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一种催化多重位点糖苷化的茶树类黄酮糖基转移酶的鉴定

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
1 文献综述第9-13页
    1.1 茶树中类黄酮及其衍生物的生物学意义第9-10页
        1.1.1 茶多酚的生物学功能第9页
        1.1.2 糖苷化的类黄酮化合物及其生物学功能第9-10页
    1.2 UDPG-糖基转移酶(UGTs)家族及其催化特点第10-12页
        1.2.1 UDPG-糖基转移酶(UGTs)家族第10-11页
        1.2.2 UGTs的糖供体特异性第11页
        1.2.3 UGTs的糖受体特异性第11页
        1.2.4 UGTs的糖苷化位点特异性第11-12页
    1.3 茶树的类黄酮糖基转移酶的研究现状第12-13页
2 引言第13-15页
    2.1 研究目的及意义第13页
    2.2 研究技术路线第13页
    2.3 研究主要内容第13-15页
        2.3.1 基因筛选克隆与生物信息学分析第13-14页
        2.3.2 基因表达模式的分析第14页
        2.3.3 利用反向遗传学手段来验证CsUGT73A20的功能第14-15页
3 材料和方法第15-23页
    3.1 实验材料与条件第15页
    3.2 仪器与试剂第15-16页
        3.2.1 主要药品与试剂第15页
        3.2.2 主要仪器第15-16页
        3.2.3 主要试剂的配方第16页
    3.3 试验方法第16-23页
        3.3.1 基因全长克隆及生物信息学分析第16-17页
        3.3.2 组织特异性及诱导表达qRT-PCR第17-18页
        3.3.3 原核表达第18-19页
        3.3.4 融合蛋白的酶活检测及产物鉴定第19页
        3.3.5 融合蛋白的酶学分析第19-20页
        3.3.6 HPLC及UPLC-MS/MS的检测方法第20页
        3.3.7 CsUGT73A20基因的烟草遗传转化实验第20-22页
        3.3.8 CsUGT73A20基因的拟南芥遗传转化及验证第22-23页
4 结果与分析第23-38页
    4.1 CsUGT73A20的克隆与生物信息学分析第23-27页
        4.1.1 CsUGT73A20基因的cDNA克隆第23-24页
        4.1.2 CsUGT73A20基因的生物信息学分析第24-27页
    4.2 CsUGT73A20 基因在茶树中的组织特异性及诱导表达第27-29页
    4.3 CsUGT73A20 基因的原核表达及纯化第29-35页
        4.3.1 rCsUGT73A20酶活检测及产物鉴定第29-32页
        4.3.2 rCsUGT73A20酶的最适反应条件第32-34页
        4.3.3 最适糖苷化位点第34-35页
    4.4 CsUGT73A20基因的烟草遗传转化试验第35-37页
    4.5 CsUGT73A20基因的拟南芥遗传转化试验第37-38页
5 讨论第38-40页
    5.1 CsUGT73A20 编码一种具有区域选择性的糖基转移酶第38页
    5.2 pH影响rCsUGT73A20糖基转移酶的区域选择性第38-39页
    5.3 区域选择性由糖基转移酶的关键氨基酸残基决定第39页
    5.4 CsUGT73A20 在转基因植物体内具有糖基转移酶活性第39-40页
6 结论第40-41页
参考文献第41-45页
附录第45-48页
致谢第48-49页
作者简介第49页

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