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花生过敏重组乳酸菌口服疫苗的制备及其效果的评价

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 前言第9-17页
   ·花生过敏第9-13页
     ·花生过敏简介第9-10页
     ·花生过敏原及其研究进展第10-11页
     ·食物过敏的防治第11-13页
   ·益生菌第13-15页
     ·益生菌简介第13页
     ·益生菌的功能第13-14页
     ·益生菌对花生过敏的防治作用第14-15页
     ·益生菌用作口服疫苗第15页
   ·课题研究意义和内容第15-17页
     ·本课题研究意义第15-16页
     ·主要研究内容第16-17页
第二章 Lactobacillus casei Zhang 对花生过敏的影响第17-29页
   ·实验材料第17-19页
     ·菌株第17页
     ·培养基与培养条件第17页
     ·实验动物第17页
     ·主要试剂及试剂盒第17-18页
     ·主要仪器与设备第18页
     ·溶液的配制第18-19页
   ·实验方法第19-22页
     ·花生粗蛋白(CPE)的提取第19页
     ·CPE 的 SDS-PAGE 电泳分析及蛋白浓度测定第19页
     ·菌株的培养第19-20页
     ·动物实验第20页
     ·花生过敏反应各项指标的检测第20-22页
     ·数据处理第22页
   ·结果与讨论第22-28页
     ·花生粗蛋白的蛋白浓度及组分第22页
     ·花生过敏症状的评分第22-23页
     ·L. casei Zhang 对小鼠血清总 IgE 抗体的影响第23-24页
     ·小鼠血清中特异性抗体的检测第24-25页
     ·小鼠血清中 MCP-1 含量和粪便中组胺含量的检测第25-26页
     ·L. casei Zhang 对小鼠粪便中总 IgA 抗体的影响第26-27页
     ·体外细胞因子的检测第27-28页
   ·本章小结第28-29页
第三章 Ara h 2.02 在大肠杆菌中的表达、纯化及多克隆抗体的制备第29-41页
   ·实验材料第29-31页
     ·菌株与质粒第29页
     ·培养基与培养条件第29页
     ·工具酶与试剂第29-30页
     ·主要仪器与设备第30页
     ·溶液的配制第30页
     ·PCR 引物第30-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·Ara h 2.02 蛋白的信号肽预测第31页
     ·Ara h 2.02 基因的密码子优化与合成第31页
     ·大肠杆菌表达载体 pET-nh2 的构建第31-33页
     ·Ara h 2.02 蛋白在大肠杆菌 BL21(DE3)中的表达及纯化第33-34页
     ·重组蛋白制备多克隆抗体第34页
   ·结果与讨论第34-40页
     ·Ara h 2.02 蛋白的信号肽预测第34-35页
     ·Ara h 2.02 基因的密码子优化第35-36页
     ·大肠杆菌表达载体 pET-nh2 的构建第36-38页
     ·Ara h 2.02 蛋白在大肠杆菌 BL21(DE3)中的诱导表达第38-39页
     ·Ara h 2.02 蛋白的纯化及多克隆抗体的效价第39-40页
   ·本章小结第40-41页
第四章 Ara h 2.02 在乳酸乳球菌中的表达及花生过敏重组乳酸菌口服疫苗的研究第41-60页
   ·实验材料第41-43页
     ·菌株与质粒第41页
     ·培养基与培养条件第41-42页
     ·工具酶与试剂第42页
     ·实验动物第42页
     ·主要仪器与设备第42页
     ·主要溶液的配制第42-43页
     ·PCR 引物第43页
   ·实验方法第43-49页
     ·低过敏原性 mAra h 2.02 基因的制备第43-45页
     ·乳酸乳球菌表达载体 pNZ-nh2 及 pNZ-mh2 的构建第45-46页
     ·重组蛋白在乳酸乳球菌中的诱导表达及 Western blot 检测分析第46-47页
     ·花生粗蛋白(CPE)的提取及鉴定第47页
     ·灌胃用重组菌的制备第47-48页
     ·动物实验第48页
     ·花生过敏反应各项指标的检测第48-49页
     ·数据处理第49页
   ·结果与讨论第49-58页
     ·低过敏原性 mAra h 2.02 基因的获得第49-51页
     ·乳酸乳球菌表达载体 pNZ-nh2 及 pNZ-mh2 的构建第51-52页
     ·重组菌 L. lactis NZNH 和 L. lactis NZMH 中表达蛋白的鉴定第52-53页
     ·花生过敏症状的评分第53-54页
     ·重组乳酸菌对小鼠血清总 IgE 抗体的影响第54-55页
     ·小鼠血清中特异性抗体的检测第55-56页
     ·小鼠血清中 MCP-1 含量和粪便中组胺含量的检测第56-57页
     ·重组乳酸菌对小鼠粪便中总 IgA 抗体的影响第57页
     ·体外细胞因子的检测第57-58页
   ·本章小结第58-60页
主要结论第60-61页
存在的问题与展望第61-62页
致谢第62-63页
参考文献第63-69页
附录第69页

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