| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一部分 引言 | 第11-33页 |
| 一、 SOX 家族基因的功能及其研究进展 | 第11-15页 |
| （一） SOX 家族成员结构特点 | 第11-13页 |
| （二） SOX 家族基因的转录调控方式 | 第13-14页 |
| （三） SOX 家族基因在癌症进程中的作用 | 第14-15页 |
| 二、 SOX4 基因的研究进展 | 第15-18页 |
| （一） SOX4 结构和功能 | 第15-16页 |
| （二） SOX4 与肿瘤关系的研究进展 | 第16-18页 |
| 三、 上皮-间质转换（EMT）的概念和分类 | 第18-20页 |
| （一） EMT 的概念 | 第18页 |
| （二） EMT 的分类 | 第18-20页 |
| 四、 EMT 的激活机制 | 第20-28页 |
| （一） 转录因子与 EMT | 第20-22页 |
| （二） EMT 相关的信号通路 | 第22-28页 |
| 五、 EMT 和癌症干细胞 | 第28-30页 |
| 六、 EMT 和三阴性乳腺癌 | 第30-31页 |
| 七、 本论文研究的内容与意义 | 第31-33页 |
| （一） 立题依据 | 第31页 |
| （二） 本文研究内容和意义 | 第31-33页 |
| 第二部分 实验材料与方法 | 第33-52页 |
| 一、 实验材料 | 第33-34页 |
| （一） 质粒 | 第33页 |
| （二） 蛋白质和抗体 | 第33-34页 |
| （三） 哺乳动物细胞系 | 第34页 |
| （四） 组织样本 | 第34页 |
| （五） 裸鼠 | 第34页 |
| （六） 试剂 | 第34页 |
| 二、 实验方法 | 第34-52页 |
| I、分子生物学实验方法 | 第34-41页 |
| （一） 分子克隆 | 第34-35页 |
| （二） DNA 琼脂糖凝胶电泳 | 第35页 |
| （三） 质粒大量制备的方法 | 第35-36页 |
| （四） 哺乳动物细胞总 RNA 的提取和反转录 | 第36-37页 |
| （五） PCR 和荧光实时定量（Real-time）PCR | 第37-41页 |
| （六） 慢病毒干涉质粒的构建 | 第41页 |
| Ⅱ、细胞生物学实验方法 | 第41-49页 |
| （一） 哺乳动物细胞系的培养 | 第41-42页 |
| （二） 脂质体转染 | 第42页 |
| （三） 逆病毒包装和感染 | 第42-43页 |
| （四） 慢病毒包装和感染 | 第43页 |
| （五） MTT 法检测细胞增殖能力 | 第43-44页 |
| （六） Western Blotting 检测 | 第44-46页 |
| （七） 免疫荧光检测 | 第46-47页 |
| （八） 流式细胞术检测细胞表面抗原 | 第47页 |
| （九） 乳腺球形成检测 | 第47-48页 |
| （十） 荧光素酶报告基因检测 | 第48页 |
| （十一）Transwell 迁移和侵袭检测 | 第48-49页 |
| Ⅲ、组织样本和体内实验 | 第49-51页 |
| （一） 免疫组化 | 第49-50页 |
| （二） 裸鼠异位移植实验 | 第50-51页 |
| Ⅳ、统计分析 | 第51-52页 |
| 第三部分 实验结果与分析 | 第52-75页 |
| 一、 SOX4 基因诱导细胞发生 EMT | 第52-61页 |
| （一） 外源过表达 SOX4 诱导人乳腺上皮细胞发生 EMT | 第52-56页 |
| （二） 外源过表达 Sox4 诱导犬肾细胞 MDCK 细胞发生 EMT | 第56-58页 |
| （三） SOX4 不能直接抑制 E-cadherin 的表达 | 第58-60页 |
| （四） SOX4 的沉默抑制了侵袭性型乳腺癌细胞的迁移 | 第60-61页 |
| 二、 SOX4 诱导的 EMT 能够形成具有干细胞特性的细胞 | 第61-63页 |
| 三、 SOX4 和癌基因 Ras 协同促进肿瘤生成 | 第63-66页 |
| （一） SOX4 单独不能诱导体内肿瘤生成 | 第63页 |
| （二） SOX4 和癌基因 Ras 协同促进完全的 EMT | 第63-64页 |
| （三） SOX4 和癌基因 Ras 协同促进细胞的迁移和侵袭能力 | 第64-65页 |
| （四） SOX4 和癌基因 Ras 协同促进细胞的肿瘤生成能力 | 第65-66页 |
| 四、 SOX4 的高表达和三阴性乳腺癌正相关 | 第66-70页 |
| （一） SOX4 的在正常乳腺组织和乳腺癌样本中的表达情况 | 第66-67页 |
| （二） SOX4 的高表达和侵袭性的人乳腺癌亚型相关 | 第67-69页 |
| （三） SOX4 的高表达和高度恶性的三阴性乳腺癌正相关 | 第69-70页 |
| 五、 TGF-β信号通路对于 SOX4 诱导的 EMT 影响 | 第70-72页 |
| （一） SOX4 诱导的 EMT 激活经典的 TGF-β/Smad 通路 | 第70-71页 |
| （二） TGF-β信号的激活通路对于 SOX4 诱导的细胞迁移是必需的 | 第71-72页 |
| 六、 SOX4 对于 TGF-β诱导的 EMT 是必需的 | 第72-75页 |
| （一） TGF-β诱导的 EMT 上调 SOX4 表达 | 第72-73页 |
| （二） SOX4 的沉默抑制了 TGF-β诱导的 EMT | 第73-75页 |
| 第四部分 讨论 | 第75-81页 |
| 一、 SOX4 是一个新的诱导 EMT 的转录因子 | 第75-76页 |
| 二、 SOX4 间接抑制 E-cadherin 的表达 | 第76页 |
| 三、 SOX4 和 TGF-β信号通路在 EMT 过程中的作用 | 第76-77页 |
| 四、 SOX4 对细胞增殖、迁移和侵袭的影响 | 第77-78页 |
| 五、 SOX4 和干细胞以及肿瘤发生和转移的关系 | 第78-81页 |
| 主要结论和创新点 | 第81-82页 |
| 一、 主要结论 | 第81页 |
| 二、 主要创新点 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-95页 |
| 附录一 | 第95-97页 |
| 附录二 | 第97-103页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 在学期间公开发表论文及著作情况 | 第104页 |
