| 摘要 | 第1-14页 |
| Abstract | 第14-18页 |
| Part Ⅰ:Literature Review | 第18-64页 |
| CHAPTER 1:Toxoplasma gondii & Toxoplasmosis Infection | 第18-36页 |
| 1. Historical Background | 第18页 |
| 2. Classification of T. gondii | 第18-19页 |
| 3. Morphology | 第19-22页 |
| ·Tachyzoites Stage | 第20页 |
| ·Bradyzoites Stage & Tissue Cysts | 第20-21页 |
| ·Enteroepithelial Stage | 第21页 |
| ·Oocysts Stage | 第21-22页 |
| 4. T. gondii Life Cycle & Toxoplasmosis | 第22-24页 |
| 5. T. gondii Pathogenesis | 第24页 |
| 6. Immunity Components against T. gondii | 第24-31页 |
| ·Immune Response to T. gondii | 第24-26页 |
| ·T.gondii Antigens & Genetics | 第26-27页 |
| ·Presentation of T. gondii Antigens to T Cells | 第27-30页 |
| ·Protective Cytokines against T. gondii | 第30-31页 |
| ·Humoral Immunity against T. gondii | 第31页 |
| 7. Toxoplasmosis Infection Control Strategies | 第31-36页 |
| ·Chemotherapeutics | 第31-32页 |
| ·Vaccination against Toxoplasmosis | 第32-36页 |
| ·Live & Attenuated T. gondii Vaccines | 第32-33页 |
| ·DNA Vaccines | 第33-36页 |
| CHAPTER 2:T. gondii Antioxidant & Metabolic Enzymes | 第36-40页 |
| 1. Antioxidant System | 第36页 |
| 2. Glycolytic System | 第36-37页 |
| 3. Application of Antioxidant & Glycolytic Enzymes as Vaccines | 第37-40页 |
| Reference | 第40-64页 |
| Part Ⅱ: Research Work | 第64-252页 |
| CHAPTER 3:Cloning & Sequence Analysis of T. gondii Deoxyribose Phosphate Aldolase(TgDPA) | 第64-92页 |
| Abstract | 第64-65页 |
| 1. Introduction | 第65-66页 |
| 2. Materials & Methods | 第66-79页 |
| ·Vectors,Bacterial Strains & Reagents | 第66-67页 |
| ·Special Equipments | 第67页 |
| ·Animals | 第67页 |
| ·Parasites | 第67页 |
| ·Generation of cDNA | 第67-70页 |
| ·Total RNA Extraction | 第67-68页 |
| ·Construction of cDNA & Amplification of TgDPA DNA Fragment | 第68-70页 |
| ·Cloning of TgDPA into T-vector | 第70-74页 |
| ·DH5α Transformation with pMD-18T/TgDPA | 第71页 |
| ·Selection of Positive Clones,Plasmid Extraction & Identificaton | 第71-73页 |
| ·Identification of the Recombinant Plasmid pMD-18T/TgDPA | 第73-74页 |
| ·Construction of Prokaryotic Expression Plasmid pET28a/TgDPA | 第74-76页 |
| ·Transformation of BL_(21)(DE3)with Recombinant pET28a/TgDPA | 第75页 |
| ·Identification of the Recombinant Plasmid pET28a/TgDPA | 第75-76页 |
| ·Expression of Recombinant TgDPA Protein | 第76页 |
| ·Purification of Recombinant TgDPA | 第76-77页 |
| ·Development of Polyclonal IgG against rTgDPA | 第77-78页 |
| ·Sequence Analysis of Cloned TgDPA | 第78-79页 |
| 3. Results | 第79-86页 |
| ·cDNA Synthesis & PCR Amplification of TgDPA | 第79页 |
| ·Identification of Recombinant pMD-18T/TgDPA | 第79-80页 |
| ·Identitication of Recombinant pET28a/TgDPA | 第80-81页 |
| ·Expression of Recombinant TgDPA Protein | 第81页 |
| ·Purified TgDPA Recombinant Protein | 第81-82页 |
| ·Western Blot Analysis of rTgDPA | 第82-83页 |
| ·The Antigenic Structure of TgDPA | 第83-86页 |
| 4. Discussion | 第86-88页 |
| References | 第88-91页 |
| 摘要 | 第91-92页 |
| CHAPTER 4:Immunization of Mice with TgDPA DNA Vaccine against T. gondii Infection | 第92-126页 |
| Abstract | 第92-93页 |
| 1. Introduction | 第93-94页 |
| 2. Materials & Methods | 第94-100页 |
| ·Vectors & Bacterial Strains | 第94页 |
| ·Chemicals & Reagents | 第94-95页 |
| ·Special Equipments | 第95页 |
| ·Animals & Parasites | 第95-96页 |
| ·Construction of TgDPA DNA Vaccine | 第96-97页 |
| ·Translation of TgDPA DNA Vaccine in vivo | 第96-97页 |
| ·Mice Immunization & Challeuge | 第97-98页 |
| ·Collection of Blood Samples | 第98页 |
| ·Determination of Serum Immunoglobulins with ELISA | 第98页 |
| ·Determination of Serum Cytokines with ELISA | 第98-99页 |
| ·Flow cytometry Analysis of T cell Subsets & MHC Molecules | 第99页 |
| ·Statistical Analysis | 第99-100页 |
| 3. Results | 第100-112页 |
| ·Identification of Recombinant pVAX1/TgDPA | 第100页 |
| ·Translation(in vivo) of TgDPA DNA Vaccine in Mice Muscle Tissue | 第100-101页 |
| ·Immunoglobulins Responses to pTgDPA DNA Immunization | 第101-103页 |
| ·Cytokines Production Assay | 第103-105页 |
| ·CD4~+ and CD8~+ T Lymphocytes Subsets Changes | 第105-108页 |
| ·MHC Molecules Changes | 第108-110页 |
| ·Protection of Vaccinated Mice against Challenge with T. gondii RH Strain | 第110-112页 |
| 4. Discussion | 第112-117页 |
| References | 第117-125页 |
| 摘要 | 第125-126页 |
| CHAPTER 5:Cloning & Sequence Analysis of T. gondii Malate Dehydrogenase (TgMDH) | 第126-142页 |
| Abstract | 第126-127页 |
| 1. Introduction | 第127-128页 |
| 2. Materials & Methods | 第128页 |
| 3. Results | 第128-135页 |
| ·cDNA synthesis & PCR Amplification of TgMDH | 第128-129页 |
| ·Identification of Recombinant pMD-18T/TggMDH | 第129页 |
| ·Identification of Recombinant pET28a/TgMDH | 第129-130页 |
| ·Expression of Recombinant TgMDH Protein | 第130-131页 |
| ·Purified TgMDH Recombinant Protein | 第131页 |
| ·Western Blot Analysis of rTgMDH | 第131-132页 |
| ·The Antigenic Structure of TgMDH | 第132-135页 |
| 4. Discussion | 第135-137页 |
| References | 第137-140页 |
| 摘要 | 第140-142页 |
| CHAPTER 6:Immunization of Mice with TgMDH DNA Vaccine against T. gondii Infection | 第142-164页 |
| Abstract | 第142-143页 |
| 1. Introduction | 第143-144页 |
| 2. Materials & Methods | 第144页 |
| 3. Results | 第144-156页 |
| ·Identification of Recombinant pVAX1/TgMDH | 第144页 |
| ·Translation(in vivo) of TgMDNA Vaccine in Mice Muscle Tissue | 第144-145页 |
| ·Immunoglobulins Response to pTgMDH DNA Vaccine | 第145-147页 |
| ·Cytokines Production Assay | 第147-149页 |
| ·CD4~+ and CD8~+ T Lymphocytes Subsets Changes | 第149-152页 |
| ·MHC Molecules Changes | 第152-154页 |
| ·Protection of Vaccinated Mice against Challenge with T. gondii RH Strain | 第154-156页 |
| 4. Discussion | 第156-159页 |
| References | 第159-163页 |
| 摘要 | 第163-164页 |
| CHAPTER 7:Cloning & Sequence Analysis of T. gondii Glutathione Reductase (TgGR) | 第164-180页 |
| Abstract | 第164-165页 |
| 1. Introduction | 第165-166页 |
| 2. Materials & Methods | 第166页 |
| 3. Results | 第166-173页 |
| ·cDNA synthesis & PCR Amplification of TgGR | 第166-167页 |
| ·Identification of Recombinant pMD-18T/TgGR | 第167-168页 |
| ·Identification of Recombinant pET28a/TgGR | 第168页 |
| ·Expression of Recombinant TgGR Protein | 第168-169页 |
| ·Purified TgGR Recombinant Protein | 第169-170页 |
| ·Western Blot Analysis of rTgGR | 第170页 |
| ·The Antigenic Structure of TgGR | 第170-173页 |
| 4. Discussion | 第173-175页 |
| References | 第175-178页 |
| 摘要 | 第178-180页 |
| CHAPTER 8:Immunization of Mice with TgGR DNA Vaccine against T. gondii infection | 第180-208页 |
| Abstract | 第180-181页 |
| 1. Introduction | 第181-182页 |
| 2. Materials & Methods | 第182页 |
| 3. Results | 第182-194页 |
| ·Identification of Recombinant pVAX1/TgGR | 第182-183页 |
| ·Translation(in vivo)of TgGR DNA Vaccine in Mice Muscle Tissue | 第183页 |
| ·Immunoglobulins response to pTgGR DNA Vaccine | 第183-185页 |
| ·Cytokines Production Assay | 第185-187页 |
| ·CD4~+ and CD3~+ T Lymphocytes Subsets Changes | 第187-190页 |
| ·MHC Molecules Changes | 第190-192页 |
| ·Protection of Vaccinated Mice against Challenge with T. gondii RH Strain | 第192-194页 |
| 4. Discussion | 第194-198页 |
| References | 第198-206页 |
| 摘要 | 第206-208页 |
| CHAPTER 9:Cloning & Sequence Analysis of T. gondii Glutathione-S Transferase(TgGST) | 第208-224页 |
| Abstract | 第208-209页 |
| 1. Introduction | 第209-210页 |
| 2. Materials & Methods | 第210页 |
| 3. Results | 第210-217页 |
| ·cDNA Synthesis & PCR Amplification of TgGST | 第210-211页 |
| ·Identification of Recombinant pMD-18T/TgGST | 第211-212页 |
| ·Identification of Recombinant pET28a/TgGST | 第212页 |
| ·Expression of Recombinant TgGST Protein | 第212-213页 |
| ·Purified TgGST Recombinant Protein | 第213-214页 |
| ·Western Blot Analysis of rTgGST | 第214页 |
| ·The Antigenic Structure of TgGST | 第214-217页 |
| 4. Discussion | 第217-219页 |
| References | 第219-222页 |
| 摘要 | 第222-224页 |
| CHAPTER 10:Immuization of Mice with TgGST DNA Vaccine against T. gondii Infection | 第224-252页 |
| Abstract | 第224-225页 |
| 1. Introduction | 第225页 |
| 2. Materials & Methods | 第225-226页 |
| 3. Results | 第226-238页 |
| ·Identification of Recombinant pVAX I/TgGST | 第226页 |
| ·Translation(in vivo)of TgGST DNA Vaccine in Mice Muscle Tissue | 第226-227页 |
| ·Immunoglobulins response to pTgGST DNA Vaccine | 第227-229页 |
| ·Cytokines Production Assay | 第229-231页 |
| ·CD4~+ and CD8~+ T Lymphocytes Subsets Changes | 第231-234页 |
| ·MHC Molecules Changes | 第234-236页 |
| ·Protectiou of Vaccinated M-ce against Challenge with T.gondii RH Strain | 第236-238页 |
| 4. Discussion | 第238-243页 |
| References | 第243-250页 |
| 摘要 | 第250-252页 |
| 附件 | 第252-254页 |
| Acknowledgements | 第254页 |
