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绵羊多胎性能候选基因BMPR-IB的研究

致谢第1-9页
中文摘要第9-11页
Abstract第11-13页
第一章 文献综述第13-35页
 1 绵羊高繁殖力机制研究进展第13-21页
     ·多胎绵羊品种第13页
   ·绵羊多胎的生殖生理第13-15页
     ·排卵数第13-14页
     ·内分泌第14-15页
     ·胚胎存活第15页
     ·子宫保持胚胎或胎儿的能力第15页
   ·绵羊多胎主基因研究进展第15-21页
     ·FecB基因第15-17页
     ·FecX基因第17-19页
     ·GDF9基因第19页
     ·Woodland基因第19-20页
     ·Thoka基因第20页
     ·Lacaune基因第20-21页
 2 湖羊研究概况第21-23页
   ·湖羊的起源第21-22页
   ·湖羊的外貌特征和品种特点第22-23页
   ·湖羊多胎性的利用第23页
     ·利用湖羊作为肥羔生产的母本第23页
     ·利用湖羊导入杂交提高单胎绵羊的产羔率第23页
 3 BMPR-IB基因的研究进展第23-27页
   ·骨骼形态发生蛋白受体的种类和结构第23-24页
   ·骨骼形态发生蛋白受体的信号传递机制第24-25页
   ·骨骼形态发生蛋白受体的生物学功能第25-26页
   ·BMPR-IB基因与繁殖性能的关系第26-27页
 4 分子遗传标记在畜禽育种中的应用第27-34页
   ·RFLP标记第28-29页
   ·DNA指纹标记(DNA fingerprint,DFP)第29-30页
   ·RAPD标记第30-31页
   ·微卫星标记第31页
   ·PCR-SSCP标记第31-34页
     ·SSCP的建立与发展第31-32页
     ·PCR-SSCP方法的原理第32页
     ·PCR-SSCP的特点第32-33页
     ·PCR-SSCP方法的应用第33-34页
   ·测序第34页
 5 本研究的目的与意义第34-35页
第二章 绵羊BMPR-IB基因多态性检测的材料与方法第35-49页
 1 实验材料第35-38页
   ·实验绵羊来源及采样方法第35页
   ·试剂第35页
   ·有关试剂和溶液的配制第35-38页
   ·DNA分析软件及数据库第38页
   ·DNA目的片断的序列测定第38页
 2 实验方法第38-49页
   ·羊血液DNA的提取第38-39页
   ·DNA浓度和纯度的检测第39页
     ·DNA浓度和纯度的测定第39页
     ·琼脂糖凝胶电泳检测第39页
   ·BMPR-IB基因PCR-SSCP和PCR-RFLP分析方法的一般程序第39-43页
     ·引物的设计第39-40页
     ·引物溶液的配制第40页
     ·PCR反应体系第40-41页
     ·SSCP检测过程第41-43页
     ·RFLP检测过程第43页
   ·BMPR-IB基因Q249R突变区的纯合子个体的克隆测序第43-47页
     ·目的片段的回收第43-44页
     ·连接反应第44-45页
     ·感受态细胞的制备—氯化钙法第45-46页
     ·转化第46页
     ·质粒DNA的小规模提取—碱裂解法第46-47页
     ·重组质粒的鉴定第47页
   ·统计分析方法第47-49页
     ·群体基因频率和基因型频率的计算第47-48页
     ·绵羊骨骼形态发生蛋白受体基因基因型的独立性检验第48页
     ·绵羊骨骼形态发生蛋白受体基因位点绵羊繁殖力关系的研究第48-49页
第三章 绵羊BMPR-IB基因多态性检测的结果与分析第49-56页
 1 基因组提取结果第49页
 2 BMPR-IB基因的PCR扩增结果第49-50页
 3 BMPR-IB基因的酶切结果第50-51页
   ·湖羊BMPR-IB基因的酶切结果第50页
   ·夏洛来羊和特克塞尔羊BMPR-IB基因的酶切结果第50-51页
   ·夏湖杂交羊BMPR-IB基因的酶切结果第51页
 4 BMPR-IB基因的SSCP结果第51-52页
   ·湖羊BMPR-IB基因的SSCP检测结果第51-52页
   ·夏洛来羊和特克塞尔羊BMPR-IB基因的SSCP检测结果第52页
   ·夏湖杂交羊BMPR-IB基因的SSCP检测结果第52页
 5 测序结果第52-53页
 6 BMPR-IB基因的遗传效应分析第53-56页
   ·不同绵羊品种的基因频率及基因型频率第53页
   ·不同绵羊品种BMPR-IB基因型分布差异检验第53-54页
   ·BMPR-IB基因对产羔数的影响第54页
   ·不同BMPR-IB基因型的夏湖杂交羊产羔数第54-56页
第四章 讨论第56-63页
 1 实验材料的选择第56页
 2 血液样品保存及提取第56页
 3 影响PCR扩增反应的因素第56-58页
   ·模板的质量第56-57页
   ·引物的设计第57页
   ·引物的浓度第57页
   ·PCR反应的温度第57-58页
   ·镁离子浓度第58页
 4 影响PCR-SSCP检测的因素第58-59页
   ·PCR扩增片断的长度第58页
   ·聚丙烯酰胺凝胶成分第58-59页
   ·聚丙烯酰胺凝胶电泳温度和电压第59页
 5 影响PCR-RFLP检测的因素第59页
 6 BMPR-IB基因Q249R突变的检测第59-61页
 7 BMPR-IB基因对绵羊繁殖性能的影响第61-63页
   ·对产羔数以及排卵数的影响第61-62页
   ·湖羊及其多胎性利用第62-63页
结论第63-64页
创新点第64-65页
参考文献第65-71页

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