |
3.1.4.流式细胞术检测发现Kinesin-12 和Kinesin-5 可能存在不同的作用机制 | 第31-33页 |
3.2 干扰Kinesin-12 显著促进细胞迁移 | 第33-34页 |
3.3 Kinesin-12 和Myosin ⅡB(MYH10)蛋白相互作用 | 第34-37页 |
3.3.1 CO-IP实验证明了Kinesin-12 与Myosin ⅡB而不是Myosin ⅡA相互作用 | 第34-35页 |
3.3.2 Kinesin-12 与Myosin ⅡB直接相互作用 | 第35-37页 |
3.4 Kinesin-12 和Myosin ⅡB在细胞的lamellar区存在共定位 | 第37-38页 |
3.5 荧光共振能量转移(FRET)证明Kinesin-12 和Myosin ⅡB相互作用 | 第38-39页 |
3.6 si RNA/CO-IP检测Kinesin-12 和actin的结合量 | 第39-40页 |
第四章 讨论 | 第40-43页 |
第五章 结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
英文缩写词表 | 第46-48页 |
综述 | 第48-64页 |
综述参考文献 | 第58-64页 |
攻读硕士学位期间公开发表的论文、参与的项目和获得的荣誉 | 第64-65页 |
致谢 | 第65页 |