摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 犬瘟热病毒的研究进展 | 第12-20页 |
·前言 | 第12页 |
·犬瘟热历史 | 第12-13页 |
·犬瘟热病毒的流行病学和发病机理 | 第13-14页 |
·病毒的入侵和释放 | 第14页 |
·核糖核蛋白复合体RNP的形成 | 第14-15页 |
·病毒粒子的转录 | 第15-16页 |
·基因组的复制 | 第16页 |
·麻疹病毒属病毒基因组 | 第16-18页 |
·核衣壳蛋白N | 第16-17页 |
·磷蛋白P | 第17页 |
·半胱氨酸蛋白V及C蛋白开放阅读框 | 第17页 |
·基质蛋白M | 第17页 |
·融合蛋白F | 第17-18页 |
·血凝素蛋白H | 第18页 |
·大蛋白L | 第18页 |
·犬瘟热感染性克隆的研究 | 第18-20页 |
第二章 犬瘟热病毒的分离鉴定 | 第20-27页 |
·材料 | 第20页 |
·主要试剂 | 第20页 |
·病料与细胞 | 第20页 |
·方法 | 第20-23页 |
·病料处理 | 第20页 |
·细胞培养 | 第20-21页 |
·病毒的分离培养 | 第21页 |
·病毒的鉴定 | 第21-23页 |
·结果 | 第23-26页 |
·试纸条快速检测结果 | 第23页 |
·病毒分离结果 | 第23-24页 |
·RT-PCR鉴定结果 | 第24页 |
·病毒形态观察 | 第24-25页 |
·病毒TCID50的测定 | 第25-26页 |
·讨论 | 第26页 |
·结论 | 第26-27页 |
第三章 犬瘟热病毒全基因组序列及H基因的序列分析 | 第27-39页 |
·材料 | 第27页 |
·方法 | 第27-30页 |
·引物设计合成 | 第27-29页 |
·RNA抽提及RT-PCR扩增 | 第29页 |
·目的基因的克隆和测序 | 第29页 |
·序列拼接 | 第29页 |
·序列结果分析 | 第29-30页 |
·结果 | 第30-37页 |
·不同基因组片段RT-PCR扩增结果 | 第30-31页 |
·H基因克隆初步鉴定结果 | 第31页 |
·基因测序结果分析 | 第31-34页 |
·基因遗传进化分析 | 第34-37页 |
·H基因的序列糖基化位点分析 | 第37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第四章 犬瘟热病毒SH株N基因原核表达及多克隆抗体制备 | 第39-46页 |
·材料 | 第39页 |
·菌株与质粒 | 第39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·方法 | 第39-41页 |
·CDV N基因的扩增 | 第39-40页 |
·重组表达质粒的构建与鉴定 | 第40页 |
·CDV N基因的诱导表达 | 第40页 |
·CDV N融合蛋白的纯化与定量 | 第40-41页 |
·兔抗CDV N多克隆抗体的制备 | 第41页 |
·Western blot检测多克隆抗体特异性 | 第41页 |
·间接免疫荧光试验(IFA) | 第41页 |
·结果 | 第41-44页 |
·目的基因的扩增重组表达质粒的鉴定 | 第41-42页 |
·CDV N蛋白表达 | 第42-43页 |
·表达产物的纯化与定量 | 第43页 |
·间接免疫荧光试验(IFA) | 第43-44页 |
·重组蛋白pET-32a-N多抗的鉴定 | 第44页 |
·讨论 | 第44-45页 |
·小结 | 第45-46页 |
第五章 犬瘟热病毒CDV-SH株感染性克隆的构建 | 第46-51页 |
·材料 | 第46-47页 |
·病毒株、细胞与质粒 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46-47页 |
·方法 | 第47-48页 |
·引物合成与设计 | 第47页 |
·CDV-SH感染性克隆及辅助质粒的构建 | 第47-48页 |
·CDV-SH野毒株全长cDNA感染性克隆初步鉴定 | 第48页 |
·结果 | 第48-49页 |
·CDV-SH野毒株全长cDNA感染性克隆及辅助质粒的构建 | 第48-49页 |
·间接免疫荧光检测 | 第49页 |
·讨论 | 第49-50页 |
·结论 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
英文缩略表 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-60页 |
作者简介 | 第60页 |