| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 文献综述 | 第9-13页 |
| 1.1 茶树中类黄酮及其衍生物的生物学意义 | 第9-10页 |
| 1.1.1 茶多酚的生物学功能 | 第9页 |
| 1.1.2 糖苷化的类黄酮化合物及其生物学功能 | 第9-10页 |
| 1.2 UDPG-糖基转移酶(UGTs)家族及其催化特点 | 第10-12页 |
| 1.2.1 UDPG-糖基转移酶(UGTs)家族 | 第10-11页 |
| 1.2.2 UGTs的糖供体特异性 | 第11页 |
| 1.2.3 UGTs的糖受体特异性 | 第11页 |
| 1.2.4 UGTs的糖苷化位点特异性 | 第11-12页 |
| 1.3 茶树的类黄酮糖基转移酶的研究现状 | 第12-13页 |
| 2 引言 | 第13-15页 |
| 2.1 研究目的及意义 | 第13页 |
| 2.2 研究技术路线 | 第13页 |
| 2.3 研究主要内容 | 第13-15页 |
| 2.3.1 基因筛选克隆与生物信息学分析 | 第13-14页 |
| 2.3.2 基因表达模式的分析 | 第14页 |
| 2.3.3 利用反向遗传学手段来验证CsUGT73A20的功能 | 第14-15页 |
| 3 材料和方法 | 第15-23页 |
| 3.1 实验材料与条件 | 第15页 |
| 3.2 仪器与试剂 | 第15-16页 |
| 3.2.1 主要药品与试剂 | 第15页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第15-16页 |
| 3.2.3 主要试剂的配方 | 第16页 |
| 3.3 试验方法 | 第16-23页 |
| 3.3.1 基因全长克隆及生物信息学分析 | 第16-17页 |
| 3.3.2 组织特异性及诱导表达qRT-PCR | 第17-18页 |
| 3.3.3 原核表达 | 第18-19页 |
| 3.3.4 融合蛋白的酶活检测及产物鉴定 | 第19页 |
| 3.3.5 融合蛋白的酶学分析 | 第19-20页 |
| 3.3.6 HPLC及UPLC-MS/MS的检测方法 | 第20页 |
| 3.3.7 CsUGT73A20基因的烟草遗传转化实验 | 第20-22页 |
| 3.3.8 CsUGT73A20基因的拟南芥遗传转化及验证 | 第22-23页 |
| 4 结果与分析 | 第23-38页 |
| 4.1 CsUGT73A20的克隆与生物信息学分析 | 第23-27页 |
| 4.1.1 CsUGT73A20基因的cDNA克隆 | 第23-24页 |
| 4.1.2 CsUGT73A20基因的生物信息学分析 | 第24-27页 |
| 4.2 CsUGT73A20 基因在茶树中的组织特异性及诱导表达 | 第27-29页 |
| 4.3 CsUGT73A20 基因的原核表达及纯化 | 第29-35页 |
| 4.3.1 rCsUGT73A20酶活检测及产物鉴定 | 第29-32页 |
| 4.3.2 rCsUGT73A20酶的最适反应条件 | 第32-34页 |
| 4.3.3 最适糖苷化位点 | 第34-35页 |
| 4.4 CsUGT73A20基因的烟草遗传转化试验 | 第35-37页 |
| 4.5 CsUGT73A20基因的拟南芥遗传转化试验 | 第37-38页 |
| 5 讨论 | 第38-40页 |
| 5.1 CsUGT73A20 编码一种具有区域选择性的糖基转移酶 | 第38页 |
| 5.2 pH影响rCsUGT73A20糖基转移酶的区域选择性 | 第38-39页 |
| 5.3 区域选择性由糖基转移酶的关键氨基酸残基决定 | 第39页 |
| 5.4 CsUGT73A20 在转基因植物体内具有糖基转移酶活性 | 第39-40页 |
| 6 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-45页 |
| 附录 | 第45-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 作者简介 | 第49页 |