| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 目录 | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-22页 |
| ·研究背景 | 第12页 |
| ·研究进展 | 第12-20页 |
| ·葡萄抗寒性研究进展 | 第12-15页 |
| ·WRKY转录因子研究进展 | 第15-20页 |
| ·WRKY转录因子家族发现 | 第15-16页 |
| ·WRKY转录因子家族的主要特点 | 第16-17页 |
| ·WRKY家族的起源与进化 | 第17页 |
| ·WRKY转录因子家族的生物学功能 | 第17-20页 |
| ·研究目的及意义 | 第20-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-38页 |
| ·研究材料 | 第22页 |
| ·研究方法 | 第22-38页 |
| ·葡萄WRKY家族信息的获得 | 第23页 |
| ·葡萄WRKY家族进化分析 | 第23-24页 |
| ·模板合成 | 第24-26页 |
| ·总RNA的提取 | 第24-25页 |
| ·DNA消化 | 第25页 |
| ·cDNA的合成 | 第25-26页 |
| ·组织特异性表达检测 | 第26-28页 |
| ·葡萄WRKY对冷胁迫及ABA处理的响应 | 第28页 |
| ·公共基因芯片平台数据分析 | 第28-29页 |
| ·抗寒相关候选WRKY基因克隆 | 第29-33页 |
| ·相关引物设计 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR扩增获得ORF区 | 第30页 |
| ·PCR胶回收 | 第30-31页 |
| ·目的片段与T载体连接 | 第31页 |
| ·热激转化大肠杆菌DH5α | 第31-32页 |
| ·质粒提取 | 第32-33页 |
| ·表达载体构建 | 第33-34页 |
| ·农杆菌介导法转化拟南芥 | 第34-35页 |
| ·表型鉴定 | 第35-38页 |
| 3 结果 | 第38-58页 |
| ·葡萄WRKY转录因子成员 | 第38-42页 |
| ·葡萄WRKY家族成员类别 | 第42-43页 |
| ·葡萄VvWRKY组织特异性分析 | 第43-44页 |
| ·公共基因芯片平台数据中VvWRKY在多种胁迫中的表达状况分析 | 第44-46页 |
| ·WRKY基因在冷处理葡萄中表达模式 | 第46-48页 |
| ·外源施加ABA葡萄中WRKY基因的表达模式 | 第48-50页 |
| ·筛选抗寒性相关候选WRKY | 第50-51页 |
| ·抗寒相关候选WRKY全长克隆 | 第51-55页 |
| ·ORF区扩增 | 第51-52页 |
| ·基因序列分析 | 第52页 |
| ·蛋白质预测与分析 | 第52-55页 |
| ·基因表达分析 | 第55-56页 |
| ·表达载体构建及转基因拟南芥阳性植株筛选 | 第56-57页 |
| ·转基因植株表型分析 | 第57-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| ·葡萄WRKY家族 | 第58-59页 |
| ·WRKY基因可能参与葡萄发育及多种胁迫信号调控途径 | 第59-60页 |
| ·WRKY基因与葡萄冷胁迫响应关系 | 第60-62页 |
| 5 总结与展望 | 第62-64页 |
| 参考文献 | 第64-74页 |
| 附录 | 第74-81页 |
| 作者简历及在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第81页 |