中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-37页 |
·Annexin 分子结构 | 第12-22页 |
·Annexin 与钙离子和脂质结合的结构 | 第12-15页 |
·Annexin 与硫簇和铜离子结合的结构 | 第15-16页 |
·AnnexinN-端与翻译后修饰 | 第16-18页 |
·Annexin 与 C2 结构域相互作用 | 第18-19页 |
·Annexin 作为膜支架 | 第19-21页 |
·Annexin 与膜结构域 | 第21-22页 |
·Annexin 的分布和定位 | 第22-25页 |
·Annexin 的磷酸化调控 | 第25-28页 |
·Annexin 的功能 | 第28-33页 |
·Annexin 的膜动力学研究 | 第28-29页 |
·Annexin 在离子运输过程中的作用 | 第29-30页 |
·参与氧化还原反应和活性氧的调控 | 第30-31页 |
·Annexin 参与细胞分泌活动 | 第31-32页 |
·Annexin 作为 F-actin 结合蛋白 | 第32-33页 |
·Annexin 对环境因子的响应 | 第33-35页 |
·碳水化合物合成的调控 | 第35-36页 |
·本实验的目的意义 | 第36-37页 |
2 材料与方法 | 第37-49页 |
·实验材料 | 第37-39页 |
·植物材料 | 第37页 |
·菌株与质粒 | 第37页 |
·酶与各种生化试剂 | 第37页 |
·实验试剂配方 | 第37-38页 |
·引物 | 第38-39页 |
·实验方法 | 第39-49页 |
·植物基因组的提取与纯化 | 第39页 |
·载体构建 | 第39-43页 |
·PCR 扩增 | 第39-40页 |
·连接反应 | 第40页 |
·大肠杆菌 TOP10 感受态细胞的制备与转化 | 第40-41页 |
·菌落 PCR 检测 | 第41页 |
·质粒提取 | 第41-42页 |
·酶切和回收 | 第42-43页 |
·超表达 pCAMBIA1300-linker-mCherry 表达载体的构建 | 第43页 |
·超表达 35S::AnnAt-mCherry 表达载体的构建 | 第43页 |
·启动子驱动 GUS 报告基因表达载体的构建 | 第43页 |
·农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第43-44页 |
·拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定 | 第44-45页 |
·拟南芥的转化 | 第44页 |
·转基因拟南芥的鉴定 | 第44-45页 |
·PCR 鉴定突变体纯合植株 | 第45页 |
·RNA 的提取纯化和反转录 | 第45-47页 |
·RNA 的提取纯化 | 第45-46页 |
·RNA 的反转录 | 第46-47页 |
·实时定量 PCR | 第47页 |
·转基因植株非生物胁迫处理及 GUS 组织化学染色分析 | 第47-48页 |
·转基因植株非生物胁迫及激素处理 | 第47-48页 |
·GUS 组织化学染色分析 | 第48页 |
·农杆菌介导的烟草瞬时表达 | 第48页 |
·拟南芥杂交 | 第48-49页 |
3 结果与分析 | 第49-73页 |
·拟南芥 Annexin 家族成员的同源性分析 | 第49页 |
·拟南芥 Annexin 基因的时空表达 | 第49-59页 |
·AnnAt2、3、5、6、7 的亚细胞定位 | 第59-66页 |
·AnnAt3 响应非生物胁迫的研究 | 第66-70页 |
·AnnAt3 的表达受盐和氧化胁迫的诱导 | 第66页 |
·非生物胁迫及 ABA 诱导 AnnAt3 的表达变化 | 第66-68页 |
·AnnAt3 超表达转基因植株的表达变化和逆境胁迫下的表型分析 | 第68-70页 |
·AnnAt2、AnnAt3 可能参与调控微丝骨架的动态结构 | 第70-73页 |
·AnnAt2、AnnAt3 可能与 actin 共定位 | 第70页 |
·拟南芥 AnnAt2、AnnAt3 突变体内的微丝结构 | 第70-73页 |
4 讨论 | 第73-78页 |
5 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-94页 |
致谢 | 第94-95页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第95页 |