| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 文献综述 | 第11-19页 |
| ·研究背景及意义 | 第11-12页 |
| ·肝癌及肝癌特异性抗体研究现状 | 第11页 |
| ·EGFRvⅢ及C12抗体 | 第11-12页 |
| ·利用CHO细胞表达抗体研究现状 | 第12页 |
| ·动物细胞无血清培养研究进展 | 第12-14页 |
| ·概述 | 第12-13页 |
| ·CHO细胞的无血清无蛋白培养基 | 第13页 |
| ·CHO细胞无血清驯化方法 | 第13页 |
| ·CHO细胞驯化过程中细胞结团的研究 | 第13-14页 |
| ·生物反应器大规模培养研究进展 | 第14-18页 |
| ·CHO培养方式选择及培养方法 | 第14-15页 |
| ·CHO基础代谢特征及代谢控制策略 | 第15-16页 |
| ·葡萄糖代谢 | 第15页 |
| ·谷氨酰氨代谢 | 第15页 |
| ·乳酸及氨代谢 | 第15-16页 |
| ·CHO细胞培养过程参数检测及控制 | 第16-17页 |
| ·对提高rCHO细胞表达产物产量的研究探索 | 第17-18页 |
| ·论文研究目的及主要内容 | 第18-19页 |
| 第2章 重组CHO细胞无血清驯化培养 | 第19-25页 |
| ·前言 | 第19页 |
| ·材料与方法 | 第19-21页 |
| ·实验材料和试剂 | 第19-20页 |
| ·CHO细胞静置贴壁培养方法 | 第20页 |
| ·CHO细胞无血清驯化 | 第20页 |
| ·细胞生长曲线测定 | 第20页 |
| ·CHO细胞无血清培养基的筛选 | 第20页 |
| ·C12H9抗体浓度测定 | 第20页 |
| ·细胞形态的观察 | 第20页 |
| ·细胞密度、存活率及比生长速率的测定及计算 | 第20-21页 |
| ·统计学分析 | 第21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-24页 |
| ·rCHO细胞降血清前后细胞形态,降血清过程中比生长速率、存活率比较 | 第21-22页 |
| ·降血清过程对rCHO细胞生长及抗体表达量的影响 | 第22-23页 |
| ·rCHO细胞无血清培养基的筛选 | 第23-24页 |
| ·小结 | 第24-25页 |
| 第3章 rCHO-C12细胞无血清悬浮培养特性 | 第25-34页 |
| ·前言 | 第25页 |
| ·材料与方法 | 第25-26页 |
| ·实验材料、试剂 | 第25页 |
| ·细胞培养方法 | 第25页 |
| ·分析 | 第25-26页 |
| ·结果与讨论 | 第26-33页 |
| ·接种密度对CHO-C12细胞生长及代谢的影响 | 第26-31页 |
| ·初始葡萄糖浓度对CHO-C12细胞生长及代谢的影响 | 第31-32页 |
| ·初始谷氨酰胺浓度对CHO-C12细胞生长的影响 | 第32-33页 |
| ·小结 | 第33-34页 |
| 第4章 rCHO-C12细胞生物反应器中批培养特性 | 第34-46页 |
| ·前言 | 第34页 |
| ·材料与方法 | 第34-35页 |
| ·实验材料、试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-35页 |
| ·摇瓶中批培养 | 第34页 |
| ·种子培养方法 | 第34页 |
| ·生物反应器中批培养方法 | 第34-35页 |
| ·分析 | 第35页 |
| ·结果与讨论 | 第35-44页 |
| ·批培养过程中细胞生长及抗体表达量情况 | 第35-39页 |
| ·批培养过程中葡萄糖和乳酸代谢 | 第39-40页 |
| ·批培养过程中谷氨酰胺和丙氨酸、氨代谢 | 第40-42页 |
| ·批培养过程中氨基酸代谢分析 | 第42-44页 |
| ·小结 | 第44-46页 |
| 第5章 rCHO-C12细胞流加与罐注培养特性 | 第46-55页 |
| ·前言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-47页 |
| ·生物反应器 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·低密度接种流加培养 | 第46页 |
| ·氨基酸平衡 | 第46页 |
| ·连续罐注培养 | 第46页 |
| ·数据分析 | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-54页 |
| ·低密度接种流加培养(Fed-batch culture) | 第47-49页 |
| ·氨基酸平衡的流加培养 | 第49-51页 |
| ·Wave生物反应器中罐注培养(Perfusion culture) | 第51-54页 |
| ·本章结论 | 第54-55页 |
| 第6章 总结与展望 | 第55-57页 |
| ·全文总结 | 第55页 |
| ·展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 附录 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64页 |
