| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-17页 |
| 常用词语缩写 | 第17-20页 |
| 第一章 文献综述 | 第20-47页 |
| ·前言 | 第20页 |
| ·冷应激对动物影响机制的研究进展 | 第20-29页 |
| ·冷应激的概念及其生理反应机制 | 第20-22页 |
| ·冷应激对动物神经内分泌系统的影响 | 第22-25页 |
| ·冷应激对交感神经-肾上腺髓质(SAM)系统的影响 | 第22-23页 |
| ·冷应激对下丘脑-垂体-肾上腺皮质(HPA)轴的影响 | 第23-24页 |
| ·冷应激对下丘脑—垂体—甲状腺(HPT)轴的影响 | 第24-25页 |
| ·冷应激对动物能量代谢的影响 | 第25-26页 |
| ·冷应激对免疫功能的影响 | 第26-27页 |
| ·冷应激的防制 | 第27-29页 |
| ·动物冷应激反应中多种基因调控机制的研究进展 | 第29-33页 |
| ·抗冻蛋白(AFP)基因表达与冷应激 | 第29-31页 |
| ·热休克蛋白(hsp70)基因表达与冷应激 | 第31-32页 |
| ·即刻早期基因c-fos表达与冷应激 | 第32页 |
| ·诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)基因表达与冷应激 | 第32-33页 |
| ·热休克蛋白70调控机制的研究进展 | 第33-39页 |
| ·HSP70的组成和分子生物学特性 | 第33-34页 |
| ·HSP70的基因调控 | 第34-37页 |
| ·转录水平的调控 | 第34-36页 |
| ·翻译水平的调控 | 第36-37页 |
| ·HSP70的生物学功能 | 第37-38页 |
| ·HSP70的应用和展望 | 第38-39页 |
| ·实时荧光定量PCR(RQ-PCR)技术 | 第39-45页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的原理 | 第39页 |
| ·实时荧光定量PCR技术中荧光标记方法的分类 | 第39-42页 |
| ·SYBR Green 法 | 第39-40页 |
| ·TaqMan探针法 | 第40-42页 |
| ·分子信标法(Molecular beacon) | 第42页 |
| ·影响实时荧光定量PCR试验结果的因素 | 第42-43页 |
| ·RNA的完整性 | 第42-43页 |
| ·RNA样品中的基因组DNA污染 | 第43页 |
| ·PCR反应体系的优化 | 第43页 |
| ·反转录 | 第43页 |
| ·实时荧光定量PCR的定量方法 | 第43-44页 |
| ·标准曲线法的绝对定量 | 第43页 |
| ·标准曲线法的相对定量 | 第43-44页 |
| ·比较Ct法的相对定量 | 第44页 |
| ·荧光定量PCR技术的应用 | 第44-45页 |
| ·生物信息学研究内容与方法 | 第45-46页 |
| ·生物信息学主要研究内容 | 第45-46页 |
| ·生物信息学研究主要数据库 | 第46页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第46-47页 |
| 第二章 雏鹅冷应激反应中HPA、HPT轴激素含量的测定与分析 | 第47-53页 |
| ·材料与方法 | 第47-49页 |
| ·试验材料 | 第47-48页 |
| ·试验鹅群 | 第47-48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48页 |
| ·试验方法 | 第48-49页 |
| ·样品采集 | 第48页 |
| ·血清制备及激素含量测定 | 第48-49页 |
| ·数据处理 | 第49页 |
| ·结果与分析 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 第三章 冷应激对皖西白鹅某些血相指标变化的影响 | 第53-58页 |
| ·材料与方法 | 第53-54页 |
| ·试验材料 | 第53-54页 |
| ·组织样品 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53-54页 |
| ·试验方法 | 第54页 |
| ·统计分析 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| 第四章 雏鹅冷应激反应中HPA、HPT轴应激激素相关基因表达调控规律的研究 | 第58-80页 |
| ·材料与方法 | 第59-67页 |
| ·试验材料 | 第59-61页 |
| ·主要仪器 | 第59-60页 |
| ·主要试剂 | 第60页 |
| ·主要溶液的配制 | 第60-61页 |
| ·试验方法 | 第61-67页 |
| ·提取RNA前的准备工作 | 第61页 |
| ·总RNA的提取 | 第61-62页 |
| ·RNA质量和浓度测定 | 第62页 |
| ·引物设计 | 第62-63页 |
| ·总RNA纯化 | 第63页 |
| ·RT-PCR扩增 | 第63-64页 |
| ·基因目的片段的克隆测序 | 第64-66页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第66-67页 |
| ·数据处理 | 第67页 |
| ·结果与分析 | 第67-75页 |
| ·RNA提取结果 | 第67-68页 |
| ·目的片段的同源性分析 | 第68-70页 |
| ·扩增产物特异性 | 第70-72页 |
| ·不同冷应激时间内TRH、TSH、CRH、ACTH基因mRNA差异表达规律 | 第72-75页 |
| ·讨论 | 第75-79页 |
| ·实时荧光定量方法 | 第75-76页 |
| ·冷应激对HPA轴的影响 | 第76-77页 |
| ·冷应激对HPT轴的影响 | 第77-79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 第五章 鹅HSP70基因克隆及生物信息学分析 | 第80-104页 |
| ·材料与方法 | 第81-82页 |
| ·试验材料 | 第81页 |
| ·组织样品 | 第81页 |
| ·主要仪器 | 第81页 |
| ·主要试剂 | 第81页 |
| ·主要溶液的配制 | 第81页 |
| ·试验方法 | 第81-82页 |
| ·RNA提取、纯化和R-PCR | 第81页 |
| ·引物设计 | 第81-82页 |
| ·HSP70基因目的片段的克隆测序 | 第82页 |
| ·序列分析 | 第82页 |
| ·结果与分析 | 第82-100页 |
| ·RNA提取结果 | 第82-83页 |
| ·RT-PCR的扩增结果 | 第83页 |
| ·鹅HSP70基因的生物信启、学分析 | 第83-100页 |
| ·HSP70基因核苷酸序列同源性分析 | 第83-90页 |
| ·鹅HSP70基因CDS序列的碱基组成及密码子使用频率 | 第90-93页 |
| ·HSP70蛋白理化性质分析 | 第93页 |
| ·HSP70蛋白结构预测 | 第93-94页 |
| ·HSP70蛋白二级结构的预测 | 第94-96页 |
| ·HSP70蛋白的跨膜螺旋特征 | 第96-98页 |
| ·HSP70蛋白疏水性预测 | 第98页 |
| ·HSP70蛋白憐酸化位点预测 | 第98-99页 |
| ·HSP70蛋白糖基化位点预测 | 第99-100页 |
| ·讨论 | 第100-102页 |
| ·小结 | 第102-104页 |
| 第六章 雏鹅冷应激反应中HPA、HPT轴HSP70mRNA的动态表达规律 | 第104-114页 |
| ·材料与方法 | 第104-107页 |
| ·试验材料 | 第104-105页 |
| ·实验动物的分组 | 第104-105页 |
| ·主要仪器 | 第105页 |
| ·主要试剂 | 第105页 |
| ·试验方法 | 第105-107页 |
| ·样品采集 | 第105页 |
| ·RNA提取、纯化和RT-PCR | 第105页 |
| ·常规PCR对引物进行检测 | 第105页 |
| ·RNA质量和浓度测定 | 第105页 |
| ·引物设计 | 第105-106页 |
| ·实时荧光定量PCR条件的优化 | 第106-107页 |
| ·数据处理 | 第107页 |
| ·结果与分析 | 第107-111页 |
| ·RNA提取结果 | 第107页 |
| ·RT-PCR的扩增结果 | 第107页 |
| ·扩增产物特异性 | 第107-108页 |
| ·不同冷应激时间内HPA、HPT轴HSP70基因mRNA差异表达规律 | 第108-111页 |
| ·讨论 | 第111-113页 |
| ·小结 | 第113-114页 |
| 第七章 全文结论 | 第114-117页 |
| ·主要结论 | 第114-115页 |
| ·研究的创新点 | 第115-116页 |
| ·进一步需要开展的主要研究工作 | 第116-117页 |
| 参考文献 | 第117-133页 |
| 致谢 | 第133-134页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第134-136页 |
