符号说明 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
·盐胁迫 | 第12-14页 |
·盐胁迫对植物生长发育的影响 | 第12-13页 |
·盐胁迫对植物光合作用的影响 | 第13页 |
·植物对盐胁迫的适应机制 | 第13-14页 |
·干旱胁迫 | 第14-16页 |
·干旱胁迫对植物生长的影响 | 第15页 |
·干旱胁迫对植物生理特性的影响 | 第15-16页 |
·植物的逆境Ca~(2+)信号转导 | 第16-17页 |
·钙信号的产生 | 第16-17页 |
·钙信号的转导在植物对逆境应答反应中的作用 | 第17页 |
·逆境对植物体内氧化还原环境的影响 | 第17-19页 |
·植物抗氧化系统 | 第18页 |
·逆境胁迫下植物细胞氧化还原状态的改变 | 第18-19页 |
·Annexin 1 蛋白 | 第19-21页 |
·Annexins家族 | 第19页 |
·Annexin 1 蛋白在植物逆境下的表达调控 | 第19-20页 |
·Annexin 1 的过氧化物酶活性和植物抗逆过程中的功能 | 第20-21页 |
·VKOR蛋白 | 第21-23页 |
·VKOR蛋白的发现 | 第21-22页 |
·VKOR蛋白的同源蛋白 | 第22页 |
·VKOR蛋白的氧化功能 | 第22-23页 |
·本研究的目的意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-41页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·植物材料 | 第24页 |
·菌株与质粒 | 第24页 |
·酶与各种生化试剂 | 第24页 |
·主要实验仪器 | 第24-25页 |
·引物 | 第25页 |
·主要试剂的配制 | 第25-28页 |
·实验相关溶液的配制 | 第25-27页 |
·碱裂解法提取质粒相关溶液的配制 | 第25-26页 |
·蛋白含量测定相关溶液的配制 | 第26页 |
·SDS-PAGE缓冲液的配制 | 第26-27页 |
·感受态制备相关试剂的配制 | 第27页 |
·MS培养基贮存液的配制 | 第27页 |
·培养基的配制 | 第27-28页 |
·实验方法 | 第28-41页 |
·AnnAT1 基因的扩增 | 第28-29页 |
·引物设计 | 第28页 |
·AnnAT1 基因的PCR扩增 | 第28-29页 |
·AnnAT1 基因PCR扩增产物的回收 | 第29页 |
·原核表达载体的构建 | 第29-31页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第31-32页 |
·感受态大肠杆菌DHB4 的制备 | 第31-32页 |
·连接产物的转化 | 第32页 |
·阳性克隆的筛选和DNA序列测定 | 第32-34页 |
·AnnAT1 在原核系统的诱导表达、纯化和抗体制备 | 第34-37页 |
·E.coli BL21 原核表达的诱导 | 第34页 |
·原核表达AnnAT1 的纯化 | 第34-35页 |
·Annexin 1 抗体的制备 | 第35-37页 |
·拟南芥总RNA的提取和mRNA的检测 | 第37-38页 |
·Trizol法提取拟南芥总RNA | 第37页 |
·mRNA的qRT-PCR检测 | 第37-38页 |
·拟南芥类囊体总蛋白的提取和Western Bloting的检测 | 第38-39页 |
·拟南芥类囊体总蛋白的提取和蛋白含量测定 | 第38页 |
·Western Bloting的检测 | 第38-39页 |
·拟南芥负氧离子和过氧化氢积累量的测定 | 第39-41页 |
3 结果与分析 | 第41-51页 |
·AnnAT1 基因的克隆、表达和抗体制备 | 第41-44页 |
·AnnAT1 基因的PCR扩增 | 第41页 |
·AnnAT1 基因原核表达载体的构建和鉴定 | 第41-43页 |
·Annexin 1 的蛋白的纯化 | 第43页 |
·Annexin 1 抗体制备以及效价测定 | 第43-44页 |
·AnnAT1 的表达在原核系统逆境胁迫过程中的作用 | 第44-46页 |
·逆境中拟南芥VKOR对Annexin 1 的mRNA和蛋白水平的表达的影响 | 第46-49页 |
·逆境中拟南芥VKOR对Annexin 1 的mRNA水平的表达的影响 | 第46-48页 |
·逆境中拟南芥VKOR对Annexin 1 的蛋白水平的表达的影响 | 第48-49页 |
·VKOR缺失对拟南芥逆境胁迫过程中负氧离子和过氧化氢积累的影响 | 第49-51页 |
·负氧离子积累量测定 | 第49-50页 |
·过氧化氢积累量测定 | 第50-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
·Annexin 1 在植物逆境胁迫中的作用 | 第51页 |
·VKOR对Annexin 1 的表达的影响 | 第51-52页 |
·Annexin 1 的抗氧化功能 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
致谢 | 第62页 |