重组人纤溶酶原Kringle5真核表达质粒的构建及其抗肿瘤作用的初步研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一部分 重组pK5质粒的构建及制备 | 第9-19页 |
| 一.实验材料 | 第9-10页 |
| 二.实验方法 | 第10-15页 |
| 1.用PCR方法获得K5分泌表达序列 | 第10-11页 |
| 2.pMD-18T-K5质粒的构建 | 第11-13页 |
| 3.重组pK5质粒的构建 | 第13-14页 |
| 4.重组pK5质粒的制备 | 第14-15页 |
| 三.实验结果 | 第15-18页 |
| 1.K5分泌表达序列的PCR扩增结果 | 第16页 |
| 2.pMD-18T／K5质粒的双酶切鉴定结果 | 第16-17页 |
| 3.重组pK5质粒的双酶切鉴定结果 | 第17页 |
| 4.重组pK5质粒的测序结果 | 第17-18页 |
| 四.讨论 | 第18页 |
| 五.小结 | 第18-19页 |
| 第二部分 重组pK5质粒理化性质测定 | 第19-34页 |
| 一 实验材料 | 第19-20页 |
| 二 实验方法 | 第20-24页 |
| 三.实验结果 | 第24-32页 |
| 四.讨论 | 第32-33页 |
| 五.小结 | 第33-34页 |
| 第三部分 重组pK5质粒体内与体外表达的研究 | 第34-46页 |
| 一.实验材料 | 第34-35页 |
| 二.实验方法 | 第35-39页 |
| 1.K5蛋白多克隆抗体的制备 | 第35页 |
| 2.ELISA竞争法测定K5蛋白浓度的方法的建立 | 第35-36页 |
| 3.重组pK5质粒的体外表达研究 | 第36-38页 |
| 4.重组pK5质粒的体内表达研究 | 第38-39页 |
| 三.实验结果 | 第39-44页 |
| 1.K5抗体纯化结果 | 第39页 |
| 2.ELISA竞争法测定K5蛋白浓度的方法的建立 | 第39-41页 |
| 3.重组pK5质粒的体外表达研究 | 第41-42页 |
| 4.重组pK5质粒的体内表达研究 | 第42-44页 |
| 四.讨论 | 第44-45页 |
| 五.小结 | 第45-46页 |
| 第四部分 重组pK5质粒的抗肿瘤作用研究 | 第46-59页 |
| 一.实验材料 | 第46页 |
| 二.实验方法 | 第46-49页 |
| 1.小鼠Lewis肺癌肿瘤模型的建立 | 第46-47页 |
| 2.不同注射途径给药对肿瘤抑制作用的比较 | 第47页 |
| 3.体内电穿孔给药对肿瘤抑制作用的研究 | 第47-49页 |
| 三.实验结果 | 第49-57页 |
| 1.不同注射途径给药对肿瘤抑制作用的比较 | 第49-50页 |
| 2.体内电穿孔给药对肿瘤抑制作用的研究 | 第50-57页 |
| 四.讨论 | 第57-58页 |
| 五.小结 | 第58-59页 |
| 总结 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-62页 |
| 综述 内源性血管生成抑制因子及其基因治疗进展 | 第62-76页 |
| 附录 | 第76-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 版权声明 | 第81页 |
