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半夏蛋白的分离纯化及结构分析

摘要第1-10页
Abstract第10-15页
缩略语第15-16页
第一章 文献综述第16-29页
   ·半夏的研究进展第16-20页
     ·半夏概述第16-18页
     ·半夏的化学成分第18-19页
     ·半夏的药理作用第19-20页
     ·半夏的组织培养研究第20页
   ·植物凝集素概述第20-24页
     ·植物凝集素的分类第21-22页
     ·植物凝集素与糖结合特性第22页
     ·植物凝集素的防御功能第22-23页
     ·植物凝集素在基因工程中的应用第23-24页
   ·半夏蛋白概述第24-28页
     ·半夏蛋白含量测定第24-25页
     ·半夏蛋白的分离纯化第25-26页
     ·半夏蛋白的结构性质第26-27页
     ·半夏蛋白的生物学功能第27-28页
     ·半夏蛋白的作用第28页
   ·小结第28-29页
第二章 实验设计第29-31页
   ·实验目的和意义第29页
   ·研究内容第29-30页
   ·实验流程图第30-31页
第三章 半夏总蛋白的提取第31-38页
   ·材料、试剂与仪器第31-33页
     ·实验材料第31页
     ·实验仪器第31页
     ·试剂及其配制第31-33页
   ·方法与内容第33-36页
     ·半夏总蛋白提取第33-34页
     ·SDS-PAGE 电泳分析第34-35页
     ·两种产地植物半夏中半夏蛋白SDS-PAGE 的比较第35-36页
   ·结果与分析第36-37页
     ·半夏蛋白的提取及分析第36-37页
   ·小结与讨论第37-38页
第四章 提取半夏蛋白的分离纯化第38-50页
   ·试剂与仪器第38-40页
     ·试剂及其配制第38-39页
     ·仪器第39-40页
   ·方法与内容第40-44页
     ·半夏蛋白的Sephadex G-50 凝胶过滤和MBP 亲和层析分离第40-41页
     ·提取半夏蛋白的疏水层析策略第41-42页
     ·提取半夏蛋白的亲和层析策略第42-44页
     ·凝胶层析第44页
     ·纯化半夏蛋白的SDS-PAGE 电泳(方法与上同)第44页
   ·结果与分析第44-48页
     ·半夏蛋白Sephadex G-50 凝胶过滤和MBP 亲和层析分离第44-45页
     ·提取蛋白的疏水层析纯化第45-46页
     ·甘露糖-Sepharose 4B 亲和层析纯化第46-48页
     ·凝胶层析结果分析第48页
   ·小结与讨论第48-50页
第五章 半夏蛋白的部分特性与氨基酸组成分析第50-57页
   ·材料、试剂与仪器第50-51页
     ·材料第50页
     ·试剂及其配制第50-51页
     ·仪器第51页
   ·方法与内容第51-53页
     ·质谱检测第51页
     ·糖蛋白的测定第51-52页
     ·血凝效价测定第52页
     ·氨基酸组成分析第52-53页
   ·结果与分析第53-56页
     ·质谱结果分析第53页
     ·糖蛋白的测定结果分析第53-54页
     ·凝血效价测定结果分析第54-55页
     ·氨基酸组成结果分析第55-56页
   ·小结与讨论第56-57页
第六章 半夏蛋白的原核表达和纯化第57-69页
   ·材料、试剂与仪器第57-60页
     ·材料第57页
     ·试剂及其配制第57-60页
   ·方法与内容第60-65页
     ·pET-28a 和pEasy T1-pta 的双酶切第60-61页
     ·酶切产物处理第61页
     ·连接反应第61页
     ·BL21-Star 感受态细胞的制备(CaCl_2 法)第61-62页
     ·连接产物的转化第62页
     ·重组质粒的筛选与鉴定第62-64页
     ·目的基因的诱导表达第64页
     ·SDS-PAGE 分析表达产物第64页
     ·重组蛋白的分离纯化第64-65页
   ·结果与分析第65-67页
     ·PCR 扩增目的基因的琼脂糖凝胶电泳检测第65-66页
     ·重组质粒pET-28a-pta 的双酶切鉴定第66页
     ·pET-28a-pta 诱导表达的SDS-PAGE 分析第66-67页
     ·重组蛋白的Ni 亲和纯化结果分析第67页
   ·小结与讨论第67-69页
全文总结第69-71页
参考文献第71-75页
致谢第75-76页
附录:学位论文发表情况第76页

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