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青稞查尔酮异构酶基因的克隆及原核表达分析

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
主要缩略符号对照表第8-12页
1 文献综述第12-22页
   ·青稞概述第12页
   ·黄酮概述第12-17页
     ·植物自身生理功能第15页
     ·清除自由基及抗氧化作用第15-16页
     ·抗癌抗肿瘤的作用第16页
     ·抗抑郁作用第16-17页
     ·其他功能第17页
   ·CHI基因概述第17-21页
     ·CHI基因的发现第18-19页
     ·CHI基因的结构与类型第19-20页
     ·CHI基因的表达调控第20页
     ·CHI基因的转基因应用第20-21页
   ·目的与意义第21-22页
2 材料和方法第22-38页
   ·实验材料第22-24页
     ·实验植物材料第22页
     ·实验主要仪器和试剂第22页
     ·实验菌株和载体第22-23页
     ·实验试剂溶液的配制第23-24页
   ·青稞CHI基因CDS区的克隆第24-29页
     ·总RNA提取第24-25页
     ·反转录:cDNA第一链的合成第25-26页
     ·引物设计第26页
     ·PCR扩增第26-27页
     ·目的片段回收和纯化第27-28页
     ·目的片段与载体的连接第28-29页
     ·阳性克隆鉴定及测序第29页
   ·生物信息学分析第29-31页
     ·HvCHI蛋白的理化性质与等电点预测第29页
     ·HvCHI蛋白的亲水性预测第29-30页
     ·HvCHI蛋白的二级结构预测第30页
     ·HvCHI基因CDS区密码子的偏倚性分析第30页
     ·HvCHI蛋白的跨膜预测第30页
     ·HvCHI蛋白的糖基化位点及磷酸化位点预测第30页
     ·HvCHI蛋白的信号肽预测第30-31页
     ·HvCHI蛋白的二硫键、亚细胞定位及稀有密码子预测第31页
     ·HvCHI蛋白的三级结构第31页
   ·HvCHI基因的原核表达第31-38页
     ·酶切引物的设计第31页
     ·PCR扩增及回收第31-32页
     ·HvCHI基因与T载体的连接第32页
     ·HvCHI基因的转化与鉴定第32页
     ·构建原核表达载体第32-35页
     ·重组蛋白的表达第35-36页
     ·SDS-PAGE电泳第36-37页
     ·融合蛋白初步纯化第37-38页
3 结果与分析第38-57页
   ·RNA的检测第38页
   ·HvCHI基因的PCR扩增第38-40页
   ·HvCHI基因的原核表达第40-42页
   ·SDS-PAGE分析第42-44页
   ·生物信息学分析第44-57页
     ·核苷酸序列分析第44-45页
     ·序列分析及进化树的构建第45-48页
     ·HvCHI蛋白的理化性质分析与等电点预测第48-49页
     ·HvCHI蛋白的亲水性预测第49-50页
     ·HvCHI蛋白的二级结构预测第50-51页
     ·HvCHI基因CDS区密码子的偏倚性分析第51页
     ·HvCHI蛋白的跨膜预测第51-52页
     ·HvCHI蛋白的糖基化及磷酸化位点预测第52-53页
     ·信号肽预测第53-54页
     ·二硫键、亚细胞定位及稀有密码子预测第54-55页
     ·结构域预测第55页
     ·HvCHI蛋白的三级结构第55-57页
4 讨论第57-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-70页
致谢第70-71页
攻读硕士期间发表的论文第71页

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