核黄素营养酵母生产菌株的选育及培养条件研究
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-37页 |
| ·核黄素概述 | 第13页 |
| ·核黄素的生理作用和医学作用 | 第13-18页 |
| ·参与机体的能量代谢 | 第14页 |
| ·参与碳水化合物的代谢 | 第14-15页 |
| ·核黄素可改善缺铁性贫血 | 第15页 |
| ·核黄素预防心脑血管疾病 | 第15-16页 |
| ·核黄素的防癌作用 | 第16页 |
| ·核黄素提高人体对恶劣环境的适应力 | 第16-17页 |
| ·不同人群对核黄素的需求量 | 第17-18页 |
| ·核黄素的研究与生产概况 | 第18-22页 |
| ·核黄素的生物合成代谢途径 | 第19页 |
| ·发酵法生产核黄素的微生物 | 第19-21页 |
| ·阿舒假囊酵母 | 第20-21页 |
| ·棉病阿舒囊霉 | 第21页 |
| ·酿酒酵母 | 第21页 |
| ·假丝酵母 | 第21页 |
| ·枯草杆菌 | 第21页 |
| ·基因工程在核黄素生产菌改造中的应用 | 第21-22页 |
| ·营养酵母的研究进展 | 第22-27页 |
| ·酵母的营养意义 | 第22页 |
| ·食用酵母概念及产品种类 | 第22-24页 |
| ·按酵母菌种来源分类 | 第23页 |
| ·按产品形状分类 | 第23页 |
| ·按酵母的营养功能或培养方法分类 | 第23-24页 |
| ·食用酵母的营养价值 | 第24页 |
| ·国内外食用酵母的生产与研究概况 | 第24-27页 |
| ·国内外研究现状 | 第25-27页 |
| ·食用酵母的生产方法 | 第27页 |
| ·酵母胞内核黄素的测定方法 | 第27-29页 |
| ·分光光度法 | 第28页 |
| ·荧光光度法 | 第28页 |
| ·直接荧光法 | 第28页 |
| ·光黄素测定法 | 第28页 |
| ·液相色谱法 | 第28-29页 |
| ·酵母胞内核黄素的合成代谢 | 第29-30页 |
| ·本论文的立题依据和研究内容 | 第30-31页 |
| ·立题依据 | 第30-31页 |
| ·研究内容 | 第31页 |
| ·酵母胞内核黄素测定方法研究 | 第31页 |
| ·生产菌株的确定与改良 | 第31页 |
| ·发酵培养基优化 | 第31页 |
| ·发酵条件优化 | 第31页 |
| ·在5L发酵罐中流加培养条件研究 | 第31页 |
| 参考文献 | 第31-37页 |
| 第二章 酵母胞内核黄素含量测定方法的研究 | 第37-50页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·主要试剂 | 第38页 |
| ·主要溶液 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-40页 |
| ·样品的提取与制备 | 第39页 |
| ·分光光度法测定核黄素含量 | 第39页 |
| ·荧光光度法测定核黄素含量 | 第39-40页 |
| ·高效液相色谱法测定核黄素含量 | 第40页 |
| ·结果与讨论 | 第40-48页 |
| ·酵母中核黄素提取方法的确定 | 第40页 |
| ·荧光检测条件的确定 | 第40-43页 |
| ·发射光波长的确定 | 第40-41页 |
| ·激发光波长的确定 | 第41-43页 |
| ·高效液相色谱条件的确定 | 第43-44页 |
| ·流动相浓度的确定 | 第43页 |
| ·流动相流速的确定 | 第43-44页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第44-46页 |
| ·分光光度法 | 第45页 |
| ·荧光光度法 | 第45-46页 |
| ·高效液相色谱法 | 第46页 |
| ·不同测定方法加标回收率的研究 | 第46-47页 |
| ·不同测定方法重现性与准确率的研究 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48页 |
| 参考文献 | 第48-50页 |
| 第三章 核黄素酵母菌的诱变育种 | 第50-65页 |
| ·引言 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50-53页 |
| ·菌种 | 第50-51页 |
| ·主要仪器 | 第51页 |
| ·主要试剂 | 第51-52页 |
| ·相关溶液 | 第52页 |
| ·柠檬酸-磷酸缓冲液(CPB) | 第52页 |
| ·巯基乙醇 | 第52页 |
| ·去壁酶液 | 第52页 |
| ·培养基 | 第52-53页 |
| ·种子培养基 | 第52页 |
| ·发酵培养基 | 第52-53页 |
| ·酵母基本固体培养基 | 第53页 |
| ·YEPD固体培养基 | 第53页 |
| ·高渗YEPD固体培养基 | 第53页 |
| ·8-氮鸟嘌呤抗性筛选培养基 | 第53页 |
| ·寡酶素抗性筛选培养基 | 第53页 |
| ·实验方法 | 第53-56页 |
| ·菌体生长曲线的测定 | 第53页 |
| ·原生质体制备 | 第53页 |
| ·致死曲线的绘制 | 第53-54页 |
| ·诱变方法 | 第54页 |
| ·8-氮鸟嘌呤抗性突变株的筛选 | 第54页 |
| ·寡酶素抗性突变株的筛选 | 第54-55页 |
| ·性能检测 | 第55页 |
| ·分析方法 | 第55-56页 |
| ·胞内核黄素的测定 | 第55页 |
| ·酵母核酸含量测定 | 第55页 |
| ·酵母粗蛋白含量测定 | 第55页 |
| ·酵母自溶率的测定 | 第55页 |
| ·葡萄糖测定 | 第55-56页 |
| ·结果与讨论 | 第56-63页 |
| ·出发菌株的选择 | 第56-60页 |
| ·6株酵母菌的生长曲线 | 第56-57页 |
| ·不同酵母菌胞内核黄素含量 | 第57页 |
| ·不同酵母菌生物量 | 第57-58页 |
| ·核酸及蛋白质含量 | 第58页 |
| ·不同酵母菌的自溶率 | 第58-60页 |
| ·致死曲线绘制与诱变剂量选择 | 第60-61页 |
| ·出发菌株药物抗性检验 | 第61页 |
| ·抗性突变株的选育 | 第61-62页 |
| ·发酵性能检测 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63页 |
| 参考文献 | 第63-65页 |
| 第四章 核黄素营养酵母的原生质体融合育种 | 第65-81页 |
| ·引言 | 第65页 |
| ·实验材料 | 第65-67页 |
| ·菌种 | 第65-66页 |
| ·主要仪器 | 第66页 |
| ·主要试剂 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66-67页 |
| ·产孢培养基 | 第66页 |
| ·药物梯度培养基 | 第66页 |
| ·高渗固体再生培养基 | 第66页 |
| ·高渗半固体再生培养基 | 第66页 |
| ·药物抗性筛选培养基 | 第66页 |
| ·YPD固体平板 | 第66-67页 |
| ·主要溶液 | 第67页 |
| ·核黄素标准液 | 第67页 |
| ·柠檬酸-磷酸缓冲液(CPB) | 第67页 |
| ·巯基乙醇 | 第67页 |
| ·去壁酶液 | 第67页 |
| ·促融合剂 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-69页 |
| ·亲株的产孢试验 | 第67页 |
| ·菌体生长曲线测定 | 第67页 |
| ·原生质体形成条件确定 | 第67-68页 |
| ·原生质体再生 | 第68页 |
| ·原生质体形成率与再生率的计算 | 第68页 |
| ·原生质体药物抗性检验 | 第68页 |
| ·原生质体灭活 | 第68页 |
| ·原生质体紫外灭活 | 第68页 |
| ·原生质体的热灭活 | 第68页 |
| ·原生质体融合 | 第68-69页 |
| ·单亲灭活原生质体融合 | 第69页 |
| ·亲灭活原生质体融合 | 第69页 |
| ·融合菌株的筛选及性能检验 | 第69页 |
| ·融合子遗传稳定性研究 | 第69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-79页 |
| ·单倍体亲株的生长曲线 | 第69页 |
| ·原生质体制备条件的确定 | 第69-76页 |
| ·β-巯基乙醇处理对原生质体形成及再生的影响 | 第70页 |
| ·酶的种类对原生质体形成的影响 | 第70-71页 |
| ·酶浓度对原生质体形成及再生的影响 | 第71-72页 |
| ·酶解温度的影响 | 第72-73页 |
| ·酶解时间的影响 | 第73-74页 |
| ·亲株及原生质体的形态 | 第74-76页 |
| ·亲株原生质体药物抗性检验 | 第76页 |
| ·亲株原生质体致死条件的研究 | 第76-77页 |
| ·原生质体融合 | 第77-79页 |
| ·Ca~(2+)浓度对融合率的影响 | 第77页 |
| ·PEG作用时间对融合率的影响 | 第77-78页 |
| ·单亲灭活原生质体融合 | 第78页 |
| ·双亲灭活原生质体融合 | 第78页 |
| ·融合子的性能检验 | 第78-79页 |
| ·本章小结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-81页 |
| 第五章 核黄素营养酵母培养基及培养条件优化 | 第81-105页 |
| ·引言 | 第81-82页 |
| ·实验材料 | 第82-83页 |
| ·菌种 | 第82页 |
| ·主要仪器 | 第82页 |
| ·主要试剂 | 第82页 |
| ·培养基 | 第82-83页 |
| ·斜面活化培养基 | 第82页 |
| ·种子培养基 | 第82页 |
| ·糖蜜培养基 | 第82页 |
| ·发酵培养基 | 第82-83页 |
| ·实验方法 | 第83-85页 |
| ·种子活化 | 第83页 |
| ·种子培养 | 第83页 |
| ·发酵培养 | 第83页 |
| ·B-P析因实验设计 | 第83-84页 |
| ·金属离子的影响——均匀设计 | 第84-85页 |
| ·分析方法 | 第85页 |
| ·结果与讨论 | 第85-98页 |
| ·核黄素生成与酵母生长的关系 | 第86页 |
| ·酵母生长及核黄素合成的影响因素筛选 | 第86-88页 |
| ·氮源适应性实验 | 第88-89页 |
| ·生物素对发酵的影响 | 第89-90页 |
| ·硫胺素对发酵的影响 | 第90-91页 |
| ·金属离子对酵母生长及核黄素含量的影响 | 第91-94页 |
| ·培养基初始pH值对酵母生长及核黄素合成的影响 | 第94-95页 |
| ·溶氧水平对酵母生物量及核黄素合成的影响 | 第95-97页 |
| ·不同转速对酵母生长及核黄素含量的影响 | 第96页 |
| ·不同装液量对酵母生长及核黄素含量的影响 | 第96-97页 |
| ·添加豆油对胞内核黄素的影响 | 第97-98页 |
| ·本章小结 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-105页 |
| 第六章 5L发酵罐流加培养过程及发酵动力学研究 | 第105-123页 |
| ·引言 | 第105-106页 |
| ·实验材料 | 第106-107页 |
| ·菌种 | 第106页 |
| ·主要仪器 | 第106页 |
| ·主要试剂 | 第106页 |
| ·相关溶液 | 第106-107页 |
| ·0.1mol／LNa_2S_2O_3标准溶液 | 第106页 |
| ·0.05mol／LI_2标准溶液 | 第106页 |
| ·0.2％淀粉指示剂 | 第106页 |
| ·亚硫酸钠溶液 | 第106页 |
| ·发酵基液 | 第106页 |
| ·营养盐溶液 | 第106-107页 |
| ·培养基 | 第107页 |
| ·实验方法 | 第107-108页 |
| ·溶氧系数的测定 | 第107页 |
| ·种子培养及活化 | 第107页 |
| ·流加培养 | 第107页 |
| ·测定方法 | 第107-108页 |
| ·结果与讨论 | 第108-121页 |
| ·体积溶氧系数的测定 | 第108-109页 |
| ·不同溶氧水平对酵母胞内核黄素含量的影响 | 第109-110页 |
| ·不同pH值对酵母胞内核黄素含量的影响 | 第110-112页 |
| ·添加豆油对酵母胞内核黄素含量的影响 | 第112-113页 |
| ·不同糖浓度对酵母生长即核黄素含量的影响 | 第113-115页 |
| ·种子质量对酵母生长及核黄素含量的影响 | 第115-116页 |
| ·酵母胞内核黄素的生成与酵母生长的关系 | 第116-120页 |
| ·摇瓶培养中酵母胞内核黄素生成与酵母生长的关系 | 第116-118页 |
| ·流加培养中酵母的生长与核黄素的生成 | 第118-120页 |
| ·温度休克对酵母核黄素含量的影响 | 第120-121页 |
| ·本章小结 | 第121-122页 |
| 参考文献 | 第122-123页 |
| 第七章 全文总结与展望 | 第123-126页 |
| ·全文总结 | 第123-125页 |
| ·酵母胞内核黄素含量的测定方法研究 | 第123页 |
| ·酵母营养体及原生质体诱变选育高核黄素含量菌种 | 第123页 |
| ·原生质体融合选育高核黄素含量酵母菌种 | 第123-124页 |
| ·发酵培养基及发酵条件优化研究 | 第124页 |
| ·5L发酵罐流加培养过程及发酵条件研究 | 第124-125页 |
| ·本论文创新点 | 第125页 |
| ·展望 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
| 攻读博士期间发表论文 | 第127页 |
