| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| 1.1 L-谷氨酰胺的简介 | 第9-12页 |
| 1.1.1 L-谷氨酰胺的理化性质 | 第9页 |
| 1.1.2 L-谷氨酰胺的生理特性 | 第9-10页 |
| 1.1.3 L-谷氨酰胺的营养价值 | 第10-11页 |
| 1.1.4 L-谷氨酰胺的应用 | 第11-12页 |
| 1.2 L-谷氨酰胺的生产 | 第12-13页 |
| 1.2.1 L-谷氨酰胺的生产方法 | 第12-13页 |
| 1.2.2 L-谷氨酰胺的传统检测法 | 第13页 |
| 1.3 L-谷氨酰胺的高通量筛选方法的构建 | 第13-15页 |
| 1.3.1 传统检测方法和高通量筛选方法的比较 | 第13-14页 |
| 1.3.2 高通量筛选技术 | 第14页 |
| 1.3.3 L-谷氨酰胺高产菌株的高通量筛选方法 | 第14-15页 |
| 1.4 新型靛蓝色素(indigoidine) | 第15-17页 |
| 1.4.1 Indigoidine色素 | 第15页 |
| 1.4.2 Indigoidine合成酶 | 第15-16页 |
| 1.4.3 Indigoidine的发酵生产 | 第16-17页 |
| 1.5 论文的研究目的、意义、主要内容 | 第17-18页 |
| 1.5.1 论文的研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 2 实验材料与方法 | 第18-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-23页 |
| 2.1.1 菌种、质粒及引物 | 第18-19页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.1.4 主要培养基和溶液 | 第20-23页 |
| 2.1.4.1 主要培养基 | 第20页 |
| 2.1.4.2 主要溶液 | 第20-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-30页 |
| 2.2.1 基因组和质粒的提取方法 | 第23-24页 |
| 2.2.2 大肠杆菌感受态的制备及转化方法 | 第24-25页 |
| 2.2.2.1 大肠杆菌感受态的制备 | 第24页 |
| 2.2.2.3 大肠杆菌的化学转化法 | 第24-25页 |
| 2.2.3 重组质粒、菌株的构建及诱导表达 | 第25-27页 |
| 2.2.4 蛋白纯化方法 | 第27页 |
| 2.2.5 蛋白浓度测定方法 | 第27-28页 |
| 2.2.6 BPSA酶动力学表征实验 | 第28页 |
| 2.2.7 大肠杆菌发酵生产新型靛蓝色素(indigoidine) | 第28页 |
| 2.2.9 核磁共振法检测indigoidine化学结构 | 第28页 |
| 2.2.10 谷氨酸棒杆菌重组菌株的诱导表达 | 第28-29页 |
| 2.2.11 谷氨酸棒杆菌生产新型蓝色染料indigoidine的优化 | 第29页 |
| 2.2.12 利用谷氨酰胺合成酶高产L-谷氨酰胺 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-47页 |
| 3.1 重组质粒的构建 | 第30-36页 |
| 3.2 重组菌株的诱导表达 | 第36-37页 |
| 3.2.1 大肠杆菌重组菌的诱导表达 | 第36-37页 |
| 3.2.2 谷氨酸棒杆菌重组菌株的诱导表达 | 第37页 |
| 3.3 蛋白纯化 | 第37-39页 |
| 3.4 蛋白浓度的测定 | 第39页 |
| 3.5 BPSA酶动力学表征实验 | 第39-40页 |
| 3.6 构建高通量筛选L-谷氨酰胺的方法的初步研究 | 第40-41页 |
| 3.7 核磁共振检测蓝色染料indigoidine的化学结构 | 第41-42页 |
| 3.8 新型靛蓝indigoidine产量的测定 | 第42-43页 |
| 3.9 优化indigoidine产量的方法 | 第43-46页 |
| 3.10 利用谷氨酰胺合成酶加强L-谷氨酰胺的生产 | 第46-47页 |
| 4 结论 | 第47-48页 |
| 5 展望 | 第48-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
