中文摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
英文缩写词汇及其含义说明 | 第6-9页 |
第一部分 序言 | 第9-14页 |
1 RA研究概况 | 第9页 |
2 RagB基因的研究进展 | 第9-13页 |
3 研究的目的和意义 | 第13-14页 |
第二部分 试验内容 | 第14-43页 |
1 材料 | 第14-17页 |
·菌株、菌种、质粒 | 第14页 |
·试剂 | 第14页 |
·主要溶液的配制 | 第14-16页 |
·培养基的配制 | 第14-15页 |
·DNA提取相关试剂的配制 | 第15页 |
·核酸电泳相关试剂的配制 | 第15页 |
·抗生素及其培养基的配制 | 第15页 |
·SDS-PAGE相关试剂的配制 | 第15-16页 |
·Western blot相关试剂的配制 | 第16页 |
·主要仪器设备 | 第16-17页 |
2 方法 | 第17-23页 |
·鸭疫里默氏菌ragB基因的生物信息学分析 | 第17-18页 |
·RAragB基因的核苷酸序列分析 | 第17页 |
·RAragB基因的密码子偏爱性分析 | 第17-18页 |
·RARagB蛋白质的组分分析 | 第18页 |
·RA ragB基因原核表达 | 第18-23页 |
·RAragB基因扩增 | 第18-19页 |
·重组T克隆质粒pMD19-T-ragB的构建及鉴定 | 第19-20页 |
·原核表达质粒pET-32a-ragB的构建和鉴定 | 第20-21页 |
·重组表达质粒pET-32a-ragB表达菌的诱导表达及条件优化 | 第21-22页 |
·表达蛋白的Western-blot鉴定 | 第22-23页 |
3 结果 | 第23-40页 |
·鸭疫里默氏菌ragB基因的生物信息学分析 | 第23-36页 |
·RA ragB核苷酸序列分析 | 第23页 |
·RA ragB基因的密码子偏爱性分析 | 第23-30页 |
·RA RagB蛋白质的组分分析 | 第30-31页 |
·信号肽切割位点和跨膜区预测 | 第31页 |
·抗原性和疏水性分析 | 第31-33页 |
·功能位点预测 | 第33-34页 |
·蛋白质亚细胞定位分析 | 第34页 |
·二级结构预测与密码子氨基酸序列保守结构域预测 | 第34-36页 |
·RA ragB基因的克隆表达及Western blot检测 | 第36-40页 |
·RA ragB基因的扩增 | 第36页 |
·重组T克隆质粒pMD19-T-ragB的构建及鉴定 | 第36页 |
·原核表达质粒pET-32a-ragB的构建和鉴定 | 第36-37页 |
·RagB重组蛋白的诱导表达 | 第37-39页 |
·RagB重组蛋白的Western blot检测 | 第39-40页 |
4 讨论 | 第40-43页 |
·鸭疫里默氏菌ragB基因的生物信息学分析 | 第40-41页 |
·RA RagB基因的原核表达和Western blot检测 | 第41-43页 |
小结 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
附录 作者简介及攻读硕士学位期间论文发表 | 第50页 |