| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 1. 前言 | 第12-20页 |
| 1.1 昆虫的先天性免疫 | 第12-15页 |
| 1.1.1 细胞免疫 | 第12-14页 |
| 1.1.2 体液免疫 | 第14-15页 |
| 1.2 酚氧化酶原(Prophenoloxidase,PPO)激活系统 | 第15-18页 |
| 1.3 模式识别受体 | 第18-19页 |
| 1.4 本论文研究意义 | 第19-20页 |
| 2. 材料与方法 | 第20-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 棉铃虫 | 第20页 |
| 2.1.2 载体和菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 主要仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.4 试剂 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-37页 |
| 2.2.1 HaDFP2基因克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.2 HaDFP2基因序列分析 | 第24页 |
| 2.2.3 HaDFP2重组蛋白的原核表达及纯化 | 第24-27页 |
| 2.2.4 HaDFP2多克隆抗体的制备 | 第27-28页 |
| 2.2.5 组织特异性表达分析 | 第28-29页 |
| 2.2.6 棉铃虫的免疫刺激及组织样品收集 | 第29页 |
| 2.2.7 qRT-PCR检测HaDFP2基因表达量 | 第29-30页 |
| 2.2.8 western blotting检测HaDFP2蛋白表达量 | 第30页 |
| 2.2.9 rHaDFP2蛋白体外功能研究 | 第30-32页 |
| 2.2.10 HaDFP2基因RNA干扰试验 | 第32-34页 |
| 2.2.11 HaDFP2基因5’上游区序列的克隆及启动子活性分析 | 第34-37页 |
| 3. 结果与分析 | 第37-49页 |
| 3.1 棉铃虫HaDFP2基因克隆与序列分析 | 第37-38页 |
| 3.1.1 HaDFP2基因克隆 | 第37页 |
| 3.1.2 HaDFP2基因序列分析 | 第37-38页 |
| 3.2 HaDFP2重组蛋白的原核表达纯化与抗体制备 | 第38-39页 |
| 3.2.1 HaDFP2重组蛋白的表达和纯化 | 第38页 |
| 3.2.2 HaDFP2多克隆抗体制备与检测 | 第38-39页 |
| 3.3 棉铃虫HaDFP2基因的组织特异表达分析 | 第39页 |
| 3.4 大肠杆菌刺激对血淋巴中HaDFP2表达量的影响 | 第39-41页 |
| 3.5 rHaDFP2蛋白体外功能研究 | 第41-44页 |
| 3.5.1 rHaDFP2促进血淋巴酚氧化酶原的激活 | 第41页 |
| 3.5.2 rHaDFP2促进凝胶珠的体内黑化 | 第41-42页 |
| 3.5.3 rHaDFP2的菌结合试验 | 第42-43页 |
| 3.5.4 rHaDFP2体外促进菌的凝集试验 | 第43页 |
| 3.5.5 rHaDFP2与棉铃虫血细胞的结合试验 | 第43-44页 |
| 3.6 HaDFP2基因敲降对棉铃虫先天性免疫功能的影响 | 第44-46页 |
| 3.6.1 HaDFP2基因敲降效果验证 | 第44页 |
| 3.6.2 HaDFP2基因敲降对血浆酚氧化酶活性的影响 | 第44-45页 |
| 3.6.3 HaDFP2基因敲降对血淋巴清除细菌能力的影响 | 第45-46页 |
| 3.7 HaDFP2基因5’上游区序列的扩增与启动子活性分析 | 第46-49页 |
| 3.7.1 HaDFP2基因上游区序列扩增 | 第46-47页 |
| 3.7.2 构建重组质粒 | 第47页 |
| 3.7.3 HaDFP2基因启动子活性分析 | 第47-49页 |
| 4. 讨论 | 第49-51页 |
| 小结与展望 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |
| 在校期间发表论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
