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拟南芥PGABH介导了种子萌发和萌发后生长对ABA的敏感性

中文摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 前言第13-29页
   ·萌发第13-22页
     ·萌发需要的条件第13-15页
       ·萌发需要的外部生态因素第13-14页
         ·水第13页
         ·氧气第13-14页
         ·温度第14页
         ·光照第14页
         ·其他因素第14页
       ·萌发需要的内部生理因素第14-15页
         ·种子成熟度第14页
         ·种子含水量第14页
         ·种子的休眠第14-15页
         ·药害第15页
         ·机械损伤和热伤第15页
     ·植物激素对种子萌发的调节作用第15-18页
       ·脱落酸对种子萌发的调控作用第15-16页
       ·赤霉素对种子萌发的调控作用第16-17页
       ·其它植物激素对种子萌发的调控作用第17-18页
     ·种子萌发的蛋白质组学研究第18-19页
     ·萌发的过程第19-22页
       ·干种子时期第19-20页
       ·吸涨和种皮破裂第20-22页
   ·ABA 的代谢过程、信号传导以及与萌发的关系第22-28页
     ·ABA 的代谢过程第22-25页
       ·ABA 的生物合成第23页
       ·ABA 的分解代谢第23-25页
     ·ABA 的信号转导第25-27页
       ·ABA 的感知第25页
       ·ABA 信号转导途径中的磷酸化和去磷酸化第25-27页
     ·ABA 与萌发的关系第27-28页
   ·本实验的目的意义第28-29页
2 材料与方法第29-44页
   ·实验材料第29页
     ·植物材料第29页
     ·菌株与质粒第29页
     ·酶与各种生化试剂第29页
   ·实验方法第29-44页
     ·RNA 的提取第29-30页
       ·利用 TRIzol 法提取 RNA:第29-30页
       ·利用通用植物总 RNA 提取试剂盒(离心柱型)提取 RNA第30页
     ·RNA 中基因组 DNA 的去除第30-31页
     ·RNA 反转录第31页
     ·拟南芥基因组 DNA 的提取(小量法)第31页
     ·拟南芥 PGABH 序列的扩增第31-32页
     ·凝胶电泳中 DNA 片段的回收第32页
     ·DNA 片段与克隆载体的连接第32-33页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第33页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备第33页
       ·大肠杆菌细胞的转化第33页
     ·克隆载体的酶切鉴定第33-34页
     ·质粒 DNA 的提取第34-35页
       ·碱法小量质粒 DNA 的提取第34页
       ·碱法大量质粒 DNA 的提取第34-35页
     ·表达载体的构建第35页
     ·植物表达载体的转化第35-36页
       ·根癌农杆菌 LBA4404、GV3101 感受态细胞的制备第35页
       ·冻融法转化农杆菌第35-36页
     ·农杆菌的培养第36页
     ·农杆菌介导的拟南芥转化第36页
     ·农杆菌介导的洋葱表皮细胞转化第36-37页
     ·转基因拟南芥 PCR 检测第37-38页
     ·PCR 鉴定突变体纯合植株第38页
     ·qRT-PCR第38-39页
       ·qRT-PCR 引物设计第38页
       ·qRT-PCR 反应条件第38-39页
     ·转基因拟南芥植株 GUS 组织化学染色分析第39页
     ·拟南芥原生质体制备方法第39-40页
     ·植物总蛋白提取第40页
     ·Western Blot 方法第40-43页
       ·蛋白质浓度检测第40-41页
       ·蛋白质凝胶电泳第41页
       ·半干法蛋白转移第41-42页
       ·免疫发光法检测蛋白含量第42-43页
     ·pgabh abi-5 双突变体杂交筛选第43-44页
3 结果与分析第44-54页
   ·萌发期 pgabh 对 ABA 超敏感第44-47页
   ·RNA 干扰株系和超表达株系对 ABA 的敏感性第47-49页
   ·PGABH 在拟南芥中的表达模式分析第49-50页
   ·PGABH 的亚细胞定位分析第50页
   ·PGABH 参与了萌发时期 ABA 介导的信号通路第50-52页
   ·pgabh abi5 双突变体对 ABA 的响应第52页
   ·pgabh 响应渗透胁迫第52-54页
4 讨论第54-56页
5 结论第56-57页
参考文献第57-67页
致谢第67-68页
攻读学位期间发表论文情况第68页

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