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犬瘟热病毒SH株的分离鉴定及其感染性克隆的构建

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第一章 犬瘟热病毒的研究进展第12-20页
   ·前言第12页
   ·犬瘟热历史第12-13页
   ·犬瘟热病毒的流行病学和发病机理第13-14页
   ·病毒的入侵和释放第14页
   ·核糖核蛋白复合体RNP的形成第14-15页
   ·病毒粒子的转录第15-16页
   ·基因组的复制第16页
   ·麻疹病毒属病毒基因组第16-18页
     ·核衣壳蛋白N第16-17页
     ·磷蛋白P第17页
     ·半胱氨酸蛋白V及C蛋白开放阅读框第17页
     ·基质蛋白M第17页
     ·融合蛋白F第17-18页
     ·血凝素蛋白H第18页
     ·大蛋白L第18页
   ·犬瘟热感染性克隆的研究第18-20页
第二章 犬瘟热病毒的分离鉴定第20-27页
   ·材料第20页
     ·主要试剂第20页
     ·病料与细胞第20页
   ·方法第20-23页
     ·病料处理第20页
     ·细胞培养第20-21页
     ·病毒的分离培养第21页
     ·病毒的鉴定第21-23页
   ·结果第23-26页
     ·试纸条快速检测结果第23页
     ·病毒分离结果第23-24页
     ·RT-PCR鉴定结果第24页
     ·病毒形态观察第24-25页
     ·病毒TCID50的测定第25-26页
   ·讨论第26页
   ·结论第26-27页
第三章 犬瘟热病毒全基因组序列及H基因的序列分析第27-39页
   ·材料第27页
   ·方法第27-30页
     ·引物设计合成第27-29页
     ·RNA抽提及RT-PCR扩增第29页
     ·目的基因的克隆和测序第29页
     ·序列拼接第29页
     ·序列结果分析第29-30页
   ·结果第30-37页
     ·不同基因组片段RT-PCR扩增结果第30-31页
     ·H基因克隆初步鉴定结果第31页
     ·基因测序结果分析第31-34页
     ·基因遗传进化分析第34-37页
     ·H基因的序列糖基化位点分析第37页
   ·讨论第37-38页
   ·小结第38-39页
第四章 犬瘟热病毒SH株N基因原核表达及多克隆抗体制备第39-46页
   ·材料第39页
     ·菌株与质粒第39页
     ·主要试剂第39页
   ·方法第39-41页
     ·CDV N基因的扩增第39-40页
     ·重组表达质粒的构建与鉴定第40页
     ·CDV N基因的诱导表达第40页
     ·CDV N融合蛋白的纯化与定量第40-41页
     ·兔抗CDV N多克隆抗体的制备第41页
     ·Western blot检测多克隆抗体特异性第41页
     ·间接免疫荧光试验(IFA)第41页
   ·结果第41-44页
     ·目的基因的扩增重组表达质粒的鉴定第41-42页
     ·CDV N蛋白表达第42-43页
     ·表达产物的纯化与定量第43页
     ·间接免疫荧光试验(IFA)第43-44页
     ·重组蛋白pET-32a-N多抗的鉴定第44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-46页
第五章 犬瘟热病毒CDV-SH株感染性克隆的构建第46-51页
   ·材料第46-47页
     ·病毒株、细胞与质粒第46页
     ·主要试剂第46-47页
   ·方法第47-48页
     ·引物合成与设计第47页
     ·CDV-SH感染性克隆及辅助质粒的构建第47-48页
     ·CDV-SH野毒株全长cDNA感染性克隆初步鉴定第48页
   ·结果第48-49页
     ·CDV-SH野毒株全长cDNA感染性克隆及辅助质粒的构建第48-49页
     ·间接免疫荧光检测第49页
   ·讨论第49-50页
   ·结论第50-51页
结论第51-52页
参考文献第52-58页
英文缩略表第58-59页
致谢第59-60页
作者简介第60页

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