| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-23页 |
| ·维生素E 的研究进展 | 第13-17页 |
| ·维生素E 的分类与活性 | 第13-14页 |
| ·植物体内维生素E 的合成途径 | 第14页 |
| ·植物维生素E 基因工程的研究 | 第14-17页 |
| ·花生属植物起源、分类及物种间亲缘关系研究 | 第17-20页 |
| ·花生属植物的起源和分类 | 第17-18页 |
| ·花生栽培种与二倍体野生种间亲缘关系的研究 | 第18-20页 |
| ·农杆菌介导的花生遗传转化研究进展 | 第20-22页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化方法原理 | 第20-21页 |
| ·花生再生体系研究进展 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的意义 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-34页 |
| ·花生VTE3 和HPT 基因的克隆试验 | 第23-30页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·试验方法 | 第24-30页 |
| ·花生VTE3 的电子克隆及引物设计 | 第24页 |
| ·根据花生EST 序列设计扩增HPT 的引物 | 第24页 |
| ·花生幼果总RNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·总RNA 的检测 | 第25页 |
| ·所提取RNA 的逆转录 | 第25-26页 |
| ·目的基因VTE3 和HPT 的RT-PCR | 第26-27页 |
| ·花生基因组DNA 的提取 | 第27页 |
| ·DNA 为模板PCR 扩增VTE3 | 第27-28页 |
| ·目的基因的胶回收 | 第28页 |
| ·目的片段与pEASY-T1 载体连接并转化大肠杆菌 | 第28-29页 |
| ·阳性重组子鉴定和测序 | 第29页 |
| ·序列分析 | 第29-30页 |
| ·拟南芥γ-tmt 对花生的转化试验 | 第30-34页 |
| ·试验材料 | 第30-31页 |
| ·植物材料 | 第30页 |
| ·菌种和质粒 | 第30页 |
| ·供试培养基 | 第30-31页 |
| ·试验方法 | 第31-34页 |
| ·基因转化方法 | 第31页 |
| ·转基因花生的鉴定 | 第31-32页 |
| ·T_0 代转基因苗移栽 | 第32-33页 |
| ·T_1 代转基因植株的种植 | 第33页 |
| ·T_1 代转基因植株的PCR 检测 | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-58页 |
| ·花生VTE3 的克隆及序列分析 | 第34-47页 |
| ·花生VTE3 的电子克隆 | 第34页 |
| ·花生总RNA 的提取及逆转录 | 第34页 |
| ·花生VTE3 扩增及测序结果 | 第34-37页 |
| ·花生VTE3 核苷酸序列分析 | 第37-44页 |
| ·丰花2 号VTE3 核苷酸序列分析 | 第37-39页 |
| ·cDNA 序列分析 | 第37页 |
| ·DNA 序列分析 | 第37-39页 |
| ·不同栽培品种VTE3 核苷酸序列分析 | 第39-41页 |
| ·栽培种和野生种VTE3 序列的比对及系统进化分析 | 第41-44页 |
| ·花生VTE3 核苷酸序列推导的氨基酸序列分析 | 第44-46页 |
| ·花生与其它植物VTE3 编码的氨基酸序列同源性分析 | 第46-47页 |
| ·花生HPT 的克隆及序列分析 | 第47-54页 |
| ·引物设计及RT-PCR 扩增结果 | 第47-48页 |
| ·AhHPT 推导的氨基酸序列分析 | 第48-50页 |
| ·同源比对与系统进化树构建 | 第50-54页 |
| ·拟南芥γ－tmt对花生的转化 | 第54-58页 |
| ·γ-tmt 基因的花生转化及PPT 抗性植株的获得 | 第54页 |
| ·抗性苗的PCR 检测 | 第54-55页 |
| ·γ-tmt 基因的检测 | 第54-55页 |
| ·bar 基因的检测 | 第55页 |
| ·T_0 代转基因苗大田移栽 | 第55-56页 |
| ·T_0 代转基因植株性状调查 | 第56页 |
| ·T_1 代转基因植株种植 | 第56页 |
| ·T_1 代转基因植株PCR 检测 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-62页 |
| ·基于EST 的基因克隆策略 | 第58页 |
| ·栽培花生两条VTE3 序列的鉴别方法 | 第58-59页 |
| ·花生栽培种中HPT 基因的拷贝数 | 第59页 |
| ·不同类型花生栽培种的起源 | 第59页 |
| ·栽培花生与6 个二倍体野生种之间的亲缘关系 | 第59-60页 |
| ·花生区组二倍体野生种的分组 | 第60-61页 |
| ·花生转化苗大田移栽方法 | 第61-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-70页 |
| 附录1：主要化学试剂及缓冲液配制 | 第70-71页 |
| 附录2：常用培养基配方 | 第71-73页 |
| 图版 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第75-76页 |
| 硕士学位论文内容简介及自评 | 第76页 |
