摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
主要缩略符号对照表 | 第8-12页 |
1 文献综述 | 第12-22页 |
·青稞概述 | 第12页 |
·黄酮概述 | 第12-17页 |
·植物自身生理功能 | 第15页 |
·清除自由基及抗氧化作用 | 第15-16页 |
·抗癌抗肿瘤的作用 | 第16页 |
·抗抑郁作用 | 第16-17页 |
·其他功能 | 第17页 |
·CHI基因概述 | 第17-21页 |
·CHI基因的发现 | 第18-19页 |
·CHI基因的结构与类型 | 第19-20页 |
·CHI基因的表达调控 | 第20页 |
·CHI基因的转基因应用 | 第20-21页 |
·目的与意义 | 第21-22页 |
2 材料和方法 | 第22-38页 |
·实验材料 | 第22-24页 |
·实验植物材料 | 第22页 |
·实验主要仪器和试剂 | 第22页 |
·实验菌株和载体 | 第22-23页 |
·实验试剂溶液的配制 | 第23-24页 |
·青稞CHI基因CDS区的克隆 | 第24-29页 |
·总RNA提取 | 第24-25页 |
·反转录:cDNA第一链的合成 | 第25-26页 |
·引物设计 | 第26页 |
·PCR扩增 | 第26-27页 |
·目的片段回收和纯化 | 第27-28页 |
·目的片段与载体的连接 | 第28-29页 |
·阳性克隆鉴定及测序 | 第29页 |
·生物信息学分析 | 第29-31页 |
·HvCHI蛋白的理化性质与等电点预测 | 第29页 |
·HvCHI蛋白的亲水性预测 | 第29-30页 |
·HvCHI蛋白的二级结构预测 | 第30页 |
·HvCHI基因CDS区密码子的偏倚性分析 | 第30页 |
·HvCHI蛋白的跨膜预测 | 第30页 |
·HvCHI蛋白的糖基化位点及磷酸化位点预测 | 第30页 |
·HvCHI蛋白的信号肽预测 | 第30-31页 |
·HvCHI蛋白的二硫键、亚细胞定位及稀有密码子预测 | 第31页 |
·HvCHI蛋白的三级结构 | 第31页 |
·HvCHI基因的原核表达 | 第31-38页 |
·酶切引物的设计 | 第31页 |
·PCR扩增及回收 | 第31-32页 |
·HvCHI基因与T载体的连接 | 第32页 |
·HvCHI基因的转化与鉴定 | 第32页 |
·构建原核表达载体 | 第32-35页 |
·重组蛋白的表达 | 第35-36页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第36-37页 |
·融合蛋白初步纯化 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-57页 |
·RNA的检测 | 第38页 |
·HvCHI基因的PCR扩增 | 第38-40页 |
·HvCHI基因的原核表达 | 第40-42页 |
·SDS-PAGE分析 | 第42-44页 |
·生物信息学分析 | 第44-57页 |
·核苷酸序列分析 | 第44-45页 |
·序列分析及进化树的构建 | 第45-48页 |
·HvCHI蛋白的理化性质分析与等电点预测 | 第48-49页 |
·HvCHI蛋白的亲水性预测 | 第49-50页 |
·HvCHI蛋白的二级结构预测 | 第50-51页 |
·HvCHI基因CDS区密码子的偏倚性分析 | 第51页 |
·HvCHI蛋白的跨膜预测 | 第51-52页 |
·HvCHI蛋白的糖基化及磷酸化位点预测 | 第52-53页 |
·信号肽预测 | 第53-54页 |
·二硫键、亚细胞定位及稀有密码子预测 | 第54-55页 |
·结构域预测 | 第55页 |
·HvCHI蛋白的三级结构 | 第55-57页 |
4 讨论 | 第57-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第71页 |