| 缩略语表 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一部分 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的分离培养 | 第12-18页 |
| 一、材料和方法 | 第12-14页 |
| 1. 实验动物 | 第12页 |
| 2. 手术器材 | 第12页 |
| 3. 化学试剂与耗材 | 第12页 |
| 4. 仪器 | 第12页 |
| 5. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的分离 | 第12-13页 |
| 6. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的培养及扩增 | 第13页 |
| 7. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞生长曲线的绘制 | 第13-14页 |
| 二、结果 | 第14-16页 |
| 1. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的原代细胞 | 第14页 |
| 2. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的第三代细胞 | 第14页 |
| 3. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的生长曲线 | 第14-16页 |
| 4. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的多次传代 | 第16页 |
| 三、讨论 | 第16-18页 |
| 1. 组织部位的选取 | 第16页 |
| 2. 脂肪间充质干细胞分离方法的改进 | 第16-17页 |
| 3. 骨髓间充质干细胞各种分离方法的尝试 | 第17页 |
| 4. 两种间充质干细胞的培养方法的建立 | 第17页 |
| 5. 两种间充质干细胞的生长特性 | 第17-18页 |
| 第二部分 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的鉴定 | 第18-28页 |
| 一、材料和方法 | 第18-22页 |
| 1. 化学试剂与耗材 | 第18页 |
| 2. 仪器 | 第18页 |
| 3. 流式细胞术检测细胞表面标记物 | 第18-19页 |
| 4. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞的成骨、成脂分化 | 第19页 |
| 5. 碱性磷酸酶染色 | 第19页 |
| 6. 油红O 染色 | 第19页 |
| 7. 提取细胞总RNA 及定量 | 第19-20页 |
| 8. 反转录获得cDNA 模板 | 第20页 |
| 9. PCR 反应扩增目的基因 | 第20-21页 |
| 10. PCR 产物鉴定 | 第21-22页 |
| 11. PCR 结果的半定量分析 | 第22页 |
| 二、结果 | 第22-26页 |
| 1. 流式细胞术检测细胞表面标记物结果 | 第22-23页 |
| 2. 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞向成脂和成骨细胞分化后的形态学观察 | 第23页 |
| 3. 碱性磷酸酶染色结果 | 第23-24页 |
| 4. 油红O染色结果 | 第24页 |
| 5. PCR 产物琼脂糖凝胶电泳 | 第24-25页 |
| 6. 未诱导组和诱导组各标志性基因的mRNA 相对水平的比较 | 第25页 |
| 7. 未诱导组和诱导组各标志性基因mRNA 相对水平的上调分析 | 第25-26页 |
| 三、讨论 | 第26-28页 |
| 1. 间充质干细胞表面标记物的鉴定 | 第26页 |
| 2. 间充质干细胞的诱导分化 | 第26-27页 |
| 3. 标志性基因的选择 | 第27页 |
| 4. 间充质干细胞未诱导组与诱导组标志性基因的检测比较 | 第27-28页 |
| 第三部分 大鼠脂肪和骨髓间充质干细胞蛋白质组学比较 | 第28-39页 |
| 一、材料和方法 | 第28-32页 |
| 1. 化学试剂与耗材 | 第28页 |
| 2. 仪器 | 第28页 |
| 3. 两种间充质干细胞全细胞蛋白的样品制备 | 第28-29页 |
| 4. 双向电泳 | 第29-31页 |
| 5. 分析型电泳凝胶的银氨染色（银染） | 第31页 |
| 6. 制备型电泳凝胶的考马斯亮兰染色（考染） | 第31页 |
| 7. 图像扫描与分析 | 第31页 |
| 8. 胶内酶切 | 第31-32页 |
| 9. 胰酶解肽段混合物的MALDI-TOF 质谱检测 | 第32页 |
| 10. 数据库查询 | 第32页 |
| 二、结果 | 第32-36页 |
| 1. 两种间充质干全细胞蛋白定量结果 | 第32-33页 |
| 2. 两种间充质干细胞全细胞蛋白的双向电泳银染图谱 | 第33-34页 |
| 3. 质谱检测差异蛋白结果 | 第34-35页 |
| 4. 大鼠ADSC 和BMSC 差异蛋白表达量的比较结果 | 第35-36页 |
| 三、讨论 | 第36-39页 |
| 1. 蛋白质组学技术及其在间充质干细胞中的应用 | 第36-37页 |
| 2. 两种间充质干细胞差异蛋白的分析 | 第37-39页 |
| 小结 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 附录 1 PCR 扩增目的基因引物设计 | 第43-44页 |
| 附录 2 主要溶液的配制 | 第44-49页 |
| 综述 | 第49-53页 |
| 个人简历 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
