摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-15页 |
缩略语 | 第15-16页 |
第一章 文献综述 | 第16-29页 |
·半夏的研究进展 | 第16-20页 |
·半夏概述 | 第16-18页 |
·半夏的化学成分 | 第18-19页 |
·半夏的药理作用 | 第19-20页 |
·半夏的组织培养研究 | 第20页 |
·植物凝集素概述 | 第20-24页 |
·植物凝集素的分类 | 第21-22页 |
·植物凝集素与糖结合特性 | 第22页 |
·植物凝集素的防御功能 | 第22-23页 |
·植物凝集素在基因工程中的应用 | 第23-24页 |
·半夏蛋白概述 | 第24-28页 |
·半夏蛋白含量测定 | 第24-25页 |
·半夏蛋白的分离纯化 | 第25-26页 |
·半夏蛋白的结构性质 | 第26-27页 |
·半夏蛋白的生物学功能 | 第27-28页 |
·半夏蛋白的作用 | 第28页 |
·小结 | 第28-29页 |
第二章 实验设计 | 第29-31页 |
·实验目的和意义 | 第29页 |
·研究内容 | 第29-30页 |
·实验流程图 | 第30-31页 |
第三章 半夏总蛋白的提取 | 第31-38页 |
·材料、试剂与仪器 | 第31-33页 |
·实验材料 | 第31页 |
·实验仪器 | 第31页 |
·试剂及其配制 | 第31-33页 |
·方法与内容 | 第33-36页 |
·半夏总蛋白提取 | 第33-34页 |
·SDS-PAGE 电泳分析 | 第34-35页 |
·两种产地植物半夏中半夏蛋白SDS-PAGE 的比较 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-37页 |
·半夏蛋白的提取及分析 | 第36-37页 |
·小结与讨论 | 第37-38页 |
第四章 提取半夏蛋白的分离纯化 | 第38-50页 |
·试剂与仪器 | 第38-40页 |
·试剂及其配制 | 第38-39页 |
·仪器 | 第39-40页 |
·方法与内容 | 第40-44页 |
·半夏蛋白的Sephadex G-50 凝胶过滤和MBP 亲和层析分离 | 第40-41页 |
·提取半夏蛋白的疏水层析策略 | 第41-42页 |
·提取半夏蛋白的亲和层析策略 | 第42-44页 |
·凝胶层析 | 第44页 |
·纯化半夏蛋白的SDS-PAGE 电泳(方法与上同) | 第44页 |
·结果与分析 | 第44-48页 |
·半夏蛋白Sephadex G-50 凝胶过滤和MBP 亲和层析分离 | 第44-45页 |
·提取蛋白的疏水层析纯化 | 第45-46页 |
·甘露糖-Sepharose 4B 亲和层析纯化 | 第46-48页 |
·凝胶层析结果分析 | 第48页 |
·小结与讨论 | 第48-50页 |
第五章 半夏蛋白的部分特性与氨基酸组成分析 | 第50-57页 |
·材料、试剂与仪器 | 第50-51页 |
·材料 | 第50页 |
·试剂及其配制 | 第50-51页 |
·仪器 | 第51页 |
·方法与内容 | 第51-53页 |
·质谱检测 | 第51页 |
·糖蛋白的测定 | 第51-52页 |
·血凝效价测定 | 第52页 |
·氨基酸组成分析 | 第52-53页 |
·结果与分析 | 第53-56页 |
·质谱结果分析 | 第53页 |
·糖蛋白的测定结果分析 | 第53-54页 |
·凝血效价测定结果分析 | 第54-55页 |
·氨基酸组成结果分析 | 第55-56页 |
·小结与讨论 | 第56-57页 |
第六章 半夏蛋白的原核表达和纯化 | 第57-69页 |
·材料、试剂与仪器 | 第57-60页 |
·材料 | 第57页 |
·试剂及其配制 | 第57-60页 |
·方法与内容 | 第60-65页 |
·pET-28a 和pEasy T1-pta 的双酶切 | 第60-61页 |
·酶切产物处理 | 第61页 |
·连接反应 | 第61页 |
·BL21-Star 感受态细胞的制备(CaCl_2 法) | 第61-62页 |
·连接产物的转化 | 第62页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第62-64页 |
·目的基因的诱导表达 | 第64页 |
·SDS-PAGE 分析表达产物 | 第64页 |
·重组蛋白的分离纯化 | 第64-65页 |
·结果与分析 | 第65-67页 |
·PCR 扩增目的基因的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第65-66页 |
·重组质粒pET-28a-pta 的双酶切鉴定 | 第66页 |
·pET-28a-pta 诱导表达的SDS-PAGE 分析 | 第66-67页 |
·重组蛋白的Ni 亲和纯化结果分析 | 第67页 |
·小结与讨论 | 第67-69页 |
全文总结 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
附录:学位论文发表情况 | 第76页 |