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CNGC2和PEPR2调节拟南芥细胞内外钙动态变化的分子机理及生理功能研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-10页
英文缩写表第14-15页
第一章 文献综述第15-35页
    1.1 钙在植物体内的重要性第15-20页
        1.1.1 钙是植物必需的营养物质第15-17页
        1.1.2 钙是植物体内重要的第二信使第17-20页
    1.2 植物体内钙的储存部位第20-22页
        1.2.1 储存在植物质外体中的钙第20-21页
        1.2.2 储存在植物细胞器中的钙第21-22页
    1.3 参与钙流动的转运蛋白第22-25页
        1.3.1 参与钙流出细胞质的转运蛋白第22-23页
        1.3.2 参与钙进入细胞质的转运蛋白第23-25页
    1.4 CNGC通道蛋白研究进展第25-32页
        1.4.1 拟南芥CNGC家族成员及结构第25-27页
        1.4.2 环化核苷酸cNMP简介第27-28页
        1.4.3 CNGC家族成员的研究进展第28-32页
    1.5 拟南芥叶脉发育模式第32页
    1.6 水母发光蛋白检测细胞内钙的理论方法第32-33页
    1.7 研究目的和意义第33-35页
第二章 CNGC2介导拟南芥叶片Ca~(2+)的分布第35-79页
    2.1 引言第35页
    2.2 材料第35-36页
        2.2.1 实验材料第35页
        2.2.2 菌种与质粒第35页
        2.2.3 实验试剂第35-36页
    2.3 实验仪器第36-37页
    2.4 实验试剂的配置第37-42页
    2.5 实验方法第42-51页
        2.5.1 拟南芥的培养第42-43页
        2.5.2 植物总钙和总镁含量的提取和测定第43页
        2.5.3 水溶性钙、果胶钙和草酸钙的提取和测定第43页
        2.5.4 细胞质内钙离子的测定方法第43-44页
        2.5.5 DAB染色过程第44页
        2.5.6 Trypan blue染色过程第44页
        2.5.7 GUS染色方法第44页
        2.5.8 CFDA韧皮部运载实验方法第44-45页
        2.5.9 荧光染料观察细胞外钙的实验方法第45页
        2.5.10 avrDC3000 avrRPM1~+注射叶片实验第45页
        2.5.11 离子渗透率测定第45-46页
        2.5.12 淀粉染色过程第46页
        2.5.13 拟南芥叶片中cAMP的提取和测定第46页
        2.5.14 常用分子生物学实验方法第46-50页
        2.5.15 拟南芥转基因植株的筛选第50-51页
    2.6 引物列表第51-53页
    2.7 实验结果与分析第53-76页
        2.7.1 AtCNGC2参与叶片钙分布机理的探究第53-63页
        2.7.2 高钙环境下cngc2-1总钙含量低于Col-0第63-69页
        2.7.3 高钙诱导cngc2-1叶片活性氧的积累和细胞的死亡第69-70页
        2.7.4 CNGC主要表达在小叶脉周围区域第70-71页
        2.7.5 cngc2-1在高钙浓度下影响了光合作用暗反应中淀粉的消耗第71-73页
        2.7.6 cngc2-1韧皮部运输功能正常第73-74页
        2.7.7 cngc2-1在低钙浓度下具有HR反应第74-75页
        2.7.8 cngc2-1在高钙浓度下积累更多cAMP第75-76页
    2.8 讨论和结论第76-79页
第三章 拟南芥根中短肽受体AtPEPR2介导短肽AtPEP1诱导细胞质Ca~(2+)浓度升高,进而抑制Glutamin Dumper基因表达第79-99页
    3.1 引言第79-80页
    3.2 实验材料第80页
    3.3 实验方法第80-84页
        3.3.1 MS培养基的配置第80页
        3.3.2 植物材料的培养第80页
        3.3.3 GUS染色方法第80-81页
        3.3.4 根细胞质内钙离子的测定方法第81页
        3.3.5 转录组芯片实验和数据分析第81-82页
        3.3.6 植物RNA的提取第82-83页
        3.3.7 RNA反转录成cDNA第83页
        3.3.8 实时定量PCR第83页
        3.3.9 定量引物列表第83-84页
    3.4 实验结果第84-96页
        3.4.1 拟南芥atpepr突变体有短根表型第84-85页
        3.4.2 AtPEPR2部分介导了AtPeps引起的根细胞质中钙浓度的升高第85-86页
        3.4.3 atpepr突变体短根表型与钙浓度无关第86-87页
        3.4.4 AtPep1诱导根中转录组变化大部分依赖于AtPEPR2第87-91页
        3.4.5 AtPEPR2参与AtPep1调控的谷氨酰胺外排基因下调第91-93页
        3.4.6 AtPep1抑制AtGDU3启动子活性依赖于细胞外钙浓度第93-94页
        3.4.7 过量表达AtGDU3拟南芥的根对AtPepl的生长表型第94-96页
    3.5 讨论与结论第96-99页
参考文献第99-108页
致谢第108-109页
攻读博士学位期间发表的学术论文目录第109页

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