| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| Abbreviation | 第11-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-29页 |
| ·链霉菌生物学研究的背景 | 第13页 |
| ·生物学的时代特征 | 第13页 |
| ·链霉菌研究的时代机遇与挑战 | 第13页 |
| ·链霉菌概述 | 第13-28页 |
| ·链霉菌的一般特征 | 第13-15页 |
| ·链霉菌的发育分化 | 第15-16页 |
| ·链霉菌的次级代谢 | 第16-17页 |
| ·链霉菌的次级代谢调控 | 第17-26页 |
| ·链霉菌与合成生物学 | 第26-27页 |
| ·链霉菌合成生物学调控元件和宿主 | 第27-28页 |
| ·课题的总体方案及技术路线 | 第28-29页 |
| 第2章 链霉菌组成型启动子的构建 | 第29-53页 |
| ·引言 | 第29-30页 |
| ·实验材料 | 第30-37页 |
| ·菌株 | 第30页 |
| ·质粒 | 第30-32页 |
| ·引物 | 第32-34页 |
| ·培养基 | 第34-36页 |
| ·缓冲液及抗生素 | 第36-37页 |
| ·工具酶与化学试剂 | 第37页 |
| ·主要实验器材 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-44页 |
| ·基本实验方法 | 第37-42页 |
| ·实验方法 | 第42-43页 |
| ·截断 kasOp 启动子及最佳活性长度分析 | 第43页 |
| ·工程化的系列 kasOp 衍生启动子体内体外受调控情况分析 | 第43页 |
| ·kasOp3 的 OA 位点随机突变库的构建及筛选 | 第43页 |
| ·启动子在链霉菌中活性验证 | 第43页 |
| ·启动子在链霉菌系统中活性分析 | 第43-44页 |
| ·结果 | 第44-52页 |
| ·kasO 启动子在大肠杆菌背景下的时序分析 | 第44页 |
| ·对看家 Sigma 因子 HrdB 的诱导表达能够增强 kasOp 的活性 | 第44-45页 |
| ·对 kasOp 的 OB 位点的去除和确定其最佳活性长度 | 第45-46页 |
| ·对 kasOp3 进行体内体外外分析 | 第46-47页 |
| ·对 kasOp3 的 OA 位点进行随机突变及筛选 | 第47-49页 |
| ·对 kasOp*在天蓝色链霉菌中进行验证 | 第49页 |
| ·对 kasOp*、SF14 和 ermEp*在不同链霉菌中进行强度分析 | 第49-51页 |
| ·对 kasOp*、SF14 和 ermEp*在天蓝色链霉菌中进行转录时序分析 | 第51页 |
| ·通过不同启动子过表达 actII-ORF4 分析对 ACT 产量的影响 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| 第3章 多杀菌素生物合成基因簇启动子探测和转录时序分析 | 第53-63页 |
| ·引言 | 第53-54页 |
| ·实验材料 | 第54-57页 |
| ·菌株 | 第54页 |
| ·质粒 | 第54页 |
| ·引物序列及其用途 | 第54-56页 |
| ·培养基及培养条件 | 第56-57页 |
| ·实验方法 | 第57-58页 |
| ·质粒构建 | 第57页 |
| ·抗性梯度比较 | 第57页 |
| ·XylE 显色法对启动子活性的分析比较 | 第57页 |
| ·链霉菌 RNA 的制备 | 第57页 |
| ·多杀菌素的提取 | 第57-58页 |
| ·荧光定量 PCR 分析 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-62页 |
| ·启动子探测质粒的构建 | 第58-59页 |
| ·多杀菌素生物合成基因簇启动子探测 | 第59-60页 |
| ·多杀菌素生物合成相关基因的转录时序分析 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| 全文总结与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第75页 |
