目录 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-9页 |
縮写说明 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1、引言 | 第10-11页 |
2、逆境条件对小麦生产的影响 | 第11-14页 |
·干旱对小麦生产的影响 | 第11-12页 |
·高盐碱对小麦生产的影响 | 第12-13页 |
·温度变化对小麦生产的影响 | 第13页 |
·病害对小麦生产的影响 | 第13-14页 |
3、小麦遗传转化的主要方法 | 第14-17页 |
·基因枪介导法 | 第15-16页 |
·农杆菌介导法 | 第16-17页 |
·其它转化法 | 第17页 |
4、拟南芥NPR1基因 | 第17-18页 |
5、其它抗逆基因 | 第18-20页 |
6、本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
第二章 基因枪及农杆菌介导AtNPR1转化小麦 | 第21-33页 |
1 实验材料 | 第21-23页 |
·受体材料 | 第21-22页 |
·转化载体及菌种 | 第22页 |
·化学试剂及药品 | 第22页 |
·培养基 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-29页 |
·基因枪法 | 第23-26页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
·质粒载体转化大肠杆菌 | 第24页 |
·质粒DNA的提取 | 第24页 |
·诱导幼胚愈伤形成 | 第24-25页 |
·微弹制备、包被 | 第25页 |
·基因枪轰击 | 第25-26页 |
·筛选及植株再生 | 第26页 |
·农杆菌介导法 | 第26-27页 |
·农杆菌感受态细胞的制备 | 第26页 |
·质粒转化农杆菌 | 第26页 |
·农杆菌介导法转化小麦幼胚 | 第26-27页 |
·取材及灭菌 | 第26页 |
·剥取小麦幼胚、诱导愈伤 | 第26-27页 |
·农杆菌菌液制备 | 第27页 |
·农杆菌侵染小麦幼胚愈伤 | 第27页 |
·组织培养筛选、分化获得再生植株 | 第27页 |
·转基因植株的检测 | 第27-29页 |
·再生植株基因组DNA的提取 | 第27-28页 |
·再生植株的PCR检测 | 第28-29页 |
3、结果与分析 | 第29-31页 |
·再生植株的获得 | 第29-30页 |
·基因枪法获得再生植株 | 第29页 |
·农杆菌介导法获得再生植株 | 第29-30页 |
·转AtNPR1基因植株的PCR检测 | 第30-31页 |
4、讨论 | 第31-33页 |
第三章 转AtNPR1基因植株T1代抗赤霉病菌的鉴定 | 第33-40页 |
1、实验材料 | 第33-34页 |
·植物材料 | 第33-34页 |
·菌种 | 第34页 |
2、实验方法 | 第34-36页 |
·菌种活化及菌液获得 | 第34页 |
·T1代植株的获得 | 第34-35页 |
·室内苗期 | 第34页 |
·田间初花期 | 第34-35页 |
·室内苗期接种 | 第35页 |
·苗期病情调查 | 第35页 |
·T1代植株的PCR检测 | 第35页 |
·田间单花滴注接种 | 第35-36页 |
3、结果与分析 | 第36-38页 |
·苗期抗性鉴定 | 第36-37页 |
·PCR检测 | 第37页 |
·单花滴注接种鉴定 | 第37-38页 |
4、讨论 | 第38-40页 |
第四章 转AtNPR1基因植株T1代的抗逆性生理检测 | 第40-47页 |
1、实验材料 | 第40页 |
2、试验方法 | 第40-43页 |
·超氧化物歧化酶(SOD)活性测定(NBT法) | 第40-42页 |
·脯氨酸(Pro)含量的测定(茚三酮法) | 第42-43页 |
3、结果与分析 | 第43-45页 |
·禾谷镰刀菌菌液侵染前后植株体内SOD活性变化 | 第43-44页 |
·禾谷镰刀菌菌液侵染前后植株体内Pro含量变化 | 第44-45页 |
4、讨论 | 第45-47页 |
第五章 农杆菌介导相关抗逆基因的转化 | 第47-53页 |
1 实验材料 | 第47-48页 |
·受体材料 | 第47页 |
·转化载体及菌种 | 第47-48页 |
·化学试剂及药品 | 第48页 |
·培养基 | 第48页 |
2 实验方法 | 第48-50页 |
·农杆菌介导法转化小麦成熟胚 | 第48页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第48-50页 |
3、结果与分析 | 第50-52页 |
·再生植株的获得 | 第50页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第50-52页 |
4、讨论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
致谢 | 第59-60页 |