摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
英文缩写表 | 第14-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-35页 |
1.1 钙在植物体内的重要性 | 第15-20页 |
1.1.1 钙是植物必需的营养物质 | 第15-17页 |
1.1.2 钙是植物体内重要的第二信使 | 第17-20页 |
1.2 植物体内钙的储存部位 | 第20-22页 |
1.2.1 储存在植物质外体中的钙 | 第20-21页 |
1.2.2 储存在植物细胞器中的钙 | 第21-22页 |
1.3 参与钙流动的转运蛋白 | 第22-25页 |
1.3.1 参与钙流出细胞质的转运蛋白 | 第22-23页 |
1.3.2 参与钙进入细胞质的转运蛋白 | 第23-25页 |
1.4 CNGC通道蛋白研究进展 | 第25-32页 |
1.4.1 拟南芥CNGC家族成员及结构 | 第25-27页 |
1.4.2 环化核苷酸cNMP简介 | 第27-28页 |
1.4.3 CNGC家族成员的研究进展 | 第28-32页 |
1.5 拟南芥叶脉发育模式 | 第32页 |
1.6 水母发光蛋白检测细胞内钙的理论方法 | 第32-33页 |
1.7 研究目的和意义 | 第33-35页 |
第二章 CNGC2介导拟南芥叶片Ca~(2+)的分布 | 第35-79页 |
2.1 引言 | 第35页 |
2.2 材料 | 第35-36页 |
2.2.1 实验材料 | 第35页 |
2.2.2 菌种与质粒 | 第35页 |
2.2.3 实验试剂 | 第35-36页 |
2.3 实验仪器 | 第36-37页 |
2.4 实验试剂的配置 | 第37-42页 |
2.5 实验方法 | 第42-51页 |
2.5.1 拟南芥的培养 | 第42-43页 |
2.5.2 植物总钙和总镁含量的提取和测定 | 第43页 |
2.5.3 水溶性钙、果胶钙和草酸钙的提取和测定 | 第43页 |
2.5.4 细胞质内钙离子的测定方法 | 第43-44页 |
2.5.5 DAB染色过程 | 第44页 |
2.5.6 Trypan blue染色过程 | 第44页 |
2.5.7 GUS染色方法 | 第44页 |
2.5.8 CFDA韧皮部运载实验方法 | 第44-45页 |
2.5.9 荧光染料观察细胞外钙的实验方法 | 第45页 |
2.5.10 avrDC3000 avrRPM1~+注射叶片实验 | 第45页 |
2.5.11 离子渗透率测定 | 第45-46页 |
2.5.12 淀粉染色过程 | 第46页 |
2.5.13 拟南芥叶片中cAMP的提取和测定 | 第46页 |
2.5.14 常用分子生物学实验方法 | 第46-50页 |
2.5.15 拟南芥转基因植株的筛选 | 第50-51页 |
2.6 引物列表 | 第51-53页 |
2.7 实验结果与分析 | 第53-76页 |
2.7.1 AtCNGC2参与叶片钙分布机理的探究 | 第53-63页 |
2.7.2 高钙环境下cngc2-1总钙含量低于Col-0 | 第63-69页 |
2.7.3 高钙诱导cngc2-1叶片活性氧的积累和细胞的死亡 | 第69-70页 |
2.7.4 CNGC主要表达在小叶脉周围区域 | 第70-71页 |
2.7.5 cngc2-1在高钙浓度下影响了光合作用暗反应中淀粉的消耗 | 第71-73页 |
2.7.6 cngc2-1韧皮部运输功能正常 | 第73-74页 |
2.7.7 cngc2-1在低钙浓度下具有HR反应 | 第74-75页 |
2.7.8 cngc2-1在高钙浓度下积累更多cAMP | 第75-76页 |
2.8 讨论和结论 | 第76-79页 |
第三章 拟南芥根中短肽受体AtPEPR2介导短肽AtPEP1诱导细胞质Ca~(2+)浓度升高,进而抑制Glutamin Dumper基因表达 | 第79-99页 |
3.1 引言 | 第79-80页 |
3.2 实验材料 | 第80页 |
3.3 实验方法 | 第80-84页 |
3.3.1 MS培养基的配置 | 第80页 |
3.3.2 植物材料的培养 | 第80页 |
3.3.3 GUS染色方法 | 第80-81页 |
3.3.4 根细胞质内钙离子的测定方法 | 第81页 |
3.3.5 转录组芯片实验和数据分析 | 第81-82页 |
3.3.6 植物RNA的提取 | 第82-83页 |
3.3.7 RNA反转录成cDNA | 第83页 |
3.3.8 实时定量PCR | 第83页 |
3.3.9 定量引物列表 | 第83-84页 |
3.4 实验结果 | 第84-96页 |
3.4.1 拟南芥atpepr突变体有短根表型 | 第84-85页 |
3.4.2 AtPEPR2部分介导了AtPeps引起的根细胞质中钙浓度的升高 | 第85-86页 |
3.4.3 atpepr突变体短根表型与钙浓度无关 | 第86-87页 |
3.4.4 AtPep1诱导根中转录组变化大部分依赖于AtPEPR2 | 第87-91页 |
3.4.5 AtPEPR2参与AtPep1调控的谷氨酰胺外排基因下调 | 第91-93页 |
3.4.6 AtPep1抑制AtGDU3启动子活性依赖于细胞外钙浓度 | 第93-94页 |
3.4.7 过量表达AtGDU3拟南芥的根对AtPepl的生长表型 | 第94-96页 |
3.5 讨论与结论 | 第96-99页 |
参考文献 | 第99-108页 |
致谢 | 第108-109页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第109页 |