| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| ·研究背景 | 第12页 |
| ·甘露聚糖酶来源及国内外研究进展 | 第12-14页 |
| ·甘露聚糖酶来源 | 第12-13页 |
| ·β-甘露聚糖酶的酶学性质 | 第13-14页 |
| ·国内外的研究进展 | 第14页 |
| ·β-甘露聚糖酶基因克隆及表达 | 第14-15页 |
| ·β-甘露聚糖酶的应用研究 | 第15-17页 |
| ·β-甘露聚糖酶在饲料工业中的应用 | 第15-16页 |
| ·β-甘露聚糖酶在食品工业中的应用 | 第16页 |
| ·β-甘露聚糖酶在其它工业中的应用 | 第16-17页 |
| ·毕赤酵母表达系统简介 | 第17-23页 |
| ·毕赤酵母表达系统的特点 | 第17页 |
| ·毕赤酵母常用菌株类型 | 第17-18页 |
| ·毕赤酵母菌株的生长 | 第18页 |
| ·毕赤酵母表达系统的优点 | 第18-19页 |
| ·启动子 | 第19页 |
| ·信号肽序列 | 第19-20页 |
| ·载体 | 第20-21页 |
| ·目的基因整合到酵母基因组 | 第21-22页 |
| ·提高毕赤酵母中的外源蛋白表达 | 第22-23页 |
| ·研究内容 | 第23-26页 |
| 第二章 β-甘露聚糖酶产生菌的分离与鉴定 | 第26-40页 |
| ·引言 | 第26页 |
| ·实验材料与设备 | 第26-28页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26-27页 |
| ·仪器设备 | 第27-28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-32页 |
| ·产β-甘露聚糖酶菌株筛选 | 第28-29页 |
| ·菌落培养特征 | 第29页 |
| ·菌体形态特征 | 第29页 |
| ·运动性实验 | 第29页 |
| ·生理生化实验 | 第29-30页 |
| ·细菌培养方法 | 第30页 |
| ·16S rRNA 鉴定 | 第30-32页 |
| ·甘露聚糖酶酶活测定 | 第32页 |
| ·结果分析 | 第32-39页 |
| ·产β-甘露聚糖酶菌株筛选 | 第32-35页 |
| ·菌体形态特征 | 第35-36页 |
| ·运动性实验 | 第36页 |
| ·生理生化实验 | 第36页 |
| ·16S rRNA 鉴定 | 第36-39页 |
| ·本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 β-甘露聚糖酶基因克隆及其在毕赤酵母中的表达 | 第40-58页 |
| ·引言 | 第40-41页 |
| ·实验材料与设备 | 第41-43页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·仪器设备 | 第42-43页 |
| ·培养基 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-48页 |
| ·β-甘露聚糖酶基因克隆 | 第43-44页 |
| ·β-甘露聚糖酶基因表达载体构建 | 第44-45页 |
| ·毕赤酵母重组表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·重组毕赤酵母的平板筛选和 PCR 鉴定 | 第46-47页 |
| ·重组毕赤酵母的诱导表达和 SDS-PAGE 电泳分析 | 第47-48页 |
| ·结果分析 | 第48-55页 |
| ·β-甘露聚糖酶基因的克隆与分析 | 第48-52页 |
| ·重组毕赤酵母的筛选和 PCR 鉴定 | 第52-55页 |
| ·重组毕赤酵母的诱导表达和 SDS-PAGE 电泳分析 | 第55页 |
| ·本章小结 | 第55-58页 |
| 第四章 毕赤酵母工程菌发酵条件优化 | 第58-70页 |
| ·引言 | 第58页 |
| ·实验材料与设备 | 第58-60页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·试剂 | 第58-59页 |
| ·仪器设备 | 第59页 |
| ·培养基 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60-63页 |
| ·工程菌稳定性检测 | 第60页 |
| ·摇瓶发酵条件 | 第60-61页 |
| ·重组毕赤酵母生长曲线 | 第61页 |
| ·接种量对工程菌产酶的影响 | 第61页 |
| ·最佳诱导时间的确定 | 第61页 |
| ·甲醇浓度对蛋白表达的影响 | 第61页 |
| ·碳源最适浓度确定 | 第61-62页 |
| ·氮源最适浓度确定 | 第62页 |
| ·正交试验 | 第62页 |
| ·发酵液中氨态氮的测定 | 第62页 |
| ·重组酶的酶学性质测定 | 第62-63页 |
| ·结果分析 | 第63-68页 |
| ·重组毕赤酵母稳定性检测 | 第63页 |
| ·重组毕赤酵母生长曲线 | 第63-64页 |
| ·接种量对重组菌产酶的影响 | 第64页 |
| ·诱导时间对重组酶酶活的影响 | 第64页 |
| ·甲醇浓度对重组菌产酶的影响 | 第64-65页 |
| ·正交试验结果及验证试验 | 第65-66页 |
| ·发酵液中氨态氮的测定 | 第66-67页 |
| ·重组酶的酶学性质测定 | 第67-68页 |
| ·本章小结 | 第68-70页 |
| 第五章 总结与展望 | 第70-72页 |
| ·总结 | 第70-71页 |
| ·展望 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-76页 |
| 附录 | 第76-84页 |
| 致谢 | 第84-86页 |
| 在学期间主要研究成果 | 第86页 |
