一种侵染棉花黄萎病菌的双链RNA病毒研究
| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-19页 |
| 1 棉花黄萎病菌研究进展 | 第14-15页 |
| ·生物学特性 | 第14页 |
| ·防治技术 | 第14-15页 |
| 2 植物病原真菌病毒研究进展 | 第15-17页 |
| ·真菌病毒与弱毒株研究 | 第15-16页 |
| ·产黄青霉病毒科研究现状 | 第16-17页 |
| 3 双链RNA 全序列克隆方法 | 第17-18页 |
| ·单引物法 | 第17页 |
| ·随机引物法 | 第17-18页 |
| ·同源引物法 | 第18页 |
| 4 研究目的和内容 | 第18-19页 |
| ·研究目的 | 第18页 |
| ·研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 棉花黄萎病菌dsRNA 检测 | 第19-23页 |
| 1 材料与方法 | 第19-21页 |
| ·菌种来源 | 第19-20页 |
| ·菌种培养与保存 | 第20页 |
| ·酶与试剂 | 第20页 |
| ·dsRNA 提取 | 第20-21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-22页 |
| 3 小结与讨论 | 第22-23页 |
| 第三章 双链RNA 全长cDNA 克隆 | 第23-32页 |
| 1 材料与方法 | 第23-28页 |
| ·材料 | 第23页 |
| ·酶与试剂 | 第23页 |
| ·dsRNA 纯化 | 第23-24页 |
| ·dsRNA 序列克隆 | 第24-28页 |
| ·M-SPAT 法序列扩增 | 第24-26页 |
| ·cDNA 片段连接反应 | 第26-27页 |
| ·重组质粒转化 | 第27页 |
| ·碱法制备重组质粒DNA | 第27页 |
| ·重组质粒酶切鉴定 | 第27-28页 |
| ·序列测定 | 第28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-31页 |
| ·cDNA 扩增结果 | 第28-29页 |
| ·质粒提取与酶切鉴定 | 第29-31页 |
| ·测序结果 | 第31页 |
| 3 小结与讨论 | 第31-32页 |
| 第四章 全长cDNA 序列分析与病毒特征鉴定 | 第32-50页 |
| 1 材料与方法 | 第32-36页 |
| ·菌种培养 | 第32页 |
| ·酶与试剂 | 第32页 |
| ·序列分析 | 第32页 |
| ·病毒粒子提取与纯化 | 第32-33页 |
| ·病毒粒子电镜观察 | 第33页 |
| ·SDS-PAGE 检测外壳蛋白 | 第33-34页 |
| ·从病毒粒子样品中提取基因组 | 第34页 |
| ·基因组斑点杂交 | 第34-36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-48页 |
| ·基因组序列分析 | 第36-46页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第36-38页 |
| ·编码蛋白序列分析 | 第38-46页 |
| ·病毒特征鉴定 | 第46-48页 |
| ·病毒粒子电镜观察 | 第46页 |
| ·SDS-PAGE 检测 | 第46-47页 |
| ·病毒基因组提取结果 | 第47页 |
| ·基因组斑点杂交 | 第47-48页 |
| 3 小结与讨论 | 第48-50页 |
| 总结与讨论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55-59页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第59页 |