| 中文摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-14页 |
| 1 前言 | 第14-27页 |
| ·植物油脂合成的生化过程 | 第14-16页 |
| ·植物油脂简介 | 第14页 |
| ·植物油脂的应用 | 第14-16页 |
| ·植物油脂在食品方面的应用 | 第14页 |
| ·植物油脂在工业方面的应用 | 第14-15页 |
| ·植物油脂在生物柴油上的应用 | 第15-16页 |
| ·植物油脂在植物中生产 EPA/DHA 方面的应用 | 第16页 |
| ·植物油脂面临的问题 | 第16页 |
| ·油料作物基因工程改造的原理 | 第16-20页 |
| ·植物油脂合成的生物化学过程 | 第17-20页 |
| ·油脂合成过程中部分关键酶介绍 | 第20-24页 |
| ·乙酰辅酶 A 羧化酶 | 第21-22页 |
| ·酰基转移酶 | 第22-23页 |
| ·甘油-3-磷酸脱氢酶（GPDH） | 第23-24页 |
| ·长片段基因克隆方法 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第25-27页 |
| 2 材料与方法 | 第27-40页 |
| ·实验材料 | 第27-28页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第27页 |
| ·马铃薯致病疫霉（Phytophthora infestans）及生长条件 | 第27页 |
| ·酿酒酵母 BY4741 及生长条件 | 第27页 |
| ·强壮前沟藻（Amphidinium carterae）及生长条件 | 第27页 |
| ·菌株及质粒 | 第27页 |
| ·酶及生化试剂 | 第27-28页 |
| ·本论文所用引物见附录 | 第28页 |
| ·实验方法 | 第28-40页 |
| ·基因组 DNA 提取（SDS 法） | 第28页 |
| ·总 RNA 的提取（TriZol 法） | 第28-29页 |
| ·RNA 甲醛变性胶电泳检测 | 第29-30页 |
| ·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第30-31页 |
| ·PCR 扩增 | 第31页 |
| ·连接反应（以 pMD18-T simple vector 为例） | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第32页 |
| ·碱法小量提取质粒 DNA | 第32-33页 |
| ·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第33页 |
| ·DNA 片段的回收 | 第33-34页 |
| ·表达载体的构建（包括酵母表达载体和植物表达载体） | 第34页 |
| ·酿酒酵母的转化 | 第34页 |
| ·酿酒酵母的诱导表达及菌体收集 | 第34-35页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第35-36页 |
| ·根癌农杆菌冻融法感受态细胞的制备 | 第35页 |
| ·根癌农杆菌电转化感受态制备 | 第35-36页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第36页 |
| ·电击法转化农杆菌 | 第36页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第36-37页 |
| ·种子处理 | 第36页 |
| ·移栽拟南芥 | 第36-37页 |
| ·拟南芥转化 | 第37页 |
| ·转基因植株分析 | 第37-38页 |
| ·脂肪酸的提取及分析 | 第38页 |
| ·甘油含量的测定 | 第38-40页 |
| ·测定原理 | 第38页 |
| ·方法步骤 | 第38-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-53页 |
| ·马铃薯致病疫霉（Phytophthora infestans）的获得 | 第40页 |
| ·PinGPDH1 基因的克隆 | 第40-41页 |
| ·P.infestans 全长 cDNA 的获得 | 第40页 |
| ·Phytophthora infestans 中 PinGPDH1 基因的 PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·PinGPDH1 基因进化树分析 | 第41-42页 |
| ·酵母中鉴定 PinGPDH1 | 第42-46页 |
| ·酵母表达载体的构建 | 第43页 |
| ·PinGPDH1 活性测定 | 第43-45页 |
| ·组织甘油含量酶法试剂盒使用 | 第43页 |
| ·标准曲线的确定及甘油浓度的确定 | 第43-45页 |
| ·PinGPDH1 耐盐实验 | 第45-46页 |
| ·PinGPDH1 植物中瞬时表达定位 | 第46-47页 |
| ·拟南芥中 PinGPDH1 功能验证 | 第47-49页 |
| ·表达载体构建 | 第47页 |
| ·拟南芥 GPDH 突变体回复突变 | 第47-49页 |
| ·拟南芥突变体纯合体筛选 | 第48-49页 |
| ·早花现象对照 | 第49页 |
| ·Col-0 拟南芥中超表达 pCambia2300napin-PinGPDH1 | 第49页 |
| ·马铃薯致病疫霉中 ACCase 基因的克隆 | 第49-50页 |
| ·强壮前沟藻中 ACCase 和 GPDH 基因的克隆 | 第50-53页 |
| ·甘油-3-磷酸脱氢酶基因的克隆 | 第50-52页 |
| ·乙酰辅酶 A 羧化酶酶基因的克隆 | 第52-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-56页 |
| ·GPDH 基因的研究 | 第53-54页 |
| ·ACCase 基因的研究 | 第54-56页 |
| 5 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-64页 |
| 附录 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第72页 |
