| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-27页 |
| ·概述 | 第15页 |
| ·微孢子虫的生物学特征 | 第15-22页 |
| ·微孢子虫的基本生物学特征 | 第15-18页 |
| ·微孢子虫的分类地位 | 第18页 |
| ·微孢子虫的侵染与生活史 | 第18-22页 |
| ·Ricin B-lectin概述 | 第22-27页 |
| ·凝集素——Lectin | 第22-23页 |
| ·蓖麻毒素(ricin)与Ricin B-lectin | 第23-27页 |
| 第二章 引言 | 第27-31页 |
| ·研究背景 | 第27页 |
| ·研究目的意义 | 第27-28页 |
| ·主要研究内容 | 第28页 |
| ·技术路线 | 第28-31页 |
| 第三章 家蚕微孢子虫ricin B-lectin家族的序列分析 | 第31-41页 |
| ·材料与方法 | 第31页 |
| ·数据来源 | 第31页 |
| ·分析软件及工具 | 第31页 |
| ·序列分析方法 | 第31-32页 |
| ·序列分析方法 | 第31-32页 |
| ·序列分析 | 第32页 |
| ·聚类及系统发生分析 | 第32页 |
| ·氨基酸序列位点分析 | 第32页 |
| ·进化分析 | 第32页 |
| ·结果与分析 | 第32-39页 |
| ·家蚕微孢子虫ricin B-lectin基因的鉴定 | 第32-33页 |
| ·家蚕微孢子虫ricin B-lectin家族的序列分析 | 第33-35页 |
| ·聚类及系统发生分析 | 第35页 |
| ·氨基酸序列位点分析 | 第35页 |
| ·Ricin B-lectin基因在其他几种微孢子虫的分布 | 第35-37页 |
| ·进化分析 | 第37-39页 |
| ·结论与讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 家蚕微孢子虫nbrtb649基因的克隆表达及多克隆抗体的制备 | 第41-69页 |
| ·实验材料 | 第41-47页 |
| ·家蚕微孢子虫分离株系 | 第41页 |
| ·实验动物 | 第41页 |
| ·载体及菌株 | 第41-42页 |
| ·主要仪器设备 | 第42页 |
| ·主要试剂及配方 | 第42-47页 |
| ·实验方法 | 第47-58页 |
| ·基因及其编码蛋白质的序列分析 | 第47页 |
| ·家蚕微孢子虫感染家蚕中肠组织Total RNA的提取及反转录 | 第47-49页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第49页 |
| ·家蚕微孢子虫基因组的提取 | 第49页 |
| ·T克隆 | 第49-52页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第52-53页 |
| ·原核诱导表达 | 第53页 |
| ·SDS-PAGE检测重组蛋白的表达情况 | 第53-55页 |
| ·蛋白质表达形式的检测 | 第55页 |
| ·目的蛋白包涵体的提取和纯化 | 第55-56页 |
| ·Bradford法测定目的蛋白浓度 | 第56页 |
| ·免疫小鼠及制备抗体 | 第56-57页 |
| ·间接ELISA试验检测抗体效价 | 第57页 |
| ·玻璃珠破碎法提取家蚕微孢子虫总蛋白 | 第57页 |
| ·免疫印迹实验(Western blotting) | 第57-58页 |
| ·结果与分析 | 第58-66页 |
| ·基因及其编码蛋白的序列分析 | 第58-59页 |
| ·Nbrtb649基因在不同感染时期的转录活性分析 | 第59-60页 |
| ·家蚕微孢子虫基因组DNA的提取 | 第60页 |
| ·家蚕微孢子虫nbrtb649基因的克隆与重组表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·目的蛋白的诱导表达及表达形式的检测 | 第61-63页 |
| ·目的蛋白包涵体的溶解及纯化 | 第63-64页 |
| ·目的蛋白浓度的测定 | 第64-65页 |
| ·多克隆抗体的制备及多抗血清的效价测定 | 第65页 |
| ·免疫印迹实验检测NBRTB649蛋白在成熟孢子中的表达情况 | 第65-66页 |
| ·结论与讨论 | 第66-69页 |
| 第五章 家蚕微孢子虫NBRTB649蛋白的亚细胞定位研究 | 第69-75页 |
| ·材料与试剂 | 第69-70页 |
| ·实验材料 | 第69页 |
| ·主要仪器 | 第69页 |
| ·主要试剂及配方 | 第69-70页 |
| ·实验方法 | 第70-71页 |
| ·处理玻片 | 第70页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFAT) | 第70页 |
| ·免疫电镜定位 | 第70-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-73页 |
| ·间接免疫荧光试验检测NBRTB649在成熟孢子中的表达和分布 | 第71-73页 |
| ·NBRTB649在成熟孢子中的亚细胞定位研究 | 第73页 |
| ·结论与讨论 | 第73-75页 |
| 第六章 综合与结论 | 第75-77页 |
| 论文创新点 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 在校期间发表的论文和参加的研究课题 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
